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  • 简介:摘要目的评价hsa_circ_0081596在人神经细胞糖剥夺/复糖复(OGD/R)损伤中的作用。方法培养人神经母细胞瘤细胞,采用随机数字表法将细胞(5代以内)分为4组(n=20):对照组(C组)、OGD/R组(O组)、OGD/R+小干扰RNA(siRNA)组(S组)、OGD/R+siRNA阴性对照组(I组)。C组细胞在37 ℃、5%CO2正常条件下培养,O组细胞铺于6孔板或96孔板待完全贴壁,糖剥夺4 h后复糖复24 h制备OGD/R损伤模型。S组和I组分别转染hsa_circ_0081596 siRNA及其阴性对照,72 h后建立OGD/R模型。采用qRT-PCR法测定hsa_circ_0081596和线粒体分裂蛋白1(Fis1)mRNA的表达水平,采用Western blot发测定Fis1的表达水平,采用CCK-8法确定细胞存活率,采用流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果与C组比较,O组hsa_circ_0081596、Fis1及其mRNA表达上调,细胞存活率降低,凋亡率升高(P<0.05);与O组比较,S组hsa_circ_0081596、Fis1表达下调,细胞存活率升高,凋亡率降低,I组hsa_circ_0081596、Fis1表达上调,细胞存活率降低,凋亡率升高(P>0.05)。结论hsa_circ_0081596可通过上调Fis1表达参与人神经细胞OGD/R损伤的病理生理机制。

  • 标签: RNA 环状 再灌注损伤
  • 简介:摘要目的评价hsa_circ_0025853在人神经母细胞瘤细胞(SK-N-SH细胞)糖剥夺/复糖复损伤(OGD/R)中的作用。方法传代培养SK-N-SH细胞至对数生长期,采用随机数字表法分为4组(n=40):对照组(C组)、OGD/R组、hsa_circ_0025853过表达组(E组)和hsa_circ_0025853过表达阴性对照组(EV组)。C组细胞在37 ℃、5%CO2正常条件下培养,OGD/R组细胞铺于6孔板或96孔板待完全贴壁后糖剥夺16 h后复糖复。E组和EV组分别转染hsa_circ_0025853过表达载体或hsa_circ_0025853过表达阴性对照载体后制备OGD/R模型。于复糖复4和12 h时,采用qPCR法检测hsa_circ_0025853、线粒体动力相关蛋白1(Drp1)mRNA表达水平;Western blot法检测Drp1表达水平,CCK-8法检测细胞活力,流式细胞术检测细胞凋亡率。结果与C组比较,OGD/R组复糖复后细胞活力降低,细胞凋亡率升高,Drp1及其mRNA表达上调,hsa_circ_0025853表达下调(P<0.05);与OGD/R组或EV组比较,E组复糖复后细胞活力升高,细胞凋亡率降低,Drp1表达下调,hsa_circ_0025853表达上调(P<0.05),Drp1 mRNA表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论hsa_circ_0025853表达下调可促进Drp1表达上调,诱发细胞凋亡,参与SK-N-SH细胞OGD/R的发生机制。

  • 标签: RNA,环状 再灌注损伤 线粒体蛋白质类