简介：摘要目的探讨Janus激酶信号转导及转录激活因子(JAK-STAT)信号通路在Neurogin2基因(Ngn2)诱导的神经潜能骨髓间充质干细胞(Ngn2-MSCs)移植治疗大鼠局灶性脑缺血/再灌注(MCAO)损伤中的作用。方法体外培养大鼠MSCs细胞，并将Ngn2基因通过慢病毒转染MSCs细胞；20只SD大鼠按照随机数字表法分为两组，制备大鼠MCAO模型，分别设为Ngn2-MSCs移植组、Ngn2-MSCs+JAK-STAT通路抑制剂(AG490)移植组。干细胞移植后0、12、24、48、60、72、90 h进行神经缺陷症状评分单因素方差分析，蛋白质印迹法(Western blot)检测STAT3及磷酸化STAT3蛋白表达水平，并采用两均数成组设计资料t检验分析。原位缺口末端标记法(TUNEL)法检测脑缺血再灌注区细胞凋亡水平并采用单因素方差分析。结果Ngn2转染MSCs后，Ngn2-MSCs细胞表现出向神经细胞分化的潜能，Western blot检测提示干细胞移植后脑组织JAK-STAT3信号通路12 h开始STAT3蛋白磷酸化激活，48 h达到高峰，90 h后逐渐下降，均高于0 h(12 h：t＝4.780，48 h：t＝6.991，90 h：t＝4.578，P均<0.05)。实验组细胞凋亡数量48 h[(20.5±2.1)个/高倍镜视野]及其他时间点均低于对照组(组间F＝13.372，P<0.05)，神经缺陷评分(2.51±0.16 48 h及之后时间点)均低于对照组(组间F＝6.990，P<0.05)。结论干细胞移植治疗大鼠脑缺损损伤中，JAK-STAT3通路磷酸化激活与神经损伤相关，抑制JAK-STAT3通路磷酸化水平可以降低细胞移植区细胞凋亡水平，提高干细胞移植存活率，从而起到神经保护作用。

简介：摘要目的观察Ngn2基因(Ngn2)诱导的神经潜能骨髓间充质干细胞(MSCs)和Janus激酶信号转导及转录激活因子(JAK-STAT)信号通路抑制剂AG490联合移植对大鼠局灶性脑缺血/再灌注损伤的神经保护作用。方法体外培养MSCs(南京医科大学药学院实验室培养)并将Ngn2基因转染MSCs，细胞免疫荧光观察基因转染后神经细胞标记蛋白表达情况。制备大鼠大脑中动脉栓塞(MCAO)模型。100只SD大鼠按照随机数字表达分为5组，分别设为Sham组，1%二甲基亚砜(DMSO)组、AG490组、Ngn2-MSCs+1%DMSO移植组、Ngn2-MSCs+AG490移植组。移植治疗24 h后原位缺口末端标记法(TUNEL)法检测大鼠脑缺血区细胞凋亡水平。分别于3、7、14 d对每组大鼠进行神经缺陷症状评分，14 d后处死动物，氯化三苯四唑(TTC)法染色后计算脑梗死体积，干湿重法称量脑含水量。结果Ngn2转染MSCs后，Ngn2-MSCs细胞表现出向神经细胞分化的潜能，Ngn2-MSCs联合AG490移植治疗组中大鼠脑缺血区细胞凋亡水平(16.2±5.6，F＝197.53，P<0.01)、脑梗死体积[(12.31±6.24)%，F＝35.92，P<0.01]及脑含水量[(77.55±0.53)%，F＝56.18，P<0.01]较其他各组明显降低，神经缺陷评分在移植后7 d较其他各组开始降低(3.31±0.46，F＝14.47，P<0.01)，移植治疗14 d后评分显著较其他组降低(1.63±0.35，F＝22.71，P<0.01)。结论Ngn2-MSCs联合AG490移植疗法对脑缺血再灌注损伤有明显协同神经保护作用。