简介：摘要新型冠状病毒肺炎（COVID-19）是由2019新型冠状病毒（2019 novel coronavirus, 2019-nCoV）感染引起的一种急性传染性疾病，基于实时荧光逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）方法的病毒核酸检测是临床确诊的重要手段，但目前临床通过2019-nCoV的核酸检测结果确诊COVID-19存在阳性率偏低的现象。为明确这一问题出现的原因，本文在充分肯定核酸检测用于确诊COVID-19应用价值的基础上，从患者病程、标本采集、标本运输与保存、标本处理、核酸提取与扩增、病毒核酸变异等方面进行了分析，找出了影响核酸检测结果准确可靠的可能因素并提出了相应的建议。

简介：摘要目的基于多重聚合酶链式反应（PCR）与基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱（MALDI-TOF MS）联用的高通量检测技术，构建不同菌种的特征性单核苷酸多态性图谱以建立血流感染病原菌快速、准确、高灵敏的诊断方法。方法选取血流感染常见的大肠埃希菌等7种病原菌作为检测对象，优化多重PCR条件，采用MALDI-TOF MS检测各目标菌特征峰，建立多重PCR联合质谱检测体系；分别设计普通引物对及中部同序引物对，分析引物二聚体的形成情况；采用模拟的细菌感染血液样本，测定上述建立体系的特异度及灵敏度；收集2020年6—9月解放军总医院检验科疑似菌血症患者血液样本150份，并将上述体系的鉴定结果与临床应用的传统鉴定方法结果使用χ²检验进行比较。结果本研究设计的中部同序引物对的引物二聚体循环阈值（Ct）值在38以上，比普通引物对延迟出现6~10个循环；建立的联合质谱检测体系可同时检测分为两组的7种细菌，目标菌均可检测到特异的产物峰，除目标菌外的临床菌株只有引物峰，所有图谱无非特异的杂峰；大肠埃希菌的灵敏度可以达到50 CFU/ml，其余各菌的检测限为100 CFU/ml；对150例患者的血液样本进行检测，传统方法鉴定出阳性46例，阳性检出率为30.67%（46/150），包括2例混合感染，联合质谱方法鉴定出阳性48例，阳性检出率为32.0%（48/150），包括3例混合感染；阴性符合率为100%（101/101），核酸质谱敏感度为97.82%（45/46），特异度为97.11%（101/104），一致性检验Kappa=0.938（P=0.625），2种方法检测一致性良好。结论所建立的检测体系不仅能快速、准确地鉴定引起血流感染的7种常见病原菌，有效缩短传统培养鉴定所需时间，还可检测多重细菌混合感染，弥补混合感染漏检可能。该方法也可用于其他病原菌的鉴定。

简介：摘要目的使用元素标记免疫分析联合电感耦合等离子体质谱（ICP-MS）技术的免疫检测分析方法建立用于的人绒毛膜促性腺激素（HCG）的定量检测方法。方法方法性能评价。以稀土元素Sm为标记物，建立双抗体夹心法的HCG定量检测体系，对其生物素化抗体用量、反应时间进行优化；参照美国临床实验室标准化协会（CLSI）EP系列文件和相关标准，通过检测限、线性范围、批内和批间精密度、准确度、交叉反应、干扰试验等指标评价所建立的检测体系的分析性能。之后，收集88例临床用电化学发光法（ECLIA）检测过HCG的血清标本，使用所建方法进行检测，检测结果与ECLIA方法检测结果进行相关性分析。结果优化后整个检测可在30 min内完成，最佳的生物素化抗体用量为0.5 μl；所建立体系的空白检出限（LOB）为0.29 mIU/ml，在1.16~8 365.62 mIU/ml范围内线性良好，线性相关系数大于0.995(R2=0.998 0)，回收率为97.53%~102.01%，高浓度样本与低浓度样本的批内和批间变异系数均小于10%，与促甲状腺激素（TSH）、黄体生成素（LH）、卵泡刺激素（FSH）无明显的交叉反应，不同浓度干扰物质引起的干扰偏倚均小于10%；所建立检测体系的检测结果与ECLIA的检测结果进行比对，相关性良好（R2=0.960 0）。结论元素标记免疫分析联合ICP-MS技术的免疫分析方法检测HCG具有精密度高、特异性强、准确度好等优点，其方法确认和性能验证结果满足临床要求，为该方法的临床应用提供了实验依据。