简介：摘要目的研究微小RNA-296-3p对舌鳞状细胞癌（简称舌鳞癌）细胞增殖、迁移和侵袭的影响及其潜在机制。方法以正常口腔上皮黏膜角质细胞HOK为对照，实时定量聚合酶链反应法检测舌鳞癌细胞系CAL27、SCC15和SCC9中miR-296-3p和核蛋白1（NUPR1） mRNA的表达，蛋白印迹法检测NUPR1蛋白表达水平。CAL27细胞分为对照组（NC组）、miR-con组、miR-296-3p组、si-con组、si-NUPR1组、miR-296-3p+pcDNA组和miR-296-3p+pcDNA-NUPR1组，细胞计数试剂盒8（CCK8）法检测细胞活性，Transwell检测细胞迁移和侵袭，蛋白印迹法检测增殖细胞核抗原（PCNA）、基质金属蛋白酶2（MMP-2）和基质金属蛋白酶9（MMP-9）表达水平。双荧光素酶报告基因实验验证CAL27细胞中miR-296-3p与NUPR1的调控关系。结果与HOK细胞相比，在舌鳞癌细胞系CAL27、SCC15和SCC9中miR-296-3p的含量显著降低（0.54 ± 0.08、0.38 ± 0.05、0.59 ± 0.07比1.04 ± 0.12，t = 10.401、15.231、9.718，P均<0.05），NUPR1 mRNA （5.94 ± 0.40、4.48 ± 0.45、5.19 ± 0.48比0.94 ± 0.12，t = 35.918、22.803、25.769）和NUPR1蛋白（0.79 ± 0.09、0.54 ± 0.05、0.62 ± 0.08比0.28 ± 0.04，t = 15.535、12.182、11.404）表达量均显著升高（P均<0.05）。与NC组、miR-con组相比，miR-296-3p组CAL27细胞活性、迁移数、侵袭数及PCNA、MMP-2和MMP-9的蛋白表达均降低（P均<0.05）。与NC组、si-con组相比，si-NUPR1组CAL27细胞活性、迁移数、侵袭数及PCNA、MMP-2和MMP-9的蛋白表达均降低（P均<0.05）。miR-296-3p在CAL27细胞负调控NUPR1表达。与miR-296-3p+pcDNA组相比，miR-296-3p+pcDNA-NUPR1组CAL27细胞活性（138.34 ± 5.73比98.54 ± 5.89，t = 14.530）、迁移数（95.28 ± 7.56比67.92 ± 5.23，t = 8.929）、侵袭数（184.53 ± 17.57比101.26 ± 10.64，t = 12.162）及PCNA （0.68 ± 0.07比0.35 ± 0.06，t = 10.738）、MMP-2（0.43 ± 0.05比0.29 ± 0.04，t = 6.559）和MMP-9（0.58 ± 0.06比0.33 ± 0.08，t = 7.500）的蛋白表达均升高（P均<0.05）。结论miR-296-3p通过靶向负调控NUPR1表达抑制舌鳞癌细胞的增殖、迁移和侵袭。

简介：摘要目的研究微小RNA-296-3p对舌鳞状细胞癌（简称舌鳞癌）细胞增殖、迁移和侵袭的影响及其潜在机制。方法以正常口腔上皮黏膜角质细胞HOK为对照，实时定量聚合酶链反应法检测舌鳞癌细胞系CAL27、SCC15和SCC9中miR-296-3p和核蛋白1（NUPR1） mRNA的表达，蛋白印迹法检测NUPR1蛋白表达水平。CAL27细胞分为对照组（NC组）、miR-con组、miR-296-3p组、si-con组、si-NUPR1组、miR-296-3p+pcDNA组和miR-296-3p+pcDNA-NUPR1组，细胞计数试剂盒8（CCK8）法检测细胞活性，Transwell检测细胞迁移和侵袭，蛋白印迹法检测增殖细胞核抗原（PCNA）、基质金属蛋白酶2（MMP-2）和基质金属蛋白酶9（MMP-9）表达水平。双荧光素酶报告基因实验验证CAL27细胞中miR-296-3p与NUPR1的调控关系。结果与HOK细胞相比，在舌鳞癌细胞系CAL27、SCC15和SCC9中miR-296-3p的含量显著降低（0.54 ± 0.08、0.38 ± 0.05、0.59 ± 0.07比1.04 ± 0.12，t = 10.401、15.231、9.718，P均<0.05），NUPR1 mRNA （5.94 ± 0.40、4.48 ± 0.45、5.19 ± 0.48比0.94 ± 0.12，t = 35.918、22.803、25.769）和NUPR1蛋白（0.79 ± 0.09、0.54 ± 0.05、0.62 ± 0.08比0.28 ± 0.04，t = 15.535、12.182、11.404）表达量均显著升高（P均<0.05）。与NC组、miR-con组相比，miR-296-3p组CAL27细胞活性、迁移数、侵袭数及PCNA、MMP-2和MMP-9的蛋白表达均降低（P均<0.05）。与NC组、si-con组相比，si-NUPR1组CAL27细胞活性、迁移数、侵袭数及PCNA、MMP-2和MMP-9的蛋白表达均降低（P均<0.05）。miR-296-3p在CAL27细胞负调控NUPR1表达。与miR-296-3p+pcDNA组相比，miR-296-3p+pcDNA-NUPR1组CAL27细胞活性（138.34 ± 5.73比98.54 ± 5.89，t = 14.530）、迁移数（95.28 ± 7.56比67.92 ± 5.23，t = 8.929）、侵袭数（184.53 ± 17.57比101.26 ± 10.64，t = 12.162）及PCNA （0.68 ± 0.07比0.35 ± 0.06，t = 10.738）、MMP-2（0.43 ± 0.05比0.29 ± 0.04，t = 6.559）和MMP-9（0.58 ± 0.06比0.33 ± 0.08，t = 7.500）的蛋白表达均升高（P均<0.05）。结论miR-296-3p通过靶向负调控NUPR1表达抑制舌鳞癌细胞的增殖、迁移和侵袭。

简介：摘要目的通过高通量测序分析肠道病毒71型(EV71)和柯萨奇病毒A16型(CVA16)感染人呼吸道上皮细胞(16HBE)后差异表达的microRNA(miRNA)及其靶基因。方法利用TargetScan和miRDB两个数据库对两种病毒感染后同时上调或下调的miRNA靶基因进行预测，剔除在上调和下调中均出现的靶基因。对上调和下调表达的靶基因进行GO和pathway分析，筛选与免疫应答相关的GO和pathway中所包含的靶基因及其对应的miRNA，并进一步筛选同时参与免疫相关GO和pathway的上调或下调的靶基因及其对应的miRNA。挑选部分miRNA和靶基因进行qRT-PCR验证。结果筛选出上调miRNA对应的靶基因有598个，下调miRNA对应的靶基因有1 311个，剔除了同时上调或下调miRNA的靶基因62个。参与免疫应答相关GO及pathway的上调靶基因分别是17个和13个，对应的miRNA分别是15个和17个。参与免疫应答相关GO及pathway的下调靶基因分别是58个和47个，对应的miRNA分别是30个和42个。将参与免疫应答相关GO和pathway的上调靶基因取交集，得到的靶基因有3个，对应调控的miRNA有4个。另外，将参与免疫应答相关GO和pathway的下调靶基因取交集，得到的靶基因有9个，对应调控的miRNA有13个。结论本研究有助于阐明EV71和CVA16感染后宿主——病原体的相互作用，并为手足口病的发病机制研究提供参考。