简介：摘要本文于2020年4月22日优先发布于中华眼科杂志官网目的探讨眼部组织新型冠状病毒侵染和激活关键蛋白人血管紧张素转换酶2（ACE2）和跨膜丝氨酸蛋白酶2（TMPRSS2）的情况，明确新型冠状病毒在眼部的侵染基础。方法实验研究。选取30只小鼠，按性别、年龄、是否诱导糖尿病模型分为雄性组、雌性组、老年组、糖尿病组及糖尿病对照组，每组6只。使用荧光定量PCR分析小鼠结膜、角膜、泪腺、虹膜、晶状体、视网膜ACE2基因和TMPRSS2基因表达情况，并与肺脏、心脏、肾脏、肝脏中两个基因的表达量进行比较。使用免疫组化染色分析了小鼠各组织中ACE2和TMPRSS2蛋白的分布和表达情况。另取山东省眼科研究所红十字眼库接收的符合捐献条件的志愿者角膜及结膜组织切片，与小鼠眼部ACE2蛋白和TMPRSS2蛋白表达进行验证比较。同时通过分析已发表的人眼部组织转录组数据库，比较人角膜和结膜中ACE2和TMPRSS2基因的表达情况。对不同性别、年龄、及糖尿病条件下小鼠眼表组织的ACE2基因表达变化进行分析，采用独立样本t检验对数据进行统计学分析。对数据库中人角膜和结膜组织两种基因表达分析，采用Mann-Whitney U检验进行统计学分析。结果在小鼠6种眼部组织中，结膜ACE2基因和TMPRSS2基因表达量最高，但均低于肾脏和肺脏；ACE2和TMPRSS2蛋白阳性染色集中于结膜上皮、角膜上皮和泪腺腺泡。ACE2基因的表达具有性别差异，在雌性小鼠结膜和角膜的表达显著低于雄性小鼠，分别为雄性相应组织的43% （t=3.269，P=0.031）和63% （t=4.080，P=0.015）；糖尿病小鼠结膜和泪腺中的ACE2基因表达略高于非糖尿病小鼠，分别为1.21倍和1.10倍 （P>0.05）；不同年龄小鼠ACE2基因表达差异无统计学意义。与小鼠相似，人结膜ACE2和TMPRSS2基因表达量显著高于角膜（P=0.007），分别约为角膜上皮基因表达量的5.74倍和12.84倍。结论结膜中ACE2和TMPRSS2的表达在6种检测的眼部组织中最高，提示结膜是新型冠状病毒眼部感染的主要靶组织。（中华眼科杂志，2020，56：438-446）

简介：摘要目的评价大麻素2型受体(CB2R)在脂多糖(LPS)诱导小鼠巨噬细胞焦亡中的作用。方法常规培养小鼠巨噬细胞系RAW264.7细胞，采用随机数字表法分为3组(n＝18)：对照组(C组)、LPS组(LPS组)和CB2R激动剂HU308组(HU308组)。C组细胞不给予药物处理，余2组加入LPS，终浓度为1 μg/ml，孵育15 min时HU308组加入HU308，终浓度为10 μmol/L继续孵育6 h。采用RT-PCR法检测NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)、caspase-1、caspase-11和消皮素D(GSDMD)的mRNA表达，采用Western blot法检测NLRP3、caspase-1、caspase-11、GSDMD及其C末端(GSDMD-C)表达，计算GSDMD-C/GSDMD比值，采用ELISA法检测培养液IL-18和IL-1β的浓度。结果与C组比较，LPS组NLRP3、caspase-1、caspase-11、GSDMD和GSDMD-C表达上调，GSDMD-C/GSDMD比值升高，培养液IL-18和IL-1β浓度升高(P<0.05)；与LPS组比较，HU308组NLRP3、caspase-1、caspase-11、GSDMD和GSDMD-C表达下调，GSDMD-C/GSDMD比值降低，培养液IL-18和IL-1β浓度降低(P<0.05)。结论CB2R参与了LPS诱导巨噬细胞焦亡的过程。

简介：摘要目的探讨在小鼠脓毒症急性肺损伤模型中，焦亡相关指标与大麻素2型受体（cannabinoid 2 receptor，CB2R）表达量的相关性。方法采用随机数字表法把实验小鼠随机分为4组（n=6）：假手术组（sham）、轻度脓毒症组（ALIMi）、中度脓毒症组（ALIMo）、重度脓毒症组（ALIS）。采用盲肠结扎穿孔法（cecal ligation and puncture，CLP）建立小鼠的脓毒症急性肺损伤模型。术后12 h采集肺组织标本，测定肺组织湿干重比及肺组织损伤评分；检测肺组织CB2RmRNA及蛋白表达水平、焦亡相关指标（NLRP3、caspasse-1、caspase-11、GSDMD）的mRNA转录水平及肺组织炎症因子（IL-6、TNF-α）的水平；利用SPSS软件进行数据分析，采用单因素方差分析法进行各项指标的多组间比较，分别采用LSD或Games-Howell检验进行两组间比较，利用Pearson法分别分析炎症因子和焦亡相关指标与CB2R之间的相关性。结果通过单因素方差分析获得统计量F值，并进行两组间比较。与sham组比较，在脓毒症模型中，IL-6、TNF-α、CB2RmRNA、CB2R蛋白以及NLRP3、caspase-1、caspase-11、GSDMD mRNA表达升高(P<0.05)；与ALIMi组比较，ALIMo组小鼠肺组织IL-6 [(277.31±41.07) vs. (140.09±27.56), P<0.05]、TNF-α [(501.09±73.91) vs. (261.36±40.73), P<0.05]、CB2RmRNA [(2.99±0.28) vs. (2.02±0.19), P<0.05]、CB2R蛋白[(0.44±0.08) vs. (0.23±0.05), P<0.05]以及NLRP3 [(2.53±0.26)vs. (1.61±0.15), P<0.05]、caspase-1 [(6.02±0.35) vs. (3.60±0.38), P<0.05]、caspase-11 [(11.43±0.83)vs. (6.30±0.65), P<0.05]、GSDMD [(10.46±0.62) vs. (5.67±0.54), P<0.05] mRNA表达升高；与ALIMo组比较，ALIS组小鼠肺组织中IL-6 [(475.90±67.65) vs. (277.31±41.07), P<0.05]、TNF-α [(713.93±58.85) vs. ( 501.09±73.91), P<0.05]、CB2RmRNA [(4.00±0.19) vs. (2.99±0.28), P<0.05]、CB2R蛋白[(0.61±0.05) vs. (0.44±0.08), P<0.05]以及NLRP3 [(4.75±0.40) vs. (2.53±0.26), P<0.05]、caspase-1 [(8.76±0.72) vs. (6.02±0.35), P<0.05]、caspase-11 [(16.31±1.13) vs. (11.43±0.83)，P<0.05]、GSDMD [(16.46±1.22) vs. (10.46±0.62), P<0.05] mRNA表达升高。相关性分析显示：上述炎症因子、细胞焦亡指标的mRNA水平均与CB2RmRNA呈显著正相关性（相关系数r>0.9，P<0.01）。结论在不同程度的脓毒症肺损伤时，炎症程度、肺组织细胞焦亡均与CB2RmRNA的表达水平呈高度正相关，CB2R可能参与了脓毒症急性肺损伤时肺组织细胞焦亡的调节过程。

简介：象甲第11轮，京冀联队主场迎战内蒙古伊泰队。前两盘比赛，双方势均力敌，打成平手，所以这盘比赛的胜负尤为关键。

简介：摘要目的探讨长链非编码RNA（lncRNA）ALMS1-IT1在结直肠癌组织中的表达及对结直肠癌HT-29细胞体外增殖和迁移能力影响的分子机制。方法选取2018年7月至2020年11月湖北六七二中西医结合骨科医院行手术切除并经病理学检查确诊的40例结直肠癌患者癌组织标本及癌旁组织（距肿瘤边缘>5 cm）标本。应用实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测ALMS1-IT1在结直肠癌组织及癌旁组织中的表达水平，以≥中位相对表达量者为ALMS1-IT1高表达，分析ALMS1-IT1表达与患者临床病理特征的关系。将空载慢病毒和载有ALMS1-IT1沉默序列的慢病毒分别感染HT-29细胞，分别为对照组和si-ALMS1-IT1组。采用qRT-PCR检测两组HT-29细胞中ALMS1-IT1表达情况。应用CCK-8法和Transwell实验分别检测两组HT-29细胞增殖能力和迁移能力。采用starBase v2.0在线数据库预测ALMS1-IT1相互作用的分子，采用qRT-PCR和蛋白质印迹法检测这些分子的表达情况。结果结直肠癌组织中ALMS1-IT1的相对表达量较癌旁组织增加（4.54±0.61比1.19±0.31；t＝34.89，P<0.01）。40例患者癌组织中ALMS1-IT1中位相对表达量为2.93，ALMS1-IT1高表达率为50.0%（20/40）。TNM分期Ⅲ期患者癌组织ALMS1-IT1高表达率高于Ⅰ~Ⅱ期者，低分化者高表达率高于高、中分化者，淋巴结转移者高表达率高于无淋巴结转移者（均P<0.01）。si-ALMS1-IT1组HT-29细胞培养第2、3、4、5天的细胞增殖能力（吸光度值）均低于对照组（均P<0.05）。si-ALMS1-IT1组HT-29细胞24 h细胞迁移数较对照组少[（45±7）个比（112±18）个；t＝3.45，P<0.05]。基于starBase v2.0在线数据库，预测到ALMS1-IT1的靶基因可能为miRNA-889-3p（miR-889-3p），miR-889-3p的靶基因可能为ATAD2。与对照组相比，si-ALMS1-IT1组HT-29细胞中miR-889-3p相对表达量升高（4.24±0.46比1.01±0.11；t＝6.81，P<0.01）。与对照组相比，si-ALMS1-IT1组ATAD2 mRNA（P<0.01）和蛋白表达水平均降低。结论ALMS1-IT1在结直肠癌组织中高表达，ALMS1-IT1表达与患者TNM分期、肿瘤分化程度、淋巴结转移相关。体外下调ALMS1-IT1，可能通过调控miR-889-3p-ATAD2轴而抑制结直肠癌HT-29细胞增殖和迁移。ALMS1-IT1可能是结直肠癌的治疗靶点。