摘要
摘要目的本研究旨在探讨外周血中APC基因DNA甲基化与糖尿病肾病（diabetic nephropathy，DN）发生、发展的关系，分析其对基因转录和蛋白表达水平的影响，探讨miRNA135b对APC基因甲基化水平的调控作用。方法选择2018年3月至2020年3月在浙江大学附属杭州市第一人民医院肾内科的96例DN患者和同期100例健康体检者作为研究对象，分别检测两组APC基因CpG岛甲基化水平、mRNA水平和蛋白表达水平。用三联法构建Sprague-Dawely（SD）大鼠DN模型，分为DN组、miRNA-135b过表达慢病毒组和空载病毒组，将miRNA-135b过表达慢病毒和空载病毒通过尾静脉注射到大鼠体内，1个月后处死大鼠，测定其肾组织中的miRNA-135b的表达水平和APC基因甲基化水平。结果DN患者的APC-1岛的甲基化水平为（3.05±0.65）%，显著高于健康对照组的甲基化水平（2.34±0.56）%（t=5.231，P<0.001）；DN患者的APC-2岛的甲基化水平为（1.65±0.37）%，显著高于健康对照组的甲基化水平（1.17±0.29）%（t=4.381，P<0.001）；Pearson相关分析结果显示，APC-1岛的甲基化水平与血清肌酐和尿酸比值呈显著正相关关系（P均<0.05），APC-2岛的甲基化水平与尿酸呈显著正相关（P<0.05）；DN患者APC-1岛的甲基化水平与mRNA相对表达量间呈显著负相关（r=-0.426，P=0.019）；此外，DN患者的APC-1岛的甲基化水平与APC蛋白水平间呈显著负相关（r=-0.569，P=0.004）。miRNA-135b在过表达慢病毒组大鼠中的表达均显著高于空载病毒组（t=5.432，P<0.001）和DN组大鼠（t=5.812，P<0.001）；miRNA-135b过表达慢病毒组大鼠的APC甲基化水平也均显著高于DN组（t=6.217，P<0.001）和空载病毒组大鼠（t=6.446，P<0.001）。结论miRNA-135b可能通过上调APC基因DNA甲基化，降低mRNA和蛋白表达水平，从而参与到DN的发生、发展中。
出版日期
2020年11月08日（中国期刊网平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
