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  • 简介:摘要目的探讨脓毒症大鼠肺组织来源的外囊泡对脓毒症肺内炎症反应及中性粒细胞外诱捕网(neutrophil extracellular traps, NETs)形成的影响。方法采用盲肠结扎穿孔术(cecal ligation and puncture, CLP)建立脓毒症大鼠模型,利用Collagenase D和DNase I充分酶解消化肺组织,多次离心去除杂质,最后通过差速超速离心法提取肺组织外囊泡(Ti-EVs)。将18只雄性SD大鼠随机分为3组:Ti-EVs组行CLP术并经气道滴入Ti-EVs混悬液(2.5 mg/kg);CLP组行CLP术并经气道滴入等体积PBS;Sham组行假手术。24 h后利用苏木精-伊红(HE)染色检测肺组织病理学变化,酶联免疫吸附实验检测肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid, BALF)中IL-1β、TNF-α及IL-6的表达水平,免疫荧光法检测肺组织内NETs含量。结果分离提取的大鼠肺组织外囊泡经透射电镜观察为双层圆形的囊性小泡结构,粒子直径主要分布在150 nm,Western blot显示EVs标志物CD9、CD63、Tsg101呈阳性表达。肺组织HE染色可见脓毒症大鼠肺泡完整性破坏,炎症细胞浸润。与CLP组相比,Ti-EVs组肺组织损伤程度更重,且BALF中IL-1β、TNF-α、IL-6炎症因子表达水平均显著升高(P<0.01);激光共聚焦显微镜下见脓毒症组和Ti-EVs组肺内均有NETs形成,Ti-EVs组肺内NETs荧光强度较脓毒症组明显增加。结论通过酶解消化、差速超速离心等系列步骤能够成功分离提取得到纯度较高的大鼠肺组织外囊泡。在脓毒症肺损伤进程中,肺组织外囊泡可加重肺内炎症反应,促进NETs形成。

  • 标签: 组织胞外囊泡 分离提取 脓毒症肺损伤 炎症反应 中性粒细胞胞外诱捕网
  • 简介:摘 要:本文论述了舍女寺油田复杂断块油藏特“双高”阶段提高水驱采收率的主要做法:在加强油藏精细研究,深化油藏认识,搞清剩余分布规律的基础上,针对区块套损井多、剩余较为分散的特点,通过应用井网重建,老井侧钻、层系简化,油层复查,周期注水等技术手段,挖掘剩余潜力,使老油田综合含水从92.65%下降到92.49%,自然递减从16.08%下降到14.2%,提高采收率1.1个百分点。舍女寺油田复杂断块油藏特“双高”阶段提高水驱采收率的做法为类似油田后期开发具有一定的借鉴作用。

  • 标签: 特“双高” 剩余油 井网重建 油层复查 周期注水