简介：目的应用白念珠菌全基因组表达谱芯片比较山苍子油处理前后白念珠菌基因的差异性表达，分析山苍子油对白念珠菌整个基因表达谱的影响。方法用山苍子油处理白念珠菌ATCC900028株90min，将处理后的菌株命名为白念珠菌ATCC90028-L，分别抽提细胞总RNA，经杂交、洗涤后，通过扫描分析白念珠菌ATCC90028株和ATCC90028-L株全基因组表达谱的差异。结果基因芯片共筛选出491个差异表达基因，与白念珠菌ATCC90028株比较，在ATCC90028-L株中有216个基因表达上调，有275个基因表达下调，差异表达的基因数量约占总基因数量的11％（491／4634），差异表达基因主要包括白念珠菌麦角固醇生物合成通路中关键靶酶编码基因（ERGs）、应激反应相关基因、DNA复制与损伤修复相关基因、跨膜分子转运相关基因、能量代谢酶类相关基因等。结论山苍子油可使白念珠菌基因组中约11％基因产生差异性表达，影响较为显著，我们推测山苍子油与唑类抗真菌药物的作用机制相似，均通过对白念珠菌麦角固醇生物合成通路中关键靶酶的影响而起作用，基因芯片筛选出的其他差异表达基因也可能与山苍子油的抗真菌作用机制有关，值得进一步研究。

简介：目的了解临床分离大肠埃希菌Ayfy2926中TEM型β内酰胺酶的基因型。方法采用聚合酶链反应（PCR）扩增大肠埃希菌Ayfy2926中TEM型β内酰胺酶的全编码基因并对PCR产物进行序列分析;PCR产物克隆入pHSG398质粒并在感受态细胞大肠埃希菌JM109中进行表达,琼脂稀释法测定转化子菌株对β内酰胺类抗菌药的敏感性。结果大肠埃希菌Ayfy2926中TEM型β内酰胺酶的基因型为一种新亚型,TEM-166（GenBank注册号FJ197316）;与TEM-1相比,仅有1个氨基酸差异（Arg120→Gly）;与TEM-1转化子菌株相同,TEM-166转化子菌株对哌拉西林高度耐药,对第三代头孢菌素、亚胺培南敏感,β内酰胺酶抑制剂可显著降低克隆表达菌株的耐药性。结论TEM-166为TEM型β内酰胺酶的新亚型,是一种非超广谱β内酰胺酶。

简介：目前,全世界乙型肝炎病毒（HBV）携带者约3.5亿,其中1/4进展为慢性肝病,其严重并发症包括肝硬化和肝细胞癌.据估计,全球每年死于乙型肝炎及其并发症的患者多达100万～200万例.我国是HBV感染的高发区：慢性乙型肝炎患者约3000万例.造成乙型肝炎慢性化的主要原因是HBV感染后机体形成的免疫功能不全、体内高滴度病毒含量及对受染细胞的耐受状态,因此,近年关于HBV感染后的免疫耐受状态形成与调节机制的研究一直受到关注.

简介：AmpC酶可以水解头霉素类、第三代头孢菌素和单环β内酰胺类抗菌药物,β内酰胺酶抑制剂如克拉维酸对其抑制作用差。ESBLs可以水解第三代头孢菌素和单环β内酰胺类抗菌药物,不能水解头霉素类,可被β内酰胺酶抑制剂所抑制。目前推荐使用头孢噻肟、头孢他啶或头孢泊肟并检测其与克拉维酸之间的协同作用以确定对上述头孢菌素耐药菌株是否产ESBLs。但由于克拉维酸可诱导细菌产生AmpC酶,该酶可以水解上述头孢菌素,

简介：目的观察不同浓度脂多糖（LPS）诱导人支气管上皮细胞（HBEC）不同时间8防御素-3（hBD-3）的表达，探索hBD-3在呼吸道感染中的作用及与细菌感染的量效关系、时效关系，为人工调控其分泌、防治呼吸道感染进行基础研究。方法不同浓度LPS（0．01、0．1、1、10mg／L）诱导HBEC后，分别在不同时间点（1、2、4和8h）用RT—PCR法检测hBD-3mRNA的表达；同时用0．1mg／LLPS诱导HBEC4h后采用免疫细胞化学检测hBD-3蛋白的表达。结果0．1mg／LLPS诱导HBEC4h后，可见培养的支气管上皮细胞胞质呈棕褐色阳性颗粒，hBD-3蛋白明显表达；不同浓度LPS诱导细胞相同时间后，在同一时间点随浓度增加hBD-3mRNA表达亦随之增加，不同浓度组间比较差异有统计学意义（P〈0．01）；相同浓度LPS在诱导细胞不同时间后，在同一浓度组hBD-3mRNA表达亦随时间而增加，不同时间组间比较差异有统计学意义（P％0．01）。结论hBD-3在HBEC胞质有表达，LPS能诱导HBEChBD-3表达上调，LPS诱导hBD-3表达在一定范围内呈剂量和时间依赖性，hBD-3可能参与气道对LPS最初的防御反应。

简介：目的比较欧洲抗菌药物敏感试验委员会（EuropeanCommitteeonAntimicrobialSusceptibilityTesting，EUCAST）和美国临床实验室标准化协会（ClinicalandLaboratoryStandardsInstitute，CLSI）微量稀释法检测曲霉体外药物敏感性的差异。方法分别用EUCAST方法和CLSI方法检测116株曲霉对两性霉素B、伏立康唑、伊曲康唑、卡？白芬净和米卡芬净的敏感性，比较两种方法的基本符合率、药敏符合率、极重大误差率和重大误差率。结果EUCAST方法和CLSI方法对116株曲霉药敏检测的基本符合率为96．3％～100％。两方法检测烟曲霉对伏立康唑的药敏符合率98．8％，重大误差为1．2％，极重大误差率为0。烟曲霉和黑曲霉对两性霉素B以及烟曲霉和黄曲霉对伊曲康唑的药敏符合率均为100％，重大误差率和极重大误差率均为0。结论EUCAST方法和CLSI方法对检测曲霉体外药物敏感性具有良好的一致性。

简介：目的探讨我国临床分离的碳青霉烯类抗生素耐药铜绿假单胞菌外排泵MexAB—OprM和外膜孔蛋白OprD2表达水平及其与碳青霉烯类抗生素耐药性之间的关系。方法收集我国15个省市28所医院临床分离的铜绿假单胞菌655株，琼脂稀释法测定该菌加入外排泵抑制剂羟基氰氯苯腙（CCCP）前后对亚胺培南和美罗培南的MIC；RTPCR检测外排泵MexAB-OprM和孔蛋白OprD2的表达水平；十二烷基硫酸钠-聚丙酰胺凝胶电泳（SD-PAGE）和蛋白印迹（Westernblot）检测外膜孔蛋白OprD2。结果收集到的655株铜绿假单胞菌菌株对亚胺培南和美罗培南敏感率分别为52．5％和59．2％，加入CCCP前后其对亚胺培南和美罗培南的敏感率无明显变化；52．0％（51／9B）美罗培南耐药株MexAB-OprM显著高表达（P〈0．05），43．7％（59／135）亚胺培南耐药株OprD2显著低表达（P〈0．05），14．8％（20／135）亚胺培南耐药株OprD2表达缺失；SDS-PAGE和Western—blot显示与标准菌株PAO1相比，OprD2表达水平减低菌株ZZ20显影减低，表达缺失菌株BJ1不显影。结论MexAB-OprM表达升高和OprD2表达降低甚至缺失是我国铜绿假单胞菌对美罗培南和亚胺培南耐药的重要机制。

简介：目的利用激光共聚焦显微镜（CLSM）和改良微孔板法观察细菌生物膜形成，探索细菌生物膜检测的有效手段。方法烧伤患者植入性导管分离的金葡菌、鲍曼不动杆菌和铜绿假单胞菌，经体外分别培育24、48、72h和5d后，先后用CLSM和改良微孔板法，观察细菌生物膜形成和黏附的过程与特点。结果鲍曼不动杆菌、金葡菌、铜绿假单胞菌形成生物膜的时间、生物膜的形态与特点都有显著的差异。结论CLSM和改良微孔板法是观察和检测细菌生物膜形成过程的有效手段。