简介：摘要目的探讨糖原合成酶激酶3β（GSK3β）在β淀粉样蛋白31~35（Aβ31~35）引起小鼠海马HT22神经细胞Bmal1基因/蛋白表达降低中的作用。方法采用小鼠海马神经细胞HT22作为实验对象，将HT22细胞按随机数字表法分为对照组、Aβ31~35处理组、LiCl+Aβ31~35处理组。以1%血清饥饿1 h来诱导细胞同步化（昼夜时间0，即CT0）。采用细胞增殖-毒性检测法检测细胞存活率；采用实时荧光定量PCR法检测上述各组细胞CT4、CT8、CT12、CT16、CT20、CT24时间点Bmal1基因的表达水平；采用Western印迹方法检测各组GSK3β表达情况及BMAL1蛋白表达水平。结果Aβ31~35诱导HT22细胞Bmal1 mRNA及BMAL1蛋白水平在CT20时间点较对照组显著降低（Bmal1 mRNA：分别为0.38±0.06与0.83±0.08，t=4.549，P=0.001；BMAL1蛋白：分别为0.67±0.04与1.00±0.04，t=5.943，P<0.001）。与对照组相比，Aβ31~35引起HT22细胞GSK3β活性增加，表现为GSK3βSer9位点（GSK3βS9）磷酸化水平较对照组显著降低，磷酸化GSK3βS9与GSK3β比值下降（分别为0.66±0.08与1.02±0.14，t=2.217，P=0.025）；Aβ31~35引起HT22细胞存活率显著降低（分别为71.85%±6.20%与98.14%±2.68%，t=3.891，P=0.006），GSK3β抑制剂LiCl预处理后有效逆转Aβ31~35诱导的HT22细胞存活率下降（LiCl+Aβ31~35处理组与Aβ31~35处理组分别为90.74%±5.74%与71.85%±6.20%，t=3.412，P=0.010）；LiCl预处理可以明显逆转Aβ31~35所致CT20时间点Bmal1 mRNA及BMAL1蛋白水平降低（LiCl+Aβ31~35处理组与Aβ31~35处理组Bmal1 mRNA分别为：0.72±0.05与0.38±0.06，t=4.378，P=0.001；BMAL1蛋白分别为：0.90±0.04与0.67±0.04，t=4.052，P=0.002）。结论GSK3β活性增加参与Aβ31~35引起的HT22细胞Bmal1基因/蛋白表达降低。

简介：摘要目的探讨全自动凝血分析仪（凝固法）检测凝血酶时间（TT）失败原因，并结合临床制定应对策略。方法选取2021年1至6月北京大学第一医院住院部21 359份TT检测血液样本中检测失败的样本233份，其中男132例，女101例，年龄73（66，79）岁。根据全自动凝血分析仪显示凝固曲线及检测失败错误代码，结合患者临床信息、样本性状、用药情况等原因进行检测失败原因分析，并制定应对措施。选取2021年7至11月北京大学第一医院住院部96份TT检测失败的脂血样本作为验证样本，男56例，女40例，年龄72（65，79）岁；分别采用凝固曲线人工判读法、磁珠法、高速离心后再检测3种方法获得TT结果，比较3种方法检测TT结果的差异。结果233份TT检测失败样本占总样本数的1.1%（233/21 359）；其中脂血样本占41.2%（96/233），肝素干扰样本占23.2%（54/233），患者使用口服抗凝药样本占22.3%（52/233），样本存在微小凝块或血浆量不足现象占13.3%（31/233）。仪器所示凝固曲线报警信息分类：基线期吸光度变化值增大（SD>2 mAbs）样本占32.6%（76/233），二阶导数无峰值样本占30.5%（71/233），反应过程吸光度变化值（基线期与平台期吸光度差值）<35 mAbs样本占25.8%（60/233），起始点过低及无法找到起始点样本占8.6%（20/233），无凝固曲线样本占2.6%（6/233）。233份样本中，依据反应原理及标准凝固曲线图形可以进行人工判读样本占55.8%（130/233）。96份因脂血导致凝固法检测失败的样本中，78份样本量充足，可进行磁珠法检测。高速离心后再测法、凝固曲线人工判读法与磁珠法检测TT结果分别为14.10（14.80，13.38）、14.30（14.99，13.60）、15.65（17.25，14.65）s，差异无统计学意义（P=0.055）。78份脂血样本磁珠法检测结果与凝固曲线人工判读法检测结果具有相关性（r=0.99，P=0.001）。结论全自动凝血分析仪（凝固法）检测TT失败的样本可通过凝固曲线与报警信息分析失败原因；对于脂血样本可通过人工判读、高速离心后再测或磁珠法获得TT结果。