简介：摘要目的建立实时荧光环介导等温扩增（Real-time Loop-mediated Isothermal Amplification,LAMP）技术检测皮肤癣的方法，实现皮肤癣菌病的快速实验室诊断。方法通过在NCBI官网查找下载皮肤癣菌中毛癣菌属、小孢子菌属和表皮癣菌属临床分离率较高的菌种rRNA序列（18S rRNA, ITS1, 5.8S rRNA, ITS2和28S rRNA），运用DNASTAR Lasergene软件进行分析比对，寻找出毛癣菌属内高度保守的靶序列，且该段靶序列要与其他属存在差异，运用Primer Explorer V5设计LAMP引物。提取须癣毛癣菌NBRC6202基因组DNA作为模板筛选引物以及建立LAMP检测毛癣菌属的反应体系，以红色毛癣菌ATCC28188基因组DNA作为模板测试其敏感性和稳定性，以毛癣菌属以外的其他真菌、细菌基因组DNA验证LAMP反应体系的特异性。结果筛选的4套引物里，primer2的扩增效果较好，可在22 min检测出须癣毛癣菌，且可以特异地检测出红色毛癣菌、指间毛癣菌、疣状毛癣菌、许兰毛癣菌、紫色毛癣菌。本研究建立的毛癣菌属RT-LAMP检测方法的最低检测限为1 pg/μL；在10 000 pg/μL、100 pg/μL和1 pg/μL三个浓度的分别10次重复检测实验中平均CT值和CV%分别为9.24±0.30，3.29%、10.57±0.54，5.12%、15.95±0.52，3.24%。结论实验建立的毛癣菌属LAMP检测方法在特异性、敏感性和稳定性三方面均表现出优越的性能，能快速准确地检测出毛癣菌属常见菌种，具有良好的临床应用前景。