简介：摘要目的自主研发可控温高速软组织匀浆机将人脱细胞脂肪组织基质(DAT)制备成可注射匀浆，探讨其细胞相容性及填充效果。方法2019年3月至2021年3月，于解放军联勤保障部队第九四〇医院对正常脂肪组织进行脱细胞处理后得到DAT，将DAT与生理盐水按照1∶12混匀，用可控温高速软组织匀浆机以803×g匀浆，使制备DAT匀浆可顺利通过27 G针头。扫描电镜观察DAT匀浆并检测其细胞相容性；将脂肪颗粒、DAT匀浆、DAT匀浆+脂肪干细胞(ADSC)分别注射入大鼠背部，比较填充效果、血管生成能力、炎症浸润情况等。结果脂肪组织经脱细胞处理成功获得DAT，经可控温高速软组织匀浆机制备DAT匀浆，粒径(749.91±136.79) nm；细胞与其复合培养后，黏附率(92.16±1.00)%，CCK-8检测显示随时间延长，吸光度(A)值不断升高，细胞生长情况良好，匀浆对细胞无毒性。体内试验显示，DAT匀浆、DAT匀浆+ADSC填充效果明显好于脂肪颗粒组(P<0.01)。脂肪颗粒组有大量脂肪细胞坏死融合形成油囊，而DAT匀浆、DAT匀浆+ADSC未见明显降解，并有部分脂肪细胞生成。CD31染色结果显示，DAT匀浆组及DAT匀浆+ADSC组微血管数量高于脂肪颗粒组(P<0.01)；CD68染色结果显示，DAT匀浆组及DAT匀浆+ADSC组炎症浸润低于脂肪颗粒组(P<0.01)。结论自主研发的可控温高速软组织匀浆机可将DAT制备为能通过27 G针头的DAT匀浆，具有较好的细胞相容性以及填充效果，且注射过程简单，创伤小，可作为填充材料。

简介：摘要目的探讨不同年龄组人脂肪干细胞(ADSC)形态学、衰老特征、分化潜能、表面标志物表达、增殖能力差异，ADSC对成纤维细胞(Fb)增殖、迁移的影响。方法2020年1—12月，取解放军联勤保障部队第九四〇医院烧伤整形科27例美容就医者的脂肪组织，年龄0~59岁。按供体年龄分为0~9岁组(4例)、10~19岁组(4例)、20~29岁组(5例)、30~39岁组(5例)、40~49岁组(5例)、50~59岁组(4例)6个组。获取各组ADSC传代培养，观察各组形态学特征，CCK-8法检测各组ADSC增殖能力，体外成脂、成骨诱导检测各组ADSC分化潜能，流式细胞仪检测各组ADSC表面标志物表达水平，qPCR检测各组(HGF)、(PPAR-γ)、Ⅲ型胶原酶、(DbX2)表达水平。收集同期1名健康对照者皮肤组织，获取Fb并传代培养至第二代，制备不同年龄组ADSC条件培养基(ADSC-CM)，通过CCK-8法检测各组ADSC-CM培养Fb的增殖能力，细胞划痕法检测Fb的迁移能力。用SPSS 21.0软件进行数据分析。结果6个年龄组细胞均呈典型梭形，低龄组细胞可见细胞核小，细胞形态均匀相似；>20岁组细胞细胞核较大，形态不均匀。ADSC细胞增殖能力随年龄增长逐渐降低。ADSC成脂、成骨分化能力随年龄增加逐渐下降。各组ADSC间充质干细胞阳性表面标志物表达率均>93%。PPAR-γ、HGF、Ⅲ型胶原酶表达水平均随年龄增长而下降；DbX2表达水平随年龄增长而呈上升趋势。各组SA-β-GAL染色阳性细胞数随年龄增长而上升。各组ADSC-CM均可促进Fb增殖，但各组间差异无统计学意义(P>0.05)；随着年龄增加，ADSC-CM促进Fb迁移能力逐渐下降。结论人ADSC增殖能力、多向分化能力、分泌多种促进Fb增殖和迁移的细胞因子能力随着年龄增长出现下降趋势，但ADSC成脂分化能力从40岁后才出现明显下降，各年龄组ADSC都可促进Fb增殖和迁移。