简介：摘要目的比较不同穿刺路径下建立不同大小皮肾通道的肾脏血管损伤情况。方法2018年4月至2019年6月选取80个新鲜猪肾，分别经正常肾锥体中心线(路径A)、融合肾锥体一侧锥体的中心线(路径B)、融合肾锥体正中线(路径C)和肾柱正中线(路径D)4种路径穿刺，每条穿刺路径均分别建立F8、F12、F16、F20、F24和F30共6种不同大小的通道，依据穿刺路径及通道大小共设置24个实验组。采用病理组织学方法比较相同大小通道下4种穿刺路径的血管损伤情况，以及相同穿刺路径下不同大小通道的血管损伤情况。结果经路径A和路径B穿刺以损伤皮质层Ⅴ、Ⅵ级动脉为主。经路径C穿刺，通道内可见白色结缔组织包绕的血管显露，总体以损伤Ⅳ级动脉为主。经路径D穿刺，通道内血管密布，Ⅲ～Ⅵ级动脉均损伤严重。经路径A、B、C、D分别扩张至F30、F24、F16、F12时出现Ⅲ级动脉损伤。4种不同穿刺路径的总体动脉损伤程度在F8(χ2＝8.259，P＝0.041)、F12(χ2＝12.610，P＝0.006)、F16(χ2＝15.386，P＝0.002)、F20(χ2＝16.288，P＝0.001)、F24(χ2＝16.068，P＝0.001)和F30(χ2＝10.298，P＝0.016)通道的差异均有统计学意义。路径A和D相比，F12(P＝0.045)、F16(P＝0.025)、F20(P＝0.015)、F24(P＝0.007)和F30(P＝0.043)通道差异有统计学意义；路径A和C相比，F16(P＝0.048)、F20(P＝0.046)和F24(P＝0.037)通道差异有统计学意义；路径A和B相比，6种通道差异均无统计学意义(P>0.05)。经路径A穿刺时，F8与F30通道相比差异有统计学意义(P＝0.038)；经路径B穿刺时，F8与F24(P＝0.046)、F30(P＝0.027)通道相比差异有统计学意义。结论经肾柱正中线穿刺建立皮肾通道的血管损伤最严重，其次为经融合肾锥体正中线，经融合肾锥体一侧锥体的中心线和正常肾锥体中心线穿刺的血管损伤相对较少。经融合肾锥体一侧锥体的中心线、正常肾锥体中心线分别扩张至F24、F30通道时血管损伤增加。

简介：摘要目的评估和比较不同穿刺路径、通道大小及扩张方法的肾实质损伤。方法2019年3月至2019年12月，分别选取武汉大学人民医院21例人肾标本和42例猪肾标本建立经皮肾通道扩张损伤模型。采用形态学分析方法研究不同通道大小及扩张方法的肾实质损伤，设置8F、12F、16F-a、16F-b、20F-a、20F-b、24F-a、24F-b、30F-a及30F-b共10个实验组，其中a、b分别表示一步扩张和逐步扩张。采用组织病理学分析方法研究经正常肾锥体正中(A)、融合肾锥体一侧(B)、融合肾锥体正中(C)及肾柱(D)4种不同穿刺路径的肾实质损伤。总体比较采用双向方差分析，组间比较采用t检验。结果猪肾及人肾标本肾实质裂口平均表面积分别为3.42～51.63 mm2和2.68～43.53 mm2，平均最大直径分别为2.84～13.27 mm和2.47～12.74 mm。猪肾及人肾标本24F-a、30F-a及30F-b组裂口表面积均明显增加，差异有统计学意义(t1＝3.988、11.125、8.096，t2＝4.613、5.659、5.999，P<0.05)。一步扩张与逐步扩张比较，猪肾及人肾标本裂口表面积在16F、20F及24F差异均无统计学意义(t1＝1.711、0.328、0.343，t2＝0.156、0.552、0.482，P>0.05)。路径A、B、C、D肾实质内动脉损伤程度的秩均值分别为35.5、48.2、59.5、65.8，总体差异有统计学意义(χ2＝16.020，P<0.01)，两两比较路径A、C及路径A、D之间差异有统计学意义(χ2＝8.027、13.874，P<0.05)，路径A、B及路径C、D之间差异无统计学意义(χ2＝0.647、0.383，P>0.05)。结论通道扩张超过24F可能会增加肾实质损伤的风险，一步扩张与逐步扩张比较肾实质损伤在16～24F差异无统计学意义，经肾柱及融合肾锥体正中穿刺会增加肾实质内血管损伤的风险。

简介：摘要目的探讨微小RNA(miR)-34a通过靶向调控瞬时受体电位通道家族4(TRPV4)对人膀胱癌细胞增殖和凋亡作用的影响。方法收集2019年1月至2020年8月武汉大学人民医院23例膀胱癌组织以及相应的癌旁组织临床样本，采用实时荧光定量聚合酶链方法(RT-PCR)检测膀胱癌组织及癌旁正常组织临床样本中miR-34a的表达水平。采用蛋白质印迹法(Western blot)检测膀胱癌组织及癌旁正常组织临床样本TRPV4的表达水平。采用噻唑蓝(MTT)法，双染法流式细胞术观察细胞增殖和凋亡水平的改变。采用荧光素酶报告法测定miR-34a与TRPV4的相关性。采用Western blot法检测细胞中TRPV4的蛋白表达水平。组间比较采用t检验。结果miR-34a在膀胱癌旁组织中表达水平(4.38±0.42)高于膀胱癌组织(1.69±0.27)，差异有统计学意义(t＝-9.332，P<0.05)。TRPV4在膀胱癌旁组织中表达水平(0.39±0.04)低于膀胱癌组织(0.63±0.06)，差异有统计学意义(t＝15.962，P<0.05)。T24细胞中，miR-34a NC组24、48、72 h增殖率[(58.63±4.35)%、(72.36±6.45)%、(86.45±6.35)%]明显高于miR-34a mimics组24、48、72 h增殖率[(21.65±3.12)%、(36.82±4.51)%、(53.87±5.96)%]，差异有统计学意义(t＝-8.730、-7.821、-6.480，P<0.01)。miR-34a NC组凋亡率[(12.23±1.56)%]明显低于miR-34a mimics组[(31.09±2.43)%]，差异有统计学意义(t＝11.313，P<0.05)。5637细胞中，miR-34a NC组24、48、72 h增殖率[(44.58±3.87)%、(52.14±5.23)%、(68.35±6.12)%]明显低于miR-34a inhibitors组24、48、72 h增殖率[(56.87±5.63)%、(68.78±6.87)%、(89.45±7.64)%]，差异有统计学意义(t＝3.116、3.338、3.733，P<0.01)。miR-34a NC组凋亡率[(19.39±2.12)%]明显高于miR-34a inhibitors组[(9.94±1.05)%]，差异有统计学意义(t＝6.919，P<0.05)。生物信息学和荧光素酶报告实验验证了TRPV4是miR-34a的下游靶基因。T24细胞中，miR-34a NC组TRPV4蛋白表达水平(0.61±0.05)明显高于miR-34a mimics组(0.32±0.04)，差异有统计学意义(t＝-7.844，P<0.05)。5637细胞中，miR-34a NC组TRPV4蛋白表达水平(0.53±0.05)明显低于miR-34a inhibitors组(0.79±0.06)，差异有统计学意义(t＝6.919，P<0.05)。结论miR-34a通过靶向调控TRPV4的表达，从而影响膀胱癌细胞的增殖和凋亡能力。

简介：摘要目的比较F16和F20通道治疗1.5~2.5 cm单发上尿路结石的效率与安全性。方法前瞻性分析武汉大学人民医院2018年12月到2020年12月满足纳入标准的138例行单通道经皮肾镜碎石取石术患者资料。其中14例患者根据排除标准被剔除研究，最终124例患者被纳入研究，F16组61例，F20组63例，所有患者均经目标盏"穹窿-盏颈"轴线进行穿刺，穿刺前行彩色多普勒超声判断，37例患者拟定穿刺路径上存在明显血管，F16组17例，F20组20例，采取避开血管的目标盏"穹窿侧边-盏颈"轴线穿刺路径，根据分组建立相应通道，利用钬激光粉碎结石。采用独立样本t检验、χ2检验或Fisher确切概率法比较两组患者一般情况、结石特征、术中术后指标的差异，线性回归分析手术时间与影响因素的相关性。结果两组患者术后血红蛋白下降，差异无统计学意义[(9.2±10.0) g/L比(8.9±8.2) g/L，t＝0.207，P>0.05]，且均未出现术中术后出血，两组患者在手术时间的差异有统计学意义[(39.2±5.1) min比(34.6±6.2) min，t＝4.564，P<0.05]，两组患者手术时间与结石CT值显著相关(F16，R＝0.424；F20，R＝0.664，P<0.01)，F16组手术时间与结石直径相关(R＝0.274，P<0.05)，F20组手术时间与结石直径无明显相关(R＝0.121，P>0.05)。结论F20通道相比F16通道，在处理结石时所用时间更短，效率更高，并可减少感染的风险。

简介：摘要目的探讨瞬时感受器电位离子通道香草素受体4(TRPV4)在睾丸缺血再灌注损伤(IRI)中对GC-1细胞增殖和凋亡的作用及其机制。方法建立睾丸GC-1细胞缺氧复氧模型，采用蛋白质印迹法(Western blot)检测不同复氧损伤时间点TRPV4的表达变化；分别采用噻唑蓝(MTT)实验、流式细胞术检测转染TRPV4对GC-1细胞增殖和凋亡的影响；采用Western blot法检测睾丸组织中转染TRPV4对GC-1细胞中半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase)-3和细胞色素C(Cyt-C)表达的影响，组间比较采用t检验，多组间比较采用单因素方差分析。结果对照组及缺氧复氧组(0、6、12、24、48和72 h)TRPV4的蛋白表达水平分别为0.19±0.02、0.35±0.03、0.42±0.04、0.46±0.04、0.62±0.05、0.54±0.05、0.45±0.04。缺氧复氧组TRPV4表达显著高于未缺氧GC-1细胞的对照组，并在复氧24 h达到峰值(F＝6.898，P<0.05)，差异有统计学意义；缺氧复氧组中细胞增殖水平明显低于对照组(52.32±4.58比100.00±7.63，t＝-9.280，P<0.05)，差异有统计学意义，细胞凋亡水平高于对照组(15.60±1.72比4.08±0.87，t＝10.352，P<0.05)，差异有统计学意义；过表达TRPV4组中细胞增殖水平低于其对照组(23.65±3.98比51.35±4.67，t＝-7.820，P<0.05)，差异有统计学意义，细胞凋亡水平高于其对照组(26.93±2.15比14.62±1.68)，t＝7.814，P<0.05)，差异有统计学意义；沉默TRPV4组中细胞增殖水平高于其对照组(72.49±6.21比53.18±5.14，t＝4.150，P<0.05)，差异有统计学意义，细胞凋亡水平低于其对照组(9.71±1.25比15.07±1.64，t＝-4.502，P<0.05)，差异有统计学意义。缺氧复氧组中Caspase-3和Cyt-C表达水平高于对照组(0.70±0.06比0.20±0.02，t＝13.693，P<0.05；0.74±0.07比0.26±0.03，t＝10.917，P<0.05)，差异有统计学意义；过表达TRPV4组中Caspase-3和Cyt-C表达水平高于其对照组(1.25±0.11比0.69±0.07，t＝7.439，P<0.05；1.38±0.14比0.72±0.07，t＝7.303，P<0.05)，差异有统计学意义；沉默TRPV4组中Caspase-3和Cyt-C表达水平低于其对照组(0.46±0.05比0.68±0.06，t＝-4.879，P<0.05；0.45±0.05比0.72±0.06，t＝-5.988，P<0.05)，差异有统计学意义。结论TRPV4在GC-1细胞中高表达，其可能通过改变GC-1细胞的增殖和凋亡能力，从而影响睾丸IRI的发生发展。

简介：摘要目的研究miR-29a通过靶向调控瞬时受体电位通道家族4(TRPV4)在睾丸缺血再灌注损伤(IRI)中对GC-1细胞增殖和凋亡的影响及作用机制。方法建立睾丸GC-1细胞缺氧复氧模型，RT-PCR检测不同复氧损伤时间点miR-29a和TRPV4的表达水平；分别采用MTT实验、流式细胞术检测转染miR-29a对GC-1细胞增殖和凋亡能力的变化；荧光素酶实验证实miR-29a和TRPV4的靶向关系，Western blot法测定转染miR-29a后细胞中TRPV4的蛋白表达水平。结果miR-29a随着复氧损伤时间的增加，其表达显著降低，而TRPV4的表达明显增加；过表达miR-29a能显著促进GC-1细胞的增殖能力，抑制细胞凋亡水平。沉默miR-29a可使GC-1细胞的增殖能力明显减弱，凋亡水平增加；荧光素酶报告实验表明TRPV4是miR-29a的下游靶基因。过表达miR-29a能明显抑制GC-1细胞的TRPV4表达，而沉默miR-29a能显著促进TRPV4表达。结论MiR-29a可以通过靶向调控TRPV4来改变GC-1细胞的增殖和凋亡能力，从而影响睾丸IRI的发生发展。

简介：摘要目的观察GYY4137对大鼠精索静脉曲张(VC)生精功能损伤的保护作用。方法选取健康成年雄性SD大鼠32只购自湖北省疾病预防控制中心，随机分为4组：假手术组、假手术＋GYY4137组、VC组及VC＋GYY4137组。假手术组、假手术＋GYY4137组仅分离而不结扎左肾静脉，VC组与VC＋GYY4137组结扎左肾静脉制备VC模型，VC＋GYY4137组、假手术＋GYY4137组术后每日腹腔注射GYY4137(10 mg/kg)。采用苏木精-伊红(HE)染色观察睾丸组织病理改变；测定睾丸组织中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)含量；采用原位缺口末端标记法(TUNEL)检测细胞凋亡指数；免疫组织化学及蛋白质印迹法(Western blot)检测睾丸组织中B细胞淋巴瘤/白血病-2相关X蛋白(bax)和半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase)-3的表达。两组间比较采用t检验。结果VC组可见各级生精细胞排列紊乱且广泛脱落，VC＋GYY4137组可见生精细胞排列轻度紊乱，少数腔内见脱落的生精细胞。与假手术组[(1.86±0.23) nmol/g蛋白]和假手术＋GYY4137组[(1.83±0.22) nmol/g蛋白]比较，VC组[(4.33±0.37) nmol/g蛋白]中MDA含量明显增加(t＝9.820、10.059，P<0.05)；VC＋GYY4137组[(2.38±0.27) nmol/g蛋白]与VC组比较，MDA含量显著下降(t＝-7.374，P<0.05)。VC组的SOD活性[(0.23±0.04) U/mg蛋白]与假手术组[(0.81±0.06) U/mg蛋白]和假手术＋GYY4137组[(0.82±0.07) U/mg蛋白]比较明显降低(t＝-9.757、-9.926，P<0.05)；VC组经GYY4137处理后SOD活性增加[(0.62±0.06) U/mg蛋白](t＝9.368，P<0.05)。TUNEL结果显示假手术组及假手术＋GYY4137组[(3.89±0.45)%、(3.92±0.51)%]可见较少的睾丸生精细胞凋亡，VC组凋亡细胞明显增加[(17.26±0.98)%，P<0.05]；与VC组比较，VC＋GYY4137组生精细胞凋亡明显减少[(8.24±0.65)%，P<0.05]。免疫组织化学及Western blot结果显示Caspase-3和bax表达水平在VC组(0.41±0.04、0.59±0.06)中的表达明显高于假手术组(0.11±0.02、0.19±0.03，t＝9.650、9.097，P<0.05)和假手术＋GYY4137组(0.12±0.02、0.20±0.03，t＝9.327、8.870，P<0.05)；与VC组比较，VC＋GYY4137组(0.21±0.03、0.34±0.04)中Caspase-3和bax表达水平下降(t＝-6.928、-6.005，P<0.05)。结论GYY4137可减轻氧化应激水平和抑制凋亡，从而对VC睾丸生精功能发挥保护作用。