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  • 简介:摘要目的观察小干扰RNA(siRNA)靶向沉默干扰素调节因子-8(IRF-8)对缺氧复氧后肺泡上皮细胞凋亡的影响。方法将IRF-8 siRNA、Negative control(NC)siRNA通过脂质转染试剂转染至肺泡上皮细胞株[L2(购自中国上海拜利生物科技有限公司)],将细胞分为4组,si-IRF-8组,转染含有IRF-8 si-RNA的细胞组;质粒对照组,转染Negative control(NC) siRNA的细胞组;正常对照组,无转染质粒,完全正常培养;阴性对照组,无质粒转染,给与缺氧复氧干预。通过蛋白质印迹法(Western blot)检测肺泡上皮细胞L2细胞株转染后凋亡相关分子标志物:活化的半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-3(cleaved Caspase-3);聚合酶链反应(PCR)检测Caspase-3、B细胞淋巴瘤/白血病-2相关X蛋白(bax)、B细胞淋巴瘤/白血病-2(bcl-2)的转录水平变化。组间比较采用独立样本t检验。结果转染IRF-8 siRNA后,L2细胞内IRF-8相对表达水平明显下调,差异有统计学意义[si-RNA组(0.146±0.009)对比si-NC组(1.001±0.055),t=15.566,P<0.01]。经过缺氧复氧干预后L2细胞株si-IRF-8组Caspase-3、bax水平(1.877±0.250、1.989±0.145)较si-NC组(3.681±0.292、4.636±1.261)明显降低,差异有统计学意义(t=-4.686、-5.110,P<0.01),bcl-2水平在L2细胞的si-IRF-8组(0.837±0.858)较si-NC(0.179±0.533)组显著升高,差异有统计学意义(t=15.955,P<0.01);Western blot检测cleaved Caspase-3蛋白的表达水平(0.257±0.051)较质粒对照组(0.485±0.751)明显下调,差异有统计学意义(t=6.205,P<0.01)。结论IRF-8 si-RNA能特异性下调肺泡上皮细胞L2细胞株中IRF-8的表达,并显著降低缺氧复氧干预后细胞的凋亡水平,其机制可能与下调促凋亡相关蛋白bax、Caspase-3及上调抗凋亡相关蛋白bcl-2的转录过程相关。

  • 标签: 干扰素调节因子-8 缺氧复氧 肺泡上皮细胞 RNA干扰 凋亡
  • 作者: 范涛
  • 学科: 医药卫生 > 公共卫生与预防医学
  • 创建时间:2011-03-13
  • 出处:《中国健康月刊》 2011年第3期
  • 机构:范涛【中图分类号】R258【文献标识码】A【文章编号】1005-0515(2011)03-0105-01呼吸机相关性肺炎(ventilatorassociatedpneumonia,VAP)是机械通气患者常见的并发症之一,指原无肺部感染的患者,经机械通气治疗48h后发生肺部感染。患者一旦发生VAP易造成脱机困难,并导致患者住院时间延长,增加医疗费用,增加护理工作量,严重的可以危及患者的生命。在国外报道中,VAP发生率9~70%,病死率50%~69%[1];国内报道,VAP发生率为43%,病死率51.6%。
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  • 简介:摘要:对于药物警戒来说,是对发现不良反应、理解不良反应、评价不良反应以及预防不良反应等与药物相关的活动或者是研究。在药物警戒当中不光会涉及到药物的不良反应,还会出现和药物相关的其它问题,像是药物是否合格、出现错误的药物治疗以及药物相关报告等。药物警戒可以让我国新药上市的时候对这种新药进行不良反应的监控,对我国药品监管体系的完善有着非常重要的意义。

  • 标签: 基层 药物警戒工作 现状 有效策略