简介：摘要目的探讨1-甲基色氨酸（1-methyltryptophan，1-MT）对脂多糖（lipopolysaccharide，LPS）诱导的人脐静脉内皮细胞（human umbilical vein endothelial cells，HUVECs）通透性及细胞凋亡的影响。方法将HUVECs分为三组，即磷酸缓冲盐溶液（phosphate buffered saline，PBS对照组）、1 μg/mL LPS（LPS组）、含有LPS及1 mmol/L 1-MT（1-MT组）。采用蛋白免疫印迹试验（Western blot）检测孵育8 h后的p120连环（p120 concatemer，p120ctn）、血管内皮钙粘蛋白（vascular endothelial cadherin，VE-cadherin）、caspase-3及DNA修复酶多聚二磷酸腺苷核糖聚合酶-1（DNA repair enzyme polyadenylate ribose polymerase-1，PARP-1）的表达。采用高效液相色谱法（high performance liquid chromatography，HPLC）分别检测孵育2、4、6和8 h的犬尿氨酸（kynurenine，Kyn）浓度，并计算吲哚胺2,3-双加氧酶（indoleamine 2,3-dioxygenase, IDO）活性。组间两两均数比较用LSD-t检验。结果与PBS对照组相比较，LPS组caspase-3 [（74.01±7.91）% vs（157.14±7.63）%，P<0.01]、Kyn表达显著增高，而p120ctn [（49.12±2.15）% vs（37.61±1.80）%，P<0.01]、VE-cadherin [（107.70±7.01）% vs（90.66±2.58）%，P=0.027]及抗凋亡蛋白PARP-1 [（67.95±3.08）% vs（57.93±5.26）%，P=0.038]水平显著降低，IDO活性升高（P<0.05）。与LPS组比较，1-MT组caspase-3 [（157.14±7.63）% vs（110.74±7.89）%, P<0.01]表达显著降低，然而p120ctn [（37.61±1.80）% vs（47.19±0.82）%，P<0.01] 、VE-cadherin [（90.66±2.58）% vs（107.27±9.89）%，P=0.029]及PARP-1 [（57.93±5.26）% vs（74.12±4.90）%，P=0.005]表达显著升高，不同时间点IDO活性均降低（P<0.05）。PBS组和1-MT组p120ctn、VE-cadherin、PARP-1蛋白水平、Kyn浓度及IDO活性差异无统计学意义（P>0.05），1-MT组caspase-3蛋白水平较PBS组升高（P=0.001）。结论LPS刺激HUVECs通透性增加，而1-MT可通过抑制IDO活性和降低Kyn水平拮抗LPS的刺激作用，此外，1-MT还可降低细胞凋亡，其机制可能是通过增加PARP-1表达，降低caspase-3水平，从而发挥内皮细胞的保护作用。

简介：无

简介：摘要目的探讨肝颈返流试验（HRT）评估感染性休克患者容量反应性中的临床应用价值。方法采用前瞻性队列研究评估感染性休克患者的容量反应性，以脉搏指示持续心排量测定（PiCCO）联合容量负荷试验（VE）获取的心输出量变异度（ΔCOVE）为金标准，将ΔCOVE≥15%定义为液体反应阳性，反之为液体反应阴性。所有患者进行HRT和VE，获取心率、平均动脉压（MAP）、中心静脉压（CVP）、心输出量（CO）及每搏输出量（SV）等血液动力学参数，其中包括HRT 15 s和60 s的数据，并与ΔCOVE相比，获得相关性指标。以受试者工作特征曲线（ROC）分析HRT后ΔCOHRT、ΔSVHRT对容量反应性的评估价值。结果60例感染性休克患者中，液体反应阳性组36例，液体反应阴性组24例，2组患者一般临床资料比较无统计学意义。与HRT前基线值1相比较，液体反应阳性组中HRT后15 s血液动力学参数CVP、CO、SV显著增加［CVP：（8.9±2.1）cmH2O vs（7.8±1.9）cmH2O，CO：（3.7±0.7）L/min vs（3.4±0.7）L/min，SV：（30.2±6.2）ml vs（27.2±6.7）ml，P<0.05］，而液体反应阴性组无显著变化（P>0.05）。HRT 15 s与60 s相比，心率、MAP、CVP、CO及SV差异均无统计学意义。VE试验中，液体反应阳性组VE后MAP、CVP、CO及SV较补液前基线值2有所增加［MAP：（75.7±7.3）mmHg vs（72.0±7.6）mmHg，CVP：（9.1±1.5）cmH2O vs （8.0±1.8）cmH2O，CO：（3.8±0.7）L/min vs （3.5±0.6）L/min，SV：（30.2±5.6）ml vs （27.2±6.7）ml，P<0.05］。相关性分析显示，ΔCOHRT、ΔSVHRT与ΔCOVE具有相关性（r=0.82、0.83，P均<0.01）。此外，HRT中，以ΔCOHRT=11.7%为阈值，预测容量反应性的曲线下面积为0.95±0.03（95%CI：0.903~1.00，P<0.01），敏感度为91.7%，特异度为87.5%；以ΔSVHRT=12.7%为阈值，预测容量反应性的曲线下面积为0.942±0.03（95%CI：0.884~0.999，P<0.01），敏感度为83.3%，特异度为91.7%。结论HRT利用自体输液原理判断容量反应性，是一种无创、操作便捷、较可靠的评估感染性休克患者容量反应性的新方法，值得临床推广应用。