简介:摘要目的构建新型冠状病毒(severe acute respiratory syndrome coronavirus 2,SARS-CoV-2)和甲型流感病毒双价DNA疫苗,并在小鼠模型中评价其免疫原性。方法将SARS-CoV-2 Beta突变株S1蛋白编码序列和甲型流感病毒Cambodia (H3N2)株HA蛋白编码序列进行密码子优化合成,采用Over-lapping PCR方法,将两个编码基因通过自裂解2A肽(self-cleaving 2A peptides)序列连接成S1-2A-HA片段,构建能同时表达S1蛋白和HA蛋白的双价DNA疫苗,命名为pVRC-S1-2A-HA,间接免疫荧光和Western blot验证S1蛋白和HA蛋白的表达。将DNA疫苗以肌肉注射加电转途径(IM+EP)免疫BALB/c小鼠,间接ELISA、假病毒中和试验和血凝抑制试验检测小鼠体液免疫应答,IFN-γ ELISPOT、胞内细胞因子染色(intracellular cytokine staining,ICS)和CBA法检测小鼠细胞免疫应答。结果双价DNA疫苗pVRC-S1-2A-HA可以同时表达S1蛋白和HA蛋白,初次免疫后能够显著诱导小鼠产生针对S1蛋白的特异性细胞免疫和针对HA蛋白的特异性IgG结合抗体;加强免疫后特异性免疫应答都显著增强,针对S1蛋白的特异性IgG结合抗体几何平均滴度(geometric mean titer,GMT)提高至3 251,细胞免疫提高至1 238 SFC/106个细胞,针对HA蛋白的特异性IgG结合抗体GMT达到45 407。ICS法检测到疫苗加强免疫可诱导小鼠CD4+和CD8+T细胞产生IL-2、IFN-γ、TNF-α;CBA结果显示单针免疫后小鼠脾细胞分泌多种细胞因子(IL-2、IL-4、IL-6、IL-10、IFN-γ)。结论本研究成功构建能同时表达SARS-CoV-2 S1蛋白和甲型流感病毒H3N2亚型HA蛋白的双价DNA疫苗,该疫苗可诱导产生针对S1蛋白和HA蛋白的特异性体液免疫和细胞免疫应答,具有较好的研发与应用前景。
简介:摘要:近年来,由于机关指定、只有唯一供应商能满足技术指标、任务紧急只有一家可以满足要求等原因而选择单一来源采购方式呈不断上升的趋势,可能滋生腐败。研究探索单一来源采购合规风险防控制度要求嵌入供应管理系统,完善体系性系统性风险防控保障措施,建立起一套常态化的合规风险防控机制,促进企业健康发展,具有一定的指导、借鉴作用。
简介:摘要目的肝静脉压力梯度(HVPG)应用现状调查研究对了解此项技术在国内应用真实情况及未来发展至关重要。方法全面调查了国内开展HVPG技术的基本情况,包括该技术的医院分布、医院级别、全年例数、所用导管、平均费用、适应证、存在问题等。结果经调查,2021年我国开展HVPG技术的医院有70家,分布在28个省(自治区、直辖市)。所有调研医院2021年度共计开展HVPG 4 398例,其中单独HVPG检测2 291例(52.1%)。HVPG平均检测费用(5 617.2±2 079.4)元。其中,96.3%团队使用球囊闭塞法完成HVPG检测,且绝大多数团队使用取栓球囊导管(80.3%)。结论本次调研明确了国内HVPG的临床应用现状,证实了国内多家医疗机构已经熟练掌握此项技术,但未来仍需要继续推广和普及。
简介:摘要:在隧道盾构机掘进过程中,壁后同步注浆是较重要的一道工序,目前大多数壁后注浆用浆液为双液浆浆液,性能较好的浆液除能够满足现场施工要求,同时也能保证结构安全,但由于现场施工因素如水温、水玻璃温度及原材料性能致使现场浆液的性能时常不稳定,给现场施工带来了较多麻烦。本文的研究是在现场施工的配合比上,模拟现场施工的温度,探讨水温对双液浆浆体稳定性的影响以及通过添加2-膦酸丁烷-1,2,4-三羧酸与日本TAC安定剂作比较,探讨2-膦酸丁烷-1,2,4-三羧酸对双液浆浆体性能的影响。
简介:摘要:在隧道盾构机掘进过程中,壁后同步注浆是较重要的一道工序,目前大多数壁后注浆用浆液为双液浆浆液,性能较好的浆液除能够满足现场施工要求,同时也能保证结构安全,但由于现场施工因素如水温、水玻璃温度及原材料性能致使现场浆液的性能时常不稳定,给现场施工带来了较多麻烦。本文的研究是在现场施工的配合比上,模拟现场施工的温度,探讨水温对双液浆浆体稳定性的影响以及通过添加2-膦酸丁烷-1,2,4-三羧酸与日本TAC安定剂作比较,探讨2-膦酸丁烷-1,2,4-三羧酸对双液浆浆体性能的影响。