简介：摘要目的探究Ly6/Plaur结构域包含蛋白1(Ly6/ Plaur domain-containing 1，LYPD1)在卵巢癌中的作用、潜在机制以及与卵巢癌患者不良预后的关系。方法癌症基因组图谱(The Cancer Genome Atlas，TCGA)数据中分析不同癌症中LYPD1的表达。同时，以TCGA数据库中卵巢癌患者临床生存数据评价LYPD1对卵巢癌患者预后的影响。采用Metascape数据库对LYPD1在卵巢癌生物学功能进行富集分析。CCK-8方法检测细胞增殖活性，流式细胞术检测细胞凋亡。Western印迹方法检测低表达LYPD1后对于SKOV3和A2780细胞中NF-κB蛋白的影响。肿瘤免疫评估资源(Tumor Immune Estimation Resource，TIMER)数据库分析LYPD1对于卵巢癌免疫细胞浸润的影响。结果LYPD1在卵巢癌中高表达，且在卵巢癌中的总生存率较低，同时LYPD1与疾病特异性生存率和无进展期相关。此外，低表达LYPD1能够抑制卵巢癌细胞增殖活性，诱导凋亡。I-κB激酶/NF-κB信号通路是LYPD1参与卵巢癌恶性进展的潜在通路之一。低表达LYPD1使卵巢癌细胞SKOV3和A2780中NF-κB蛋白表达升高。且LYPD1的表达与卵巢癌免疫细胞浸润密切相关。如，T细胞(P＝0.041，r＝0.100)，DC细胞(P＝0.034，r＝0.110)以及巨噬细胞(P＝0.027，r＝0.110)表达正相关，与Tgd(P＝0.001，r＝-0.180)，以及NK细胞(P＝0.044，r＝-0.100)负相关。结论LYPD1是一个原癌基因，通过I-κB激酶/NF-κB调控免疫细胞浸润参与卵巢癌细胞的异常增殖以及卵巢癌患者不良预后。

简介：摘要目的探讨micRNA-224(miR-224)在卵巢癌(ovarian cancer，OV)中的表达以及其对于OV患者预后的影响。方法应用GEO以及TCGA数据库筛选OV中异常表达的miRNA。qRT-PCR以及Western blot检测正常细胞以及卵巢癌细胞中miR-224和TNRC6A的表达水平。通过miR-224 inhibitor以及其阴性对照(negative control，NC)转染至SKOV3细胞中。通过CCK-8检测miR-224 inhibitor转染后SKOV3细胞活性的影响。流式细胞术以及AO/EB染色检测转染miR-224 inhibitor后对SKOV3细胞凋亡的作用。将TNRC6A(trinucleotide repeat-containing gene 6a)野生型(WT)和突变型(Mut)荧光素酶报告质粒与miR-224 inhibitor或miR-NC inhibitor共转染，采用荧光素酶报告系统分析TNRC6A在SKOV3细胞中的荧光素酶活性。TCGA数据库验证miR-224与TNRC6A在卵巢癌中的相关性以及TNRC6A在OV患者的表达以及对于不良预后的影响。结果miR-224在OV患者中高表达(P<0.001)，且低表达miR-224卵巢癌患者生存时间明显高于miR-224高表达卵巢癌患者(P＝0.004)。低表达miR-224能够抑制SKOV3细胞活性(P＝0.024)，并诱导SKOV3细胞凋亡。生物信息学筛选TNRC6A是miR-224的潜在靶基因。OV患者中TNRC6A与miR-224表达呈负相关(P＝0.001)。同时，Western blot以及qRT-PCR结果显示低表达miR-224能够使SKOV3细胞中TNRC6A的表达升高。荧光素酶活性检测结果显示miR-224能与TNRC6A基因的3′-UTR结合并负向调控(P＝0.024)。TCGA数据库结果表明，TNRC6A在OV患者中低表达(P＝0.001)，过表达TNRC6A的OV患者生存时间较低表达的时间长(P＝0.018)。结论miR-224靶向调控TNRC6A调节卵巢癌细胞活性，参与OV患者不良预后。