简介：摘要目的探讨生长停滞特异性蛋白6（growth arrest-specific protein 6，Gas6）调控巨噬细胞极化在创面修复中的作用。方法采用清洁级雄性B6小鼠随机（随机数字法）分为正常组、皮肤缺损组、皮肤缺损组+生理盐水组、皮肤缺损+Gas6(1 μg)组、皮肤缺损+Gas6(5 μg)组和皮肤缺损+Gas6(10 μg)组，每组16只，其中10只用来观察各组小鼠皮肤创面愈合情况，剩余6只于造模后第5天分离创面组织巨噬细胞，酶联免疫吸附法（ELISA）检测IL-6，IL-10水平，RT-PCR检测精氨酸酶-1（Arg-1）、诱导性一氧化氮合酶（iNOS）的mRNA表达水平，流式细胞术检测巨噬细胞M1型标记物CD197和M2型标记物CD163、F4/80的表达，HE染色检测皮肤创面病理改变，Masson染色分析创面肉芽组织及胶原沉积情况。结果皮肤缺损造模后第3天伤口表面开始结痂。Gas6治疗组伤口面积小于PBS组，伤口愈合情况优于PBS组。与正常组相比，皮肤缺损组小鼠第5天巨噬细胞CD197的比例升高明显（P=0.0049）、CD163和F4/80双阳性的比例明显降低（P=0.0086）、IL-6水平明显升高（P=0.0013）、IL-10水平明显升高（P=0.0014）、iNOS mRNA水平明显升高（P=0.008）、Arg-1 mRNA水平明显降低（P=0.0121）、组织炎症浸润加重。与PBS对照组相比，Gas6治疗组CD197的比例明显下降（P=0.000）、CD163和F4/80双阳性比例明显升高（P=0.000）、IL-6水平明显降低（P=0.000）、IL-10水平明显升高（P=0.0003）、iNOS mRNA水平明显降低（P=0.0018）、Arg-1 mRNA水平明显升高（P=0.001）、组织炎性细胞减少，胶原纤维增多。结论Gas6可促使皮肤缺损小鼠巨噬细胞由M1向M2转化，加快缺损皮肤创面愈合。

简介：摘要目的探讨脓毒性休克患者红细胞比容、早期液体治疗和临床结局之间的关系，为脓毒性休克患者液体复苏治疗及预后评估提供依据。方法收集2018年01月01日至2020年12月31日期间于温州医科大学附属第一医院急诊重症监护室（emergency intensive care unit，EICU）诊治的脓毒症休克患者的临床信息。以入院后28 d患者存活或死亡作为临床研究终点，分为存活组及死亡组。分析两组患者的基本资料后，采用单因素COX回归分析方法及多因素COX回归分析方法分析Δ红细胞比容（hematocrit，HCT） d2-d1、ΔHCTd3-d1对脓毒性休克患者预后情况的评估价值，同时采用Kaplan-Meier（KM）生存曲线分析其对脓毒性休克患者总体生存率的评估价值以及用平滑曲线拟合图来验证其与净液体入量及死亡的关系。结果存活组241例，死亡组67例，单因素COX分析显示急性生理与慢性健康评分Ⅱ(acute physiology and chronic health evaluation Ⅱ, APACHE Ⅱ)（P=0.0006）、红细胞分布宽度（red cell volume distribution width, RDW）（P=0.0043）、Age（P=0.0184）、ΔHCTd2-d1（P=0.0136）、ΔHCTd3-d1（P=0.0204）、白细胞计数（white blood cell, WBC）（P=0.0444）在死亡组与存活组之间的差异有统计学意义。多因素COX分析显示ΔHCTd2-d1（P=0.0115）、ΔHCTd3-d1（P=0.0029）是EICU脓毒性休克患者发生死亡的独立危险因素。将ΔHCTd2-d1和ΔHCTd3-d1按三位法分为高中低3组，通过KM生存曲线显示，ΔHCTd2-d1三组之间总体生存率差异无统计学意义（P=0.16），ΔHCTd3-d1三组之间总体生存率差异有统计学意义（P=0.025）。ΔHCTd3-d1与净液体入量及预后平滑拟合曲线显示ΔHCTd3-d1与净液体入量呈负相关，其中中ΔHCTd3-d1组预后最好。结论ΔHCTd3-d1值与脓毒性休克患者的净液体入量有关，第3天HCT适当下降可以改善脓毒性休克患者的预后。红细胞比容动态变化可以为脓毒性休克患者的液体复苏及预后评估提供一定的依据。

简介：摘要目的探讨Orai1介导钙池操纵的钙内流（SOCE）在脓毒症小鼠CD4+ T细胞免疫功能损害中的作用。方法采用清洁级雄性Balb/c小鼠建立盲肠结扎穿孔（CLP）脓毒症模型，分别于术后1、3、5 d 处死小鼠，无菌留取脾脏，免疫磁珠法分选CD4+ T细胞，Western印迹法检测各组脾脏CD4+ T细胞Orai1蛋白表达，流式细胞术检测SOCE，流式细胞术检测CD4+ T细胞凋亡，CCK-8细胞计数试剂盒检测CD4+ T细胞增殖，酶联免疫吸附法（ELISA）检测干扰素（IFN）-γ和白细胞介素（IL）-4水平。然后调节Orai1蛋白的表达，实验分为4组，sham组、CLP3组、Orai1下调组（Orai1-down组）、Orai1上调组（Orai1-up组），进一步检测小鼠脾脏CD4+ T细胞SOCE和免疫功能。结果sham组脾脏CD4+ T细胞Orai1蛋白的相对表达量为1.03±0.16，与sham组相比，CLP组的Orai1蛋白水平明显降低（F=19.64，P=0.000 5）。与sham组相比，CLP组SOCE水平明显降低（F=30.01，P=0.001）。sham组的CD4+ T细胞早期和晚期凋亡比率为8.7%±1.5%，与sham组相比，CLP组明显升高（F=32.29，P=0.000 1）。与sham组相比，CLP组小鼠脾脏CD4+ T细胞增殖能力明显降低，差异有统计学意义（F=7.26，P=0.001 8）。与sham组相比，CLP组小鼠脾脏CD4+ T细胞分泌IFN-γ和IL-4的能力均明显降低，差异均有统计学意义（F=19.690、6.183，均P<0.05）。与sham组相比，CLP组IFN-γ/IL-4比值变小（F=11.23，P=0.003 1）。与CLP3组相比，Orai1-down组CD4+ T细胞SOCE的水平明显下降，早期和晚期凋亡比率明显升高，脾脏CD4+ T细胞增殖能力显著下降，分泌IFN-γ和IL-4下降，IFN-γ/IL-4值下降，差异均有统计学意义（t=4.819、7.952、2.988、28.760、3.140、7.670，均P<0.05）；而Orai1-up组则均获得相反的结果，差异亦均有统计学意义（t=2.983、6.796、9.390、19.670、3.692、15.870，均P<0.05）。结论Orai1介导SOCE减轻脓毒症小鼠CD4+ T细胞免疫功能障碍。