简介：摘要目的探讨长链非编码RNA AL117378.1对膀胱癌细胞增殖和侵袭的影响。方法选取2016年8月—2017年12月鄂东医疗集团黄石市中心医院收治的14例膀胱癌患者的肿瘤组织及癌旁组织，采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测14例膀胱癌组织及对应的癌旁组织、膀胱癌细胞株(5637、J82、T24、BIU-87)及对应的人膀胱正常上皮细胞(SV-HUC-1)中AL117378.1的表达水平。以表达水平最低的膀胱癌细胞株为对象分别转染阴性对照质粒(对照组)和载有AL117378.1的质粒(实验组)。qRT-PCR检测转染后细胞中AL117378.1和非受体型蛋白质酪氨酸磷酸酶9(PTPN9) mRNA的表达水平。Western blotting检测PTPN9、上皮性钙黏附蛋白(E-cadherin)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、细胞周期蛋白依懒性激酶4(CDK4)和细胞周期蛋白A2(Cyclin A2)蛋白的表达水平。四甲基偶氮唑蓝(MTT)实验和Transwell侵袭实验分别检测两组细胞的增殖能力和侵袭能力。计量资料以均数±标准差(Mean±SD)表示，组间比较采用两独立样本t检验。结果膀胱癌组织中AL117378.1的表达低于癌旁组织(P<0.01)。膀胱癌细胞株中AL117378.1的表达均低于人膀胱正常上皮细胞(P<0.01)，其中AL117378.1在J82细胞中的表达水平最低(P<0.01)。对照组和实验组J82细胞中AL117378.1的相对表达量分别为1.02±0.11和7.96±1.06，差异具有统计学意义(t＝6.51，P<0.01)；PTPN9 mRNA的相对表达量分别为1.01±0.08和4.99±0.50，差异具有统计学意义(t＝7.84，P<0.01)。Western blotting实验结果显示，PTPN9和E-cadherin蛋白表达升高，α-SMA、CDK4和Cyclin A2蛋白表达降低。MTT实验结果显示，转染AL117378.1的细胞增殖能力明显下降(P<0.05)。Transwell侵袭实验结果显示，对照组和实验组的侵袭细胞数分别为(97.96±13.71)个和(38.02±7.51)个，差异具有统计学意义(t＝3.84，P<0.01)。结论AL117378.1在膀胱癌组织和细胞株(5637、J82、T24、BIU-87)中表达均明显减少，AL117378.1可通过正向调控PTPN9基因的表达明显抑制膀胱癌细胞的增殖和侵袭。

简介：摘要目的研究lncRNA FGD5-AS1对肾癌细胞增殖、侵袭的影响及分子机制。方法2020年7月至2021年2月，采用实时荧光定量聚合酶链式反应（qRT-PCR）检测FGD5-AS1在肾癌细胞中的表达。以表达最高的肾癌细胞为对象，分别转染小干扰siRNA-FGD5-AS1质粒（实验组）和阴性对照质粒（对照组）。qRT-PCR检测FGD5-AS1和细胞因子信号转导抑制因子6（suppressor of cytokine signaling 6，SOCS6）mRNA的表达。Western blotting检测SOCS6和NF-κB信号通路蛋白表达。二苯基溴化四氮唑蓝（MTT）实验和Transwell侵袭实验检测细胞增殖和侵袭。结果肾癌细胞株中FGD5-AS1表达均高于近端肾小管细胞（P＜0.01），FGD5-AS1在ACHN细胞中表达最多（P＜0.01）。对照组和实验组FGD5-AS1表达分别为（1.01±0.09）和（0.20±0.03），差异有统计学意义（t=8.46，P＜0.01）；SOCS6 mRNA的表达分别为（0.33±0.05）和（1.02±0.13），差异有统计学意义（t=5.05，P＜0.01）。与对照组相比，实验组SOCS6蛋白表达增加，NF-κB信号通路蛋白表达均明显降低，实验组ACHN细胞增殖能力降低（均P＜0.05）。对照组和实验组的侵袭细胞数分别为（80.49±10.50）个和（32.29±8.03）个，差异有统计学意义（t=3.65，P＜0.05）。结论FGD5-AS1在肾癌细胞株中表达增加，下调FGD5-AS1表达可通过正向调控SOCS6基因表达抑制肾癌细胞的增殖和侵袭。

简介：摘要目的探讨长链非编码RNA LINC00630在膀胱癌细胞中的表达，以及体外干扰其表达对膀胱癌细胞增殖和迁移的影响。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测膀胱癌细胞株5637、BIU-87、T24、J82和正常膀胱上皮细胞株SV-HUC-1中LINC00630的表达。选择LINC0063表达量最高的膀胱癌细胞株进行后续实验；采用对照慢病毒感染细胞作为对照组，干扰LINC00630表达的慢病毒感染细胞为实验组。qRT-PCR检测两组细胞中LINC00630的表达，分别采用MTS法和细胞划痕实验检测两组细胞的增殖和迁移能力。qRT-PCR检测两组细胞中神经调节蛋白1（NRG1）mRNA的表达，蛋白质印迹法检测两组细胞中NRG1蛋白、细胞增殖相关蛋白（cyclin D3、CDK2）及细胞转移相关蛋白（Vimentin、N-cadherin）的表达情况。结果与SV-HUC-1细胞比较（1.05±0.17），LINC00630在各膀胱癌细胞株中表达量均增加（均P<0.01），在J82细胞中的表达最高（相对表达量5.83±0.42）。与对照组J82细胞相比，实验组J82细胞中LINC00630表达降低（0.18±0.02比1.00±0.05，t=14.36，P<0.01）；转染第2天起，实验组细胞增殖活力均低于对照组（均P<0.05）。实验组细胞划痕闭合率低于对照组[（27.4±7.1）%比（66.0±5.4）%，t=4.31，P<0.01]。实验组NRG1 mRNA的相对表达量较对照组降低（0.34±0.03比1.07±0.24，t=2.99，P<0.05）。与对照组相比，实验组细胞中NRG1蛋白、细胞增殖相关蛋白及细胞转移相关蛋白均降低。结论LINC00630在膀胱癌细胞株中表达上调；干扰LINC00630可能通过下调NRG1基因的表达，抑制J82细胞增殖和迁移能力。LINC00630可能是膀胱癌治疗新的分子靶标。

简介：摘要目的探讨长链非编码RNA-RP11-363G15.2在肾癌中的表达及对肾癌细胞PHF8基因表达的抑制作用。方法实时定量荧光聚合酶链反应(qRT-PCR)检测12对肾癌组织及癌旁组织、肾癌细胞株(ACHN、OS-RC-2、786-O、A498)及人近端肾小管细胞HK-2中RP11-363G15.2的表达。选取表达水平最低的肾癌细胞，分别转染RP11-363G15.2质粒(实验组)和阴性对照质粒(对照组)。qRT-PCR检测两组细胞中RP11-363G15.2和锌指蛋白8(PHF8) mRNA的表达。Western blot检测两组细胞中PHF8、细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、细胞周期依赖性激酶6(CDK6)、波形蛋白(Vimentin)和神经-钙粘素(N-cadherin)蛋白的表达。Transwell迁移实验和四甲基偶氮唑蓝(MTT)法分别检测两组细胞的迁移能力和增殖能力。结果qRT-PCR结果提示，肾癌组织中RP11-363G15.2的表达明显低于癌旁组织(P<0.01)，肾癌细胞株中RP11-363G15.2的表达均明显低于人近端肾小管细胞(P<0.01)，OS-RC-2细胞中RP11-363G15.2的表达最低(P<0.01)。与对照组相比，实验组OS-RC-2细胞中RP11-363G15.2表达明显增加[(1.06±0.19)vs.(11.09±1.48)，t＝6.75，P<0.01]，PHF8 mRNA表达明显降低[(1.01±0.09)vs.(0.31±0.05)，t＝6.66，P<0.01]。Western blot结果提示PHF8蛋白表达减少，CDK6、Cyclin D1、Vimentin和N-cadherin蛋白表达减少。与对照组相比，转染RP11-363G15.2后的OS-RC-2细胞迁移能力降低(P<0.01)，从第3天开始细胞增殖能力明显降低(P<0.01)。结论RP11-363G15.2在肾癌中低表达，RP11-363G15.2可通过下调肾癌细胞OS-RC-2中PHF8基因的表达，抑制细胞的迁移能力和增殖能力，可能为肾癌的治疗提供了一个新的分子靶点。