简介：摘要目的探讨G蛋白耦联受体30(GPR30)与Hippo-Yes相关蛋白(YAP)/转录共激活因子PDZ结合基序(TAZ)信号通路在甲状腺乳头状癌发生、发展中的影响。方法收集福建医科大学附属第二医院2019年9月至2020年4月之间40例甲状腺乳头状癌及癌旁组织标本，分析GPR30、YAP、TAZ mRNA及蛋白表达，并分析三者mRNA表达量与甲状腺乳头状癌病理资料之间的关系。采用GPR30特异性激动剂G1及抑制剂G15处理人甲状腺乳头状癌细胞系(TPC-1)，分析GPR30、YAP、TAZ表达变化。采用噻唑蓝(MTT)法、流式细胞仪等检测细胞增殖、细胞周期、细胞凋亡，细胞衰老的检测应用β-半乳糖苷酶染色法，细胞迁移侵袭采用Transwell实验。采用配对t检验分析各组数据差异。用t检验评估GPR30、YAP、TAZ表达与具体病理资料之间的关系。用皮尔森(Person)相关分析评估GPR30表达量与YAP、TAZ表达量的关系。结果40例甲状腺乳头状癌组织中GPR30、YAP、TAZ的表达在转录及翻译水平均明显高于癌旁组织(癌与癌旁mRNA相对表达量分别为3.438±0.123比2.463±0.747，t＝7.786，P<0.01；3.325±0.111比2.638±0.541，t＝8.285，P<0.01；2.581±0.089比2.041±0.418，t＝8.068，P<0.01；癌及癌旁蛋白相对表达量分别为1.838±0.074比1.172±0.211，t＝13.333，P<0.01、1.735±0.152比1.200±0.321，t＝7.641，P<0.01、2.265±0.024比1.310±0.301，t＝13.915，P<0.01)，差异均有统计学意义。GPR30的mRNA表达与淋巴结转移(3.519±0.094比3.328±0.096，t＝3.786，P<0.01)和肿瘤大小(<2 cm为3.424±0.116，≥2 cm为3.600±0.099，t＝2.553，P<0.05)明显相关，与年龄、性别、腺外侵犯、病灶数量无明显相关。YAP、TAZmRNA表达与淋巴结转移(3.395±0.105比3.283±0.093，t＝3.519，P<0.01；2.627±0.117比2.554±0.053，t＝2.686，P<0.05)明显相关，与年龄、性别、肿瘤大小、腺外侵犯、病灶数量无明显相关。GPR30特异性激动剂G1处理TPC-1细胞后，GPR30 mRNA表达量高于对照组(1.224±0.067比0.976±0.048，t＝5.212，P<0.01)，YAP、TAZ表达量高于对照组(分别为1.359±0.096比0.995±0.004，t＝6.562，P<0.01；1.311±0.024比0.985±0.066，t＝8.040，P<0.01)，促进细胞的增殖(0.381±0.002、0.523±0.003、0.754±0.004比0.359±0.004、0.476±0.003、0.665±0.003，t＝8.521、19.190、30.830，P<0.01)、侵袭(422.33±7.23比210.00±3.61，t＝45.510，P<0.01)、迁移(550.67±10.69比229.67±8.33，t＝41.030，P<0.01)，抑制细胞的衰老(0.052±0.001比0.094±0.001，t＝51.440，P<0.01)、凋亡[(1.8±0.2)%比(5.8±0.3)%，t＝19.220，P<0.01]，差异均有统计学意义。结论GPR30、YAP、TAZ的的高表达可能与甲状腺乳头状癌淋巴结转移以及预后相关，GPR30可能通过Hippo-TAZ/YAP通路促进甲状腺乳头状癌的发生、发展。

简介：摘要目的探讨特异性核基质结合区结合蛋白1(SATB1)和微小RNA(microRNA，miR)-495-3P在甲状腺乳头状癌(PTC)侵袭和转移中的作用。方法2019年9月至2020年4月，福建医科大学附属第二医院甲状腺乳腺外科采集肿瘤标本，将取得的40对PTC组织作为实验组，与之对应40对癌旁正常组织作为对照组。采用实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测40对PTC组织及癌旁正常组织中SATB1和miR-495-3p的表达水平，用蛋白质印迹法(Western blot)检测16对PTC组织及癌旁正常组织中SATB1蛋白的表达水平。用si-SATB1转染人甲状腺乳头状癌细胞(TPC)-1后，用RT-qPCR、Western blot检测TPC-1中SATB1、miR-495-3p的表达水平，并用Pearson分析法进行相关性分析，转染si-NC的TPC-1为阴性对照组，转染si-SATB1的TPC-1为实验组。分别用细胞计数试剂盒(CCK-8)法、流式细胞计数、Trsnawell法检测敲低SATB1的表达对TPC-1增殖、凋亡、周期、侵袭、迁移能力的影响。两样本比较采用t检验。结果与癌旁正常组织比较，SATB1 mRNA和SATB1蛋白在PTC组织中呈高表达(1.27±0.14比0.86±0.23，t＝8.484，P<0.01；0.94±0.10比0.37±0.15，t＝11.890，P<0.01)，差异有统计学意义，miR-495-3p呈低表达(0.78±0.11比1.37±0.64，t＝5.741，P<0.01)，差异有统计学意义。SATB1和miR-495-3p的异常表达均与PTC淋巴结转移明显相关(1.34±0.14，t＝2.576，P<0.05；0.74±0.07，t＝2.187，P<0.05)。PTC中SATB1和miR-495-3p的表达水平呈负相关(r＝-0.497，P<0.01)。干扰TPC-1中SATB1的表达会导致miR-495-3p的表达水平高于阴性对照组(8.59±0.16比1.01±0.02，t＝81.420，P<0.01)，并且抑制细胞的增殖能力(0.39±0.01、0.52±0.01、0.58±0.03比0.43±0.01、0.60±0.01、0.72±0.01，t＝4.899、9.798、7.668，P<0.01)、促进细胞凋亡[(42.8±2.1)%比(7.6±0.7)%，t＝27.540，P<0.01]、减弱细胞侵袭(75.33±3.51比206.33±5.51，t＝34.730，P<0.01)、迁移(202.00±7.81比528.33±5.03，t＝60.840，P<0.01)能力并发生G2/M周期阻滞[(36.7±1.2)%比(15.6±0.9)%，t＝24.360，P<0.01]，差异均有统计学意义。结论miR-495-3p可能作为1种调节因子和SATB1共同参与了PTC侵袭、转移的过程。