简介：摘要目的探讨磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)-蛋白激酶B(AKT)-哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)通路对骨肉瘤细胞顺铂耐药性的影响及其机制，为骨肉瘤的靶向治疗提供新的思路。方法体外培养MG-63细胞，予2 μg/mL顺铂重复给药建立MG-63耐药细胞株，向MG-63耐药细胞株中转染miRNA-22高表达质粒建立miRNA-22高表达的MG-63耐药细胞株。以MG-63细胞为对照组，MG-63耐药细胞为耐药组，用2 μg/mL顺铂处理后的MG-63耐药细胞和转染miRNA-22的MG-63耐药细胞分别为耐药DDP组、耐药miRNA-22＋DDP组。采用噻唑兰(MTT)法检测细胞增殖能力。采用荧光定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测细胞内PI3K、AKT以及mTOR mRNA的表达。采用Western blot检测细胞内PI3K、AKT以及mTOR蛋白的表达。结果(1)MTT法检测结果显示，对照组、耐药组、耐药DDP组和耐药miRNA-22＋DDP组的吸光度分别为1.097±0.039、1.157±0.065、0.870±0.014和0.737±0.029，差异有统计学意义(F＝67.731，P<0.01)：与对照组比较，耐药DDP组、耐药miRNA-22＋DDP组吸光度均明显下降，差异均有统计学意义(P值均<0.01)；耐药组、耐药DDP组、耐药miRNA-22＋DDP组3组间比较，吸光度呈下降趋势，差异均有统计学意义(P值均<0.01)。(2)荧光定量RT-PCR结果显示，与对照组比较，耐药组、耐药DDP组PI3K、AKT的相对表达量均增多，尤其以耐药组增多明显(P值均<0.01)，耐药miRNA-22＋DDP组与对照组差异均无统计学意义(P值均>0.01)；而mTOR相对表达量耐药组增高，耐药DDP组、耐药miRNA-22＋DDP组均降低，差异均有统计学意义(P值均<0.01)。耐药DDP组、耐药miRNA-22＋DDP组PI3K、AKT、mTOR的相对表达量均低于耐药组，差异均有统计学意义(P值均<0.01)；而耐药miRNA-22＋DDP组仅PI3K、mTOR的相对表达量低于耐药DDP组，差异均有统计学意义(P值均<0.01)。(3)Western blot检测结果显示，与对照组比较，耐药组PI3K、AKT、mTOR蛋白的相对表达量均明显增加，耐药DDP组、耐药miRNA-22＋DDP组PI3K、AKT蛋白的相对表达量均明显降低，差异均有统计学意义(P值均<0.01)。耐药组、耐药DDP组、耐药miRNA-22＋DDP组3组间两两比较，耐药DDP组、耐药miRNA-22＋DDP组PI3K、AKT、mTOR蛋白的相对表达量均明显低于耐药组，耐药miRNA-22＋DDP组PI3K、AKT蛋白的相对表达量均明显低于耐药DDP组，差异均有统计学意义(P值均<0.01)。结论PI3K-AKT-mTOR通路参与了骨肉瘤细胞对顺铂耐药性的产生，miRNA-22通过下调PI3K-AKT-mTOR通路中PI3K、AKT以及mTOR的表达降低骨肉瘤细胞对顺铂的耐药性。

简介：摘要目的对比个体化改良与常规方案治疗肢体长骨骨巨细胞瘤(GCTB)的临床效果，评估个体化改良方案的可行性。方法回顾性研究。纳入2005年1月—2017年12月内蒙古医科大学第二附属医院和天津医院两个骨肿瘤中心178例手术治疗的四肢长骨GCTB患者的临床资料，男95例、女83例，年龄8～75(35.7±11.7)岁。178例中，2005年1月—2011年12月70例患者设为常规组，其中男39例、女31例，年龄8～68岁，55例采用病灶内常规刮除加骨水泥、异体骨或自体骨填充，15例瘤段切除人工假体重建术；2012年1月—2017年12月108例患者设为改良组，其中男56例、女52例，年龄16～75岁，根据肿瘤发生的部位、Campanacci分级、病理骨折与否，采用95例改进的病灶内磨削术加骨水泥和或异体骨或自体骨填充，13例瘤段切除人工假体(膝关节为改进假体)重建等个体化改良方案。观察并对比两组术后并发症情况、术后复发转移情况及5年累积无复发生存率；末次随访时采用国际骨与软组织肿瘤协会(MSTS)评分标准比较术后两组患者肢体功能。结果178例患者均顺利完成手术。两组基线资料比较差异均无统计学意义(P值均>0.05)。所有患者术后随访24～117(56.9±26.1)个月。(1)术后有15例患者出现并发症，常规组11例(15.7%，11/70)、改良组4例(3.7%，4/108)，常规组患者并发症发生率明显高于改良组，主要发生于瘤段切除关节重建患者，差异有统计学意义(χ2＝7.939，P<0.05)。(2)178例患者中，24例(13.5%)复发。常规组和改良组术后总体复发率分别为22.9%(16/70)和7.4%(8/108)，差异有统计学意义(χ2＝8.691, P<0.05)。常规组中病灶内常规刮除术患者的复发率为27.3%(15/55)，改良组中病灶内扩大刮除术患者的复发率为7.4%(7/95)，差异有统计学意义(χ2＝11.027，P<0.05)；两组瘤段切除重建术患者分别有1例复发，差异无统计学意义(P>0.05)。患者的总复发率13.5%(24/178)，其中桡骨远端和股骨近端复发5例(5/12)。178例患者5年总体累积无复发生存率为90.8%，其中常规组78.5%、改良组91.2%，两组比较差异有统计学意义(χ2＝5.923, P<0.05)。(3)178例患者术后肢体功能MSTS评分为(28.7±2.3)分，常规组和改良组分别为(27.61±3.13)分和(29.33±1.29)分，两组差异有统计学意义(t＝4.365, P<0.01)。两组患者中病灶内刮除的术后MSTS评分均较瘤段切除关节重建术高，差异均有统计学意义(t＝5.620、2.177，P值均<0.05)。结论采用个体化改良方案治疗后GCTB复发率较低，且患者肢体功能佳，瘤段切除联合改良假体重建可以改善肢体功能、降低术后并发症。