简介：摘要目的探讨外源性给予脑源性神经营养因子前体(brain-derived neurotrophic factor precursor，proBDNF)后脑卒中后抑郁(post-stroke depression，PSD)大鼠额前皮质凋亡信号通路蛋白的表达变化。方法在55只健康成年雌性SD大鼠中，随机选取25只作为PSD组，其余30只随机分为正常组、抑郁组、卒中组，每组10只。卒中组采用线栓法建立大脑中动脉栓塞模型；抑郁组采用慢性不可预见性温和应激(chronic unpredictable mild stress，CUMS)结合孤养法制备大鼠慢性应激抑郁模型；PSD组采用线栓法建立MCAO模型，术后1周加以CUMS及孤养法制备PSD模型；PSD组大鼠造模后2周，随机选取15只进行侧脑室埋管，并随机分为proBDNF组、组织型纤溶酶原激活剂组(tPA组)和NS组，埋管后1周进行侧脑室注射tPA、ProBDNF，连续给药1周。于造模后第4周及第8周末采用Western blot检测各组大鼠额前皮质c-Jun氨基末端激酶(c-Jun N-terminal kinase，JNK)、p-JNK、p53、p-p53、Bax蛋白表达。采用SPSS 17.0进行数据分析，组间比较采用单因素方差分析，采用SNK-q进行两两比较。结果大鼠MCAO造模第4周末和第8周末，正常组、抑郁组、卒中组和PSD组大鼠额前皮质p-p53、p53、p-JNK、JNK和Bax表达均差异有统计学意义(F＝3.426~90.355，均P<0.05)。事后两两比较结果显示，相比正常组，在第4周末，PSD大鼠额前皮质p-JNK(0.378±0.042)、Bax(0.478±0.054)蛋白的表达均升高(均P<0.05)；在第8周末，PSD组大鼠额前皮质中p-JNK(0.411±0.056)、p-p53(0.286±0.083)、Bax(0.471±0.008)蛋白表达均升高(均P<0.05)。予侧脑室注射proBDNF后，proBDNF组、tPA组和NS组p-p53、p53、p-JNK、JNK和Bax表达差异有统计学意义(F＝16.915~287.039，均P<0.01)。事后两两比较结果显示，相比NS组，proBDNF组大鼠额前皮质p-JNK(0.35±0.01)、p-p53(0.31±0.01)的表达显著增加(均P<0.05)。予侧脑室注射proBDNF后，proBDNF组、tPA组和NS组大鼠体质量、蔗糖偏好率、水平运动距离和垂直运动距离均差异有统计学意义(F＝18.741~76.305，均P<0.01)，与NS组和tPA组相比，proBDNF组行为学指标[体质量(224.36±3.23)g、蔗糖偏好率(69.83±1.72)%、水平运动距离(57.93±2.09)格、垂直运动距离(19.79±1.81)次]均显著下降(均P<0.05)。结论proBDNF促进了PSD大鼠凋亡信号通路的激活。

简介：摘要目的探讨甘草苷对卒中后抑郁(post-stroke depression, PSD)大鼠杏仁核细胞凋亡及凋亡相关因子Bax和Bcl-2蛋白表达的影响。方法将60只SD大鼠随机分为正常对照组、卒中组、PSD组、西酞普兰组、甘草苷组及生理盐水对照组，每组10只。采用线栓法闭塞大脑中动脉诱导局灶性脑缺血，加以慢性不可预见的温和应激刺激和孤养法建立PSD模型。在模型制作后每周同一时间对各组大鼠进行体重测量和抑郁行为学评价，包括蔗糖水实验及旷场实验。模型制作后6周时利用TUNEL染色法检测杏仁核细胞凋亡，应用免疫荧光染色法检测杏仁核Bax和Bcl-2表达，应用蛋白质印迹分析检测杏仁核Bax和Bcl-2蛋白表达。结果与甘草苷组、西酞普兰组和正常对照组比较，卒中组、PSD组和生理盐水对照组大鼠体重和蔗糖溶液偏好度降低，旷场实验水平运动及垂直运动减少，差异有统计学意义(P均<0.01)。TUNEL染色结果显示，与甘草苷组、西酞普兰组及正常对照组比较，卒中组、PSD组及生理盐水对照组凋亡细胞明显增多，差异有统计学意义(P均<0.01)。免疫荧光染色结果显示，与甘草苷组、西酞普兰组及正常对照组比较，卒中组、PSD组及生理盐水对照组杏仁核Bcl-2免疫阳性细胞数明显减少，Bax免疫阳性细胞数明显增多，差异有统计学意义(P均<0.01)。蛋白质印迹分析显示，与甘草苷组及西酞普兰组比较，卒中组、PSD组及生理盐水对照组杏仁核Bcl-2蛋白表达明显减少，而Bax蛋白表达明显增多，差异有统计学意义(P均<0.01)。结论甘草苷能减轻PSD症状，其机制可能与抑制杏仁核细胞凋亡及调节凋亡相关因子的表达有关。