简介：摘要目的探讨微小RNA(microRNA，miR)-155对氧化型低密度脂蛋白(oxidized-LDL particles，oxLDL)活化的RAW264.7细胞分泌的趋化因子的调控作用及其对辅助性T细胞1(helper T cell 1, Th1)分化的间接调控作用。方法培养RAW264.7细胞，向细胞内转染寡聚核苷酸(miR-ctrl、miR-155 mimics、miR-155 inhibitor、miR-155 mimics＋siRNA-ctrl和miR-155 mimics＋CXCL10 siRNA)，并以此对细胞进行分组。oxLDL刺激所有细胞活化，实时定量反转录聚合酶链反应(quantitative reverse transcription polymerase chain reaction, qRT-PCR)和酶联免疫吸附测定(enzyme-linked immuno sorbent assay, ELISA)方法检测趋化因子表达情况，将上述细胞与纯化并活化的CD4＋T细胞共培养后，流式细胞术检测Th1细胞的分化情况。结果miR-155促进oxLDL活化的RAW264.7细胞分泌CXCL10(mRNA水平：oxLDL刺激细胞6、12和24 h的F值分别为44.86、214.91、688.88；蛋白水平：oxLDL刺激细胞6、12和24 h的F值分别为284.57、144.66、60.95，P值均<0.05)；在RAW264.7中上调miR-155的表达可促进CD4＋T细胞分化为Th1细胞(F＝26.72，P<0.05)；阻断RAW264.7细胞中CXCL10的表达则抑制miR-155对Th1细胞的间接调控作用(t＝3.78，P<0.05)。结论miR-155可通过促进oxLDL活化的RAW264.7细胞分泌CXCL10间接促进Th1细胞分化。

简介：摘要目的观察低氧微环境对胃癌细胞增殖、转移功能的影响，并探讨其相关的分子学机制。方法细胞增殖检测试剂盒(CCK-8)、Transwell法检测SGC-7901细胞经低氧处理后的增殖、迁移及侵袭能力，应用高通量测序(Illumina Hiseq)对低氧处理后的微小RNA(miRNA，miR)差异基因进行检测；实时定量聚合酶链反应(RT-PCR)法、干扰低氧诱导因子-1α(HIF-1α)表达法验证低氧环境下HIF-1α诱导miR-210的能力；后在正常胃黏膜组织、胃癌及癌周组织中检测miR-210的表达，分析其表达量与患者临床病理学特征之间相关性；接下来进一步在体外上调/抑制miR-210后，应用CCK-8、Transwell检测miR-210对胃癌细胞株AGS、SGC-7901增殖、迁移及侵袭能力的影响；后应用生物信息分析、报告基因实验、蛋白质免疫印迹(Western blot)及靶基因干扰实验探讨其发挥功能的具体分子学机制。两组间比较采用t检验。结果与常氧组比较，低氧可明显促进SGC-7901细胞的增殖(0.43±0.13比0.56±0.17，t＝5.43，P<0.05)、迁移(250±28比390±30，t＝10.28，P<0.05)及侵袭能力(220±40比310±45，t＝9.74，P<0.05)；miR-210低氧处理后显著上调的差异miRNA之一；低氧在胃癌细胞中可通过HIF-1α诱导miR-210的表达；胃癌组织中异常表达的miR-210与肿瘤的大小及临床分期相关(P<0.05)；与对照组比较，过表达miR-210可明显促进AGS与SGC-7901细胞的增殖(0.58±0.16比0.73±0.21，t＝6.58，P<0.05)、(0.53±0.11比0.63±0.25，t＝7.18，P<0.05)，迁移(200±20比295±35，t＝8.36，P<0.05)、(185±20比260±10，t＝7.54，P<0.05)，及侵袭(150±25比215±30，t＝5.87，P<0.05)、(145±25比190±30，t＝4.37，P<0.05)能力，而其拮抗剂却显著抑制胃癌细胞的上述恶性能力；最后Western blot等研究表明磷脂酶和张力蛋白同源物(PTEN)是miR-210在胃癌细胞中发挥促癌功能的靶基因。结论低氧环境下HIF-1α介导miR-210可通过靶向调控PTEN的表达促进胃癌细胞的增殖及转移能力。