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  • 简介:摘要目的通过研究SOX9在胆道闭锁(biliary atresia,BA)肝脏中的表达及与肝纤维化之间关系,探索其在肝纤维化进程中的作用。方法选取天津市儿童医院2018年12月至2020年7月普外科收治手术患儿40例,其中胆道闭锁30例(BA组);非胆道闭锁10例(non-BA组),包括先天性胆总管扩张症(congenital biliary dilatation,CBD)5例及胆道发育不良(biliary hypoplasia,BH)5例。术中取肝活检组织标本行HE染色,据日本Ohkuma's肝纤维化分级标准进行肝组织分级后,按照纤维化程度分两组:轻度、重度。通过免疫组织化学染色及荧光染色观察肝组织SOX9的表达并进行统计学分析,利用qRT-PCR检测肝组织SOX9 mRNA的表达并进行统计学分析,先行Kolmogorov-Smirnov正态性检验,符合正态分布的计量资料采用Mean±SD表示,组间比较采用t检验;非正态分布计量资料采用中位数及四分位数[M(P25,P75)]表示,则进行Mann-Whitney U检验,P<0.05,为差异有统计学意义。利用体外细胞实验分析肝星状细胞SOX9的表达。结果①免疫组织化学染色及荧光染色示:SOX9表达于BA肝细胞、胆管细胞的细胞核内,激活的肝星状细胞细胞核呈SOX9阳性。②免疫组化半定量检测示:与non-BA组相比,SOX9在BA组表达明显增高,为(0.126 6±0.047 2)比(0.069 5±0.033 1),t=3.531,P<0.01;SOX9在重度纤维化组表达高于轻度纤维化组,为(0.158 6±0.033 9)比(0.094 7±0.035 6),t=-5.048,P<0.01。③qRT-PCR定量分析检测示:与non-BA组相比,BA组SOX9的mRNA表达显著升高,为(0.031 3±0.024 5)ng/ml比(0.005 9±0.005 0)ng/ml,t=4.34,P<0.01;重度纤维化组SOX9 mRNA的表达显著高于轻度纤维化组[0.040 9 ng/ml(0.030 5,0.054 9)比0.013 9 ng/ml(0.003 0,0.031 2),P=0.001];LX-2激活态中ACTA2及SOX9的mRNA表达均高于LX-2静止态,为(16.023 6±1.116 3)比(6.810 5±1.005 9),tACTA2=-10.619 8,PACTA2<0.01;(11.530 1±1.180 2)比(4.569 8±0.716 8),tSOX9=-14.954 4,PSOX9<0.01。结论SOX9在BA肝组织中高表达且随肝纤维化程度加重而增加,与肝纤维化进程相关。

  • 标签: 胆道闭锁 肝纤维化 SOX9转录因子