摘要
目的构建表达抗人红细胞血型A抗原50A杂交瘤细胞的单链抗体(SeFv)。方法应用重组噬菌体抗体技术，从50A杂交瘤细胞中分离、构建单链抗体基因，并将其克隆入噬粒pCANTAB5E中，转化E．coliXL-Blue，辅助噬菌体援救构建50A噬菌体单链抗体库；采用完整红细胞亲和富集法淘选阳性重组噬菌体，鉴定重组噬菌体并进行序列测定分析；免疫印迹试验检测重组单链抗体的特异性抗原活动。结果用M13KO7援救XL—Blue转化菌中的pCANTABSE重组噬菌体，得到滴度为4×10^9pfu／ml噬菌体单链抗体库；免疫印迹试验证实表达产物保留了亲本单抗对人红细胞血型A抗原的特异性亲和力。结论成功构建50AMcAb单链噬菌体抗体库，为进一步研制高特异性、高亲和力的基因工程原核血型检定抗体试剂奠定了基础。
出版日期
2000年02月12日（中国期刊网平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
