简介:摘要针对县域地区初中骨干教师的发展现状,在均衡发展理念下研究初中骨干教师示范作用、提高教师影响力,是当前县域教育形势所需,是提升学科教师专业化发展水平、提高教学质量的有效途径。
简介:摘要目的探讨受体相互作用蛋白激酶1(RIPK1)对骨髓间充质干细胞(BMSCs)死亡、增殖、分化、迁徙等生物功能的影响。方法通过RNA干扰技术降低RIPK1在BMSCs中的表达后,光镜观察细胞形态变化,Transwell细胞迁移实验检测BMSCs迁移能力变化,细胞计数试剂盒8(CCK-8)法检测BMSCs增殖变化,茜素红染色检测BMSCs成骨分化能力变化,油红O染色检测BMSCs成脂分化能力变化,阿新蓝染染色检测BMSCs成软骨分化能力变化,蛋白质印迹法(Western blot)分析BMSCs分化相关标志分子Runt相关基因2(Runx2)、过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)、性别决定区Y框蛋白9(Sox9)的表达变化以及凋亡标志性分子裂解的半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶-3(cleaved Caspase-3)、坏死性凋亡相关标志性分子p-RIPK3、RIPK3、p-MLKL的表达变化。两组间比较采用t检验,多组间比较应用单因素方差分析。结果小干扰RNA(siRNA)干扰24 h后,非选择性siRNA对照组吸光度值(0.46±0.00),siRIPK1组吸光度值(0.45±0.01),差异无统计学意义(t=1.923,P>0.05);siRNA干扰48 h后,非选择性siRNA对照组吸光度值(0.92±0.04),siRIPK1组吸光度值分别(0.63±0.03),差异有统计学意义(t=10.910,P<0.05);siRNA干扰72 h后,非选择性siRNA对照组吸光度值(1.52±0.01),siRIPK1组吸光度值(0.52±0.03);差异有统计学意义(t=48.960,P<0.05)。siRNA干扰RIPK1后,BMSCs内Runx2表达水平(0.41±0.08)明显低于对照组(1±0),差异有统计学意义(t=6.628,P<0.05);BMSCs内PPARγ表达水平(0.36±0.11)明显低于对照组(1±0),差异有统计学意义(t=6.810,P<0.05);BMSCs内Sox9表达水平(0.33±0.19)明显低于对照组(1±0),差异有统计学意义(t=6.949,P<0.05)。茜素红染色结果显示,与非选择性的siRNA对照组比较,RIPK1干扰显著抑制BMSCs成骨分化过程中矿化结节的形成。油红O细胞染色结果显示,与非选择性的siRNA对照组比较,RIPK1干扰显著抑制BMSCs成脂分化过程中脂滴的形成。阿新蓝细胞染色结果显示,和非选择性的siRNA对照组比较,RIPK1干扰显著抑制BMSCs成软骨分化过程中硫酸粘液物质的形成。Transwell细胞迁移实验结果显示,siRIPK1组(19.33±10.69)BMSCs的迁移数量明显少于非选择性siRNA对照组(52.33±9.71),差异有统计学意义(t=3.957,P<0.05)。siRNA干扰RIPK1后,BMSCs内细胞凋亡标志性分子Cleaved caspase3表达水平(1.73±0.40)明显高于对照组(1±0),差异有统计学意义(t=3.841,P<0.05);坏死性凋亡标志性分子p-RIPK3(2.07±0.73)、RIPK3(1.67±0.17)、p-MLKL(2.77±0.68)表达水平明显高于对照组(1±0),差异有统计学意义(t=3.841、3.555、4.542,P<0.05)。结论RIPK1是BMSCs内维持增殖、多向分化潜能以及迁移能力的重要调控基因。
简介:摘要目的观察低氧条件下HIF-1α/VEGF/Notch信号通路在人脐静脉内皮细胞(HUVEC)血管生成中的作用。方法将HUVEC进行常氧和低氧[二氯化钴(CoCl2),200 μmol/L]诱导,再将常氧和低氧处理的HUVEC应用Notch1信号通路的抑制剂DAPT (30 μmol/L,24 h)和激活剂JAG-1 (30 μmol/L,24 h)干预。通过体外小管形成实验观察低氧对HUVEC血管生成能力的影响。应用RT-PCR和Western blot检测HUVEC中低氧诱导因子-1α (HIF-1α)、血管内皮生长因子(VEGF)、基质金属蛋白酶-9 (MMP-9)和Notch1信号分子(Notch1、Dell4和JAG-1)的mRNA和蛋白表达。通过Transwell迁移实验和伤口愈合实验观察低氧、DAPT、JAG-1对HUVEC迁移能力的影响。应用MTT法检测低氧及Notch1对HUVEC增殖的影响。两组间比较采用t检验,采用析因设计方差分析低氧和DAPT以及低氧和JAG-1对HUVEC迁移能力、距离、小管形成能力和细胞增殖的交互作用。结果与常氧组比较,低氧组小管总长[(8.18±0.62)mm比(15.43±1.32)mm]增高,差异具有统计学意义(P < 0.05)。与常氧组比较,低氧组的HIF-1α、VEGF、MMP-9、Notch1、Dell4和JAG-1的mRNA相对表达量和蛋白相对表达量(1.01±0.03比4.43±0.35,1.02±0.03比3.55±0.28,0.98±0.04比3.24±0.25,1.01±0.03比3.22±0.25,0.99±0.02比2.89±0.22,1.02±0.04比2.43±0.19,0.98±0.01比3.13±0.24,0.98±0.02比2.67±0.21,0.97±0.03比2.45±0.19,1.01±0.03比2.44±0.19,1.00±0.04比2.30±0.18,1.03±0.05比2.27±0.18)均升高,差异有统计学意义(P均< 0.05)。Transwell迁移实验和伤口愈合实验显示,低氧条件下,DAPT干预使HUVEC的迁移能力降低,JAG-1干预使HUVEC的迁移能力升高(P均< 0.05)。小管形成和MTT法测定显示,低氧条件下,DAPT干预使HUVEC的小管形成能力和细胞增殖能力降低,JAG-1干预使HUVEC的小管形成能力和细胞增殖能力升高(P均< 0.05)。析因设计的方差分析结果显示,低氧和JAG-1对迁移细胞数、小管形成和细胞增殖能力交互作用具有协同作用(P < 0.05)。结论低氧可通过激活HIF-1α/VEGF/Notch1信号通路提高HUVEC的血管生成能力、迁移能力和细胞增殖能力。
简介:摘 要:习近平总书记在国有企业党的建设工作会议上指出,坚持党的领导,加强党的建设,是国有企业的“根”和“魂”。国有企业要全面深化改革,必须坚持党对国有企业领导的重大政治原则,坚持建立现代企业制度是国有企业改革的方向。如何在企业的改革发展中发挥党委“把方向、管大局、保落实”的作用,尤其是发挥基层党组织在思想引领和组织保障中的作用是本文研究讨论的重点内容。