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A genetically encoded ratiometric calcium sensor enables quantitative measurement of the local calcium microdomain in the endoplasmic reticulum

作者： Chen Luo;Huiyu Wang;Qi Liu;Wenting He;Lin Yuan;Pingyong Xu
学科：生物学 > 生物物理学
创建时间：2019-01-11
出处：《生物物理学报：英文版》 2019年第1期

简介：ThelocalCa^2+releasefromtheheterogeneouslydistributedendoplasmicreticulum(ER)calciumstorehasacriticalroleincalciumhomeostasisandcellularfunction.However;singlefluorescentproteinbasedERcalciumprobesexperiencechallengesinquantifyingtheERcalciumstoreindifferinglivecells,andintensity-basedmeasurementsmakeitdifficulttodetectlocalcalciummicrodomainsintheER.Here,wedevelopedageneticallyencodedratiometricERcalciumindicator[GCEPIA1-SNAPer]thatcandetectthereal-timeERcalciumstoreandlocalcalciummicrodomainsinlivecells.GCEPIA1-SNAPerwaslocatedinthelumenoftheERandshowedalinear;reversibleandrapidresponsetochangesintheERcalciumstore.TheGCEPIA1-SNAPerprobeeffectivelymonitoredthedepletionoftheERcalciumstorebyTGorstarvationtreatment,andthrough让suseweidentifiedheterogeneouslydistributedcalciummicrodomainsintheERwhichwerecorrelatedw让hthedistributionofSTIM1clustersuponERcalciumstoredepletion.Lastly,GCEPIA1-SNAPercanbeusedtodetecttheERcalciumstorebyhigh-throughputflowcytometryandconferstheabilitytostudythefunctionofcalciummicrodomainsoftheER.
标签： RATIOMETRIC CALCIUM sensor LOCAL CALCIUM microdomain

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