摘要
摘要目的探讨慢性脑低灌注(chronic cerebral hypoperfusion，CCH)后大鼠认知障碍及肠黏膜屏障损伤之间的相关性，量化分析慢性脑低灌注所致实验大鼠认知行为改变，以及肠黏膜屏障紧密连接蛋白claudin-1与骨桥蛋白(osteopontin，OPN)的表达变化。方法雄性SD大鼠30只，按照随机数字表法分为慢性脑低灌注组(CCH组)和假手术组(SHAM组)，每组15只大鼠。通过双侧颈总动脉永久性结扎法建立CCH模型，SHAM组大鼠只分离颈总动脉不结扎。4周后采用旷场实验、物体辨别实验和Morris水迷宫实验检测大鼠的情绪唤醒能力，对新事物的探索能力及空间学习记忆能力。HE染色及免疫荧光染色实验检测大鼠回肠组织损伤情况，免疫蛋白印迹实验检测回肠组织OPN表达水平，ELISA实验检测大鼠血清OPN水平。采用SPSS 23.0及GraphPad 8.0统计软件处理数据，采用t检验及重复测量方差分析等方法进行数据分析。结果旷场实验：与SHAM组[(28.70±10.70)次，(1 030.45±81.51)cm]比较，CCH组大鼠站立次数和运动总路程[(16.70±7.13)次，(736.64±136.71)cm]减少，差异有统计学意义(t＝1.59，4.16，均P<0.05)；物体辨别实验：CCH组大鼠的辨别指数(0.44±0.26)低于SHAM组(0.91±0.07)，差异有统计学意义(t＝-7.76，P<0.05)；Morris水迷宫定位航行实验显示，组别和时间主效应均显著(F＝383.36，153.87，P<0.05)。简单效应分析显示，与SHAM组比较，CCH组大鼠逃避潜伏期与游泳总路程增加(均P<0.05)；空间探索实验显示，与SHAM组[(7.20±1.81)次，(9.96±2.95)s]比较，CCH组大鼠穿越次数[(3.00±0.82)次]减少，穿越潜伏期[(29.70±6.28)s]延长，差异有统计学意义(t＝4.65，7.04，均P<0.05)。肠道黏膜病理评分，与SHAM组[(1.98±0.34)分]比较，CCH组评分[(4.52±0.27)分]更高，肠道黏膜损伤更重(t＝18.53，P<0.01)；免疫荧光实验显示，与SHAM组(125 028.58±33 077.39)比较，CCH组肠道上皮细胞间的claudin-1累计光密度(47 154.50±7 507.29)降低(t＝-16.10，P<0.01)；免疫蛋白印迹实验，与SHAM组(0.38±0.11)比较，CCH组肠道OPN表达含量(1.20±0.95)增加(P<0.05)；ELISA实验，与SHAM组[(3.42±0.66)μg/L]比较，CCH组血清OPN含量[(14.92±1.45)μg/L]明显增加(P<0.05)。认知受损程度与肠黏膜上皮claudin-1表达量、血清OPN含量间均呈负相关(均P<0.01)；肠黏膜上皮claudin-1表达量与血清OPN含量呈负相关(r＝-0.952，P<0.01)。结论CCH可引发明显的大鼠认知功能受损及肠道黏膜屏障的破坏，血清OPN或可作为CCH致大鼠认知损伤及肠道黏膜屏障破坏的潜在血清学标志物。
出版日期
2021年03月21日（中国期刊网平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
