简介：摘要目的分别用新型复合型层析介质Capto Core 400和传统介质Sepharose 6FF纯化Sabin株脊髓灰质炎病毒(Sabin strain poliovirus，sPV)去除宿主细胞蛋白(hostcell protein，HCP)和DNA，并且比较纯化结果及工艺参数。方法用Capto Core 400与Sepharose 6FF纯化Vero细胞培养的Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型sPV浓缩液。分别检测纯化后sPV的D抗原含量、HCP残留量和DNA残留量，计算D抗原回收率、HCP和DNA去除率，并用t检验分析差异。结果Capto Core 400与Sepharose 6FF纯化Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型sPV的D抗原回收率差异均无统计学意义(t值分别为1.09、1.08、1.02，P值均>0.05)，但前者的Vero细胞HCP(t值分别为3.15、3.23、3.54)和DNA去除率均高于后者(t值分别为3.41、3.25、3.62)，且差异有统计学意义(P值均<0.05)。Capto Core 400与Sepharose 6FF的介质使用体积比值为0.05，上样后纯化时间比值为0.04，工作缓冲液使用量比值为0.25，工艺线性流速比值为10，每升介质上样量比值为20，最大耐压力比值为2。结论对比Sepharose 6FF，Capto Core 400可以更有效地去除Vero细胞HCP与DNA，各个工艺参数得到了优化，提高了sPV层析纯化的工作效率，并节约了时间和成本。

简介：摘要目的对篮式生物反应器在BSL-3实验室进行高致病性病毒培养的风险点加以评估，通过对病毒接种、培养、收获3个阶段环境中病毒浓度的监测判断其在BSL-3实验室病毒培养的安全性。方法用灭菌的拭子在病毒的接种、培养、收获3个阶段对篮式生物反应器的罐体及连接处进行涂抹采样，同时在安全柜中，用AirPort MD8空气采样器对病毒的接种和收获操作过成进行空气采样，并且对在3个阶段操作后，实验人员的个人防护装备进行涂抹采样，3种方式进行监测。结果在病毒接种、培养、收获3个阶段，篮式生物反应器的罐体及连接处采样病毒检测结果均为阴性，在病毒接种和收获操作过程中的空气采样病毒检测结果均为阴性，实验人员个人防护装备采样的病毒检测结果均为阴性。结论在BSL-3实验室采用篮式生物反应器进行病毒培养的方法是安全可靠的，通过检测结果显示其在整个操作过程中，未有病毒的泄露，进而确保了实验人员和实验室内环境的生物安全。

简介：摘要目的研究Sabin株脊髓灰质炎病毒(Sabin strain polio virus，sPV)纯化的离子交换层析(ion exchange chromatography，IEC)条件。方法在不同层析条件下对sPV凝胶层析粗纯液进行IEC，设定的层析参数分别为介质Q Sepharose FF或Eshmuno Q、上样量30%或40%柱体积、流速(150±5)或(240±8) cm/h。分别检测各型sPV纯化液的D抗原含量、蛋白浓度、病毒滴度、宿主细胞蛋白残留量和Vero细胞DNA残留量，计算D抗原回收率和比活。结果Eshmuno Q IEC纯化的各型sPV纯化液的D抗原回收率均明显高于Q Sepharose FF IEC。在上样量40%柱体积、流速(150±5) cm/h条件下，Eshmuno Q IEC纯化的各型sPV纯化液的D抗原比活均高于Q Sepharose FF IEC，差异均有统计学意义(Ⅰ型：t＝4.23，Ⅱ型：t＝5.73，Ⅲ型：t＝4.18，P值均<0.05)，而且前者的宿主细胞蛋白残留量(Ⅰ型：t＝8.29，Ⅱ型：t＝7.89，Ⅲ型：t＝8.18，P值均<0.05)和Vero细胞DNA残留量(Ⅰ型：t＝4.23，Ⅱ型：t＝4.56，Ⅲ型：t＝4.78，P值均<0.05)均低于后者，差异均有统计学意义。结论用IEC纯化sPV时，以Eshmuno Q代替Q Sepharose FF可增加上样量和流速，从而缩短IEC时间，提高纯化效率。