简介:摘要目的研究缺血性脑损伤小鼠脑组织中胱天蛋白酶募集域蛋白9(caspase recruitment domain protein 9,CARD9)与炎症反应的关系。方法取24只SPF级BALB/c雄性小鼠随机(随机数字法)分成4组,即假手术组、缺血3 h组、缺血6 h组、缺血12 h组,每组6只。缺血组小鼠采用线栓栓塞法构建永久性大脑中动脉阻塞(permanant middle cerebral artery occlusion,pMCAO)模型,各组于术后预定时间点处死小鼠。通过Western blot检测患侧脑组织中CARD9水平和NF-κB的活化,RT-PCR和ELISA分别检测患侧脑组织中炎症因子TNF-ɑ、IL-lβ、IL-6 mRNA及蛋白表达量。采用SPSS 21.0软件进行统计分析,每两组间计量资料比较采用独立样本t检验,采用Pearson相关分析比较CARD9与炎症因子之间的相关性。结果与假手术组相比,缺血3 h、6 h和12 h组脑组织CARD9表达均增加[(0.325±0.011) vs (0.462±0.019), P=0.036; (0.735±0.036), P=0.003; (0.903±0.024), P=0.001];与假手术组相比,缺血3 h、6 h和12 h组缺血脑组织NF-κB的活化均升高[(0.227±0.016 )vs (0.316±0.017), P=0.041;( 0.445±0.021), P=0.016; (0.671±0.039), P=0.008]。与假手术组相比,缺血3 h、6 h和12 h组脑组织TNF-ɑ表达均增加[(0.53±0.06) vs (1.06±0.10), P=0.009; (1.47±0.15), P=0.004; (2.78±0.18), P=0.001];与假手术组相比,缺血3 h、6 h和12 h组脑组织IL-lβ表达均增加[(0.55±0.07) vs (1.01±0.11), P=0.009; (2.13±0.16), P=0.003; (3.09±0.18), P=0.001];与假手术组相比,缺血3 h、6 h和12 h组脑组织IL-6表达均增加[(1.99±0.18) vs (4.10±0.41), P=0.006; (8.54±0.84), P=0.002; (11.56±0.96), P=0.001]。Pearson相关分析显示CARD9与NF-κB活性、TNF-ɑ、IL-1β、IL-6均存在正相关(r=0.894, P=0.001; r=0.747, P=0.008; r=0.810, P=0.001, r=0.773, P=0.007)。结论小鼠缺血性脑损伤早期脑组织中CARD9与炎症反应存在正相关。