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  • 简介:目的:建立便捷经济将DNA溶液填充至显微注射针方法,以提高显微注射法转基因效率。方法:将通常用于转移胚胎口吸管稍加改进,吸取DNA溶液,从尾部直接注入显微注射针。结果:采用本方法填充显微注射针,可在2-5min完成DNA填充。结论:与传统方法相比,本法经济高效,可加快显徽注射法制作转基因动物实验进程。

  • 标签: DNA填充 显微注射 口吸管 微量上样器
  • 简介:目的:研究严重急性呼吸系统综合征冠状病毒(SARS-CoV)N蛋白对甘油总胆固醇含量影响。方法:检测分析144例SARS患者甘油总胆固醇含量在发病后变化;将小鼠随机分组,分别注射生理盐水SARS-CoVN蛋白,连续给药9d后检测小鼠血清中甘油总胆固醇含量变化。结果:SARS患者甘油总胆固醇含量随发病时间有升高变化(P〈0.05),在发病40d前后甘油总胆固醇含量超标的病例数占本时间段内病例数比例显著高于其他时间段,而且超标的含量也明显升高。SARS-CoVN蛋白使小鼠体重明显高于对照组(P〈0.05),甘油含量在3951d明显高于对照组(P〈0.05),总胆固醇含量在2139d也明显高于对照组(P〈0.05)。结论:SARS-CoVN蛋白可以升高小鼠甘油总胆固醇含量,其升高最为明显时间段与SARS患者甘油总胆固醇含量升高时间段基本致。由此推测,SARS-CoVN蛋白可能促使SARS患者发病后甘油总胆固醇含量升高重要原因。

  • 标签: 严重急性呼吸系统综合征 冠状病毒 N蛋白 甘油三酯 总胆固醇
  • 简介:通过磁力搅拌,超声等方法将天然芸苔素内酯,农用链霉素,苦参素进行处理,制备多效纳米生物复合制剂,作用于绿豆种子,进行对比试验,观察芽期生长状况。结果表明:适宜浓度范围内通过纳米制剂处理种子普遍比原剂处理种子发芽率高,芽长,芽粗,鲜重,干重均有不同程度增加。

  • 标签: 磁力搅拌 超声 芸苔素内酯 农用链霉素 苦参素 绿豆
  • 简介:目的:以角鲨烯、山梨醇、吐温为组分,在琥珀酸缓冲液中混和甲型副伤寒沙门菌鞭毛蛋白制备复合佐剂Nano-fla,评价该佐剂对人二倍体狂犬疫苗免疫效果安全性。方法:以人二倍体细胞制备狂犬灭活疫苗为抗原,BALB/c小鼠设置PBS对照组、全剂量疫苗组、半剂量疫苗组、低剂量佐剂组(含半剂量抗原+5μg鞭毛蛋白)、中等剂量佐剂组(含半剂量抗原+10μg鞭毛蛋白),免疫程序为在0、3、7d肌肉注射,并在首针免疫后第7、14d尾静脉采血分离血清,通过快速免疫荧光灶抑制实验检测中和抗体,通过酶联免疫斑点实验检测细胞因子水平。结果:首针免疫后第7d,中等剂量佐剂组中和抗体达保护效力水平,显著高于全剂量疫苗组低剂量佐剂组;第14d时中等剂量佐剂组IgG抗体浓度显著高于全剂量疫苗对照组;第14d中等剂量佐剂组与全剂量疫苗组相比,分泌IFN-γIL-4淋巴细胞数量显著增加。结论:复合佐剂Nano-fla应用到狂犬疫苗中,能有效刺激小鼠体液免疫细胞免疫应答,更早地产生中和抗体,能有效降低抗原用量,具有潜在应用价值。

  • 标签: 鞭毛蛋白 狂犬病疫苗 佐剂
  • 简介:卤醇脱卤酶细菌降解环境中重要污染物有机卤化物关键酶之,具有与其他已知脱卤酶不同脱卤机制。它是类通过分子内亲核取代机制催化邻卤醇转化为环氧化物脱卤酶,可以高效催化有机邻卤醇进行脱卤反应,在治理环境污染方面具有十分重要作用。此外,在催化环氧化物邻卤醇之间转化反应中,卤醇脱卤酶具有很高立体选择性,因而在手性药物合成方面也有广阔应用前景。我们着重从卤化物生物降解途径、脱卤机制及应用等方面介绍了卤醇脱卤酶最新研究进展,同时对卤醇脱卤酶改造新方法进行了阐述与展望。

  • 标签: 卤醇脱卤酶 有机卤化物 生物降解途径 生物催化
  • 简介:目的:从航天诱变向日葵种子中提取高质量总RNA。方法:采用改进SDS法,提取缓冲液与氯仿同时作用液氮研磨材料后,用酸酚-氯仿抽提次,经LiCl过夜沉淀、DNaseⅠ处理、1/2体积无水乙醇沉淀多糖,最后加入1/10体积醋酸钠2倍体积无水乙醇沉淀总RNA,用琼脂糖凝胶电泳与紫外分光光度法测定产量与纯度,用PT-PCR鉴定RNA质量。结果:提取RNA电泳条带清晰,D260nm/D230nm、D260nm/D280nm值分别为2.09、2.00,其产量为35.30μg/100mg,用PT-PCR能扩增出肌动蛋白基因片段。结论:采用该方法提取总RNA纯度高、完整性好,适于进分子生物学研究

  • 标签: RNA提取 向日葵 航天诱变 多酚 多糖
  • 简介:在真核生物细胞中,许多具有生物活性多肽蛋白在其分泌过程中由前体蛋白经内切蛋白酶切割后激活形成.弗林蛋白酶(Furin)就是这个内切蛋白酶家族重要成员之,它可以识别剪切多种蛋白质,如生长医子、血清蛋白、基质金属蛋白酶、受体、病毒囊膜蛋白细菌外毒素等.近年来Furin得到了迅速广泛研究,本文简介了它表达与加工运输、生物学功能、与病毒侵染关系,以及它抑制剂.

  • 标签: 弗林蛋白酶 前体蛋白 内切蛋白酶
  • 简介:探讨菊科植物抽提物对小鼠血液生化成分影响.利用半自动生化分析仪测定血液生化成分,结果表明该抽提物可降低血清白蛋白总蛋白含量;降低乳酸脱氢酶、肌酸激酶活性丙氨酸氨基转移酶活性;对血清中尿素、尿酸、肌酐都有明显降低作用;可减少血清二价金属离子Ca2+、Mg2+含量,增加Cl-含量;对碱性磷酸酶、天冬氨酸氨基转移酶、血清无机磷影响不明显.

  • 标签: 菊科植物 抽提物 小鼠 血液 生化成分 二价金属离子
  • 简介:目的:建立简便对抗体相对亲和力进行定性比较酶联免疫吸附测定(ELISA)方法,以便快速、简便地从大量抗体突变体中挑选高亲和力突变体。方法:将待测抗体倍比稀释后用直接ELISA方法进行定量,同时用相同浓度抗体作为抗与抗原进行间接ELISA反应,以前者吸光度值为横轴、后者吸光度值为纵轴绘制散点图,通过拟曲线判断抗体亲和力高低,并通过BIA-core法对该方法准确性进行验证。结果:通过该方法获得抗体亲和力高低情况与经测定抗体亲和力得出结果致。结论:该ELISA方法简便可行、准确有效抗体亲和力定性比较方法,可以应用于不同抗体亲和力成熟比较研究。

  • 标签: 抗体亲和力 定性比较 酶联免疫吸附测定
  • 简介:本文利用树脂吸附来对氨基葡萄糖盐酸盐母液进行纯化方法研究.方法:采用静态吸附试验正交试验L9(34),优化采用阳离子交换树脂纯化母液工艺条件,使得整体收率达到96.5%.结论:该优化条件得到较高产率纯度氨基葡萄糖盐酸盐.

  • 标签: 静态吸附 正交试验 氨基葡萄糖盐酸盐 条件优化
  • 简介:目的:为进临床试验提供重组人ω-干扰素(rhIFN-ω)分布排泄试验数据。方法:用^125I同位素示踪法结合氯醋酸(TCA)沉淀法测定各主要器官组织总放射性浓度酸沉淀部分放射性浓度,获得rhIFN-ω尿粪排泄胆汁排泄数据。结果:各主要器官组织总放射性浓度AUC0-dh排序由大到小依次为:尿、胸腺、胆囊、膀胱、肾、肾上腺、肠内容物、肠淋巴结、空肠、肺脏、血清、卵巢、脾、肝、肌肉、心脏、骨髓/股骨、睾丸、脂肪、脑。皮下注射^125I-rhIFN-ω后48h尿累计排出量分别达到注入放射量87.9%±2.8%4.0%±1.6%,尿粪合计排出量占注入放射性量91.9%±2.1%,皮下注射^125I-rhIFN-ω后20h内胆汁排泄放射性量占注入放射性量3.34%。结论:rhIFN-ω在泌尿系统分布比较高,与血清蛋白结合比较少,在脑、脂肪肌肉等组织药物浓度最低。rhIFN-ω主要以尿形式排泄。

  • 标签: 重组人 ω-干扰素 组织分布 排泄
  • 简介:EppendorfResearchFamily移液器包括固定体积,可调节体积,以及多通道等多种模式,同时还包括电动研究专用移液器。机械设计特征能够使每天工作部变得有效,舒适,并且不产生肌肉劳损。该系列移液器使用范围包括从0.1ul-5ml。扩大旋钮能有利于拇指进行操作。大分离式枪头排出器按钮能够降低分离枪头时需要压力,扩大手柄则能够提高手部稳定性,并降低手部上臂肌肉受到张力。经过放大后体积指示使体积设置更方便。

  • 标签: 移液器 Research 力学 FAMILY 机械设计 分离式
  • 简介:本文对培养20天后葛仙米不同氯化钙浓度下酶活性进行对比发现,超氧化物歧化酶(SOD)活性随着钙离子浓度升高而降低,多酚氧化酶(PPO)活性随着钙离子浓度升高而降低。苯丙氨酸转氨酶(PAL)在较低钙浓度下表现出较高活性,而在较高钙浓度下活性较低。

  • 标签: 葛仙米 钙浓度 超氧化物歧化酶 多酚氧化酶 苯丙氨酸转氨酶
  • 简介:随着医学发展进步,医学界越来越重视康复学科发展。因为康复医疗在病人治疗过程中有着不可替代作用,它可以改善病人功能障碍,从而提高生存质量。学生可以通过学习功能障碍评定、功能障碍治疗、功能障碍训练等来了解这门学科治疗方法及手段。人体发育学康复医学基础学科,学好人体发育学对提高康复治疗技术有重要意义。

  • 标签: 人体发育学 康复治疗 教学方法 高职院校
  • 简介:杜兴氏肌肉萎缩症(DMD)与X染色体相连严重退行性遗传疾病,它是由于肌萎缩蛋白缺乏表达或截断造成,肌萎缩蛋白透膜性蛋白复合物中。肌萎缩蛋白缺乏可以迅速造成骨骼肌,平滑肌心脏肌退化。

  • 标签: 肌肉萎缩症 蛋白复合物 脂肪 遗传疾病 DMD 骨骼肌
  • 简介:EPADHA人体所需重要不饱和脂肪酸,发挥多种重要生理作用,影响人类生长发育与身体健康.近年来,人们健康保健意识逐渐加强,更为关注EPADHA保健营养价值.因此,EPADHA生物制品提取开发成为了食物资源开发利用热点问题.作为有较疗效好、安全性高营养品,培养富含EPA、DHA生物制品会有个光明前景.本文介绍了EPADHA生物学特性、来源,并着重阐述其在机体脂质代谢中作用.

  • 标签: EPA DHA 脂质代谢
  • 简介:大环内酯类抗生素基因工程近年来生物工程领域研究个热点,利用基因工程改造大环内酯类抗生素合成基因,已经合成了100多种"非天然”天然化合物,为筛选新抗生素开辟了新途径.本研究以糖多孢红霉菌A226基因组DNA为模板,先用PCR扩增出红霉素合成基因eryKR6两侧片段,再用重叠PCR将其拼接成去除KR6约3.2kbDNA片段,并克隆于pWHM3载体,构建了同源重组质粒pWHM2201.用PEG介导将pWHM2201转入糖多孢红霉菌A226原生质体.PCR鉴定生物活性检测均显示pWHM2201已重组到红霉素合成基因位点.在无抗性R3M斜面上生长两代后,制备重组体原生质体,并涂R3M平皿.利用PCR筛选出KR6敲除突变体糖多孢红霉菌M.

  • 标签: 酮内酯类化合物 3-去氧-3-羰基-红霉内酯B 基因工程 合成
  • 简介:目的:研究脂多糖(LPS)对人血清中补体系统激活及在小鼠模型中诱导产生烯B4(LTB4)。方法:LPS包被ELISA板,利用血清中补体C4、C3沉积实验检测补体成分被LPS活化情况,通过尾静脉注射小鼠LPS后不同时间点ELISA定量检测LTB4,评价补体系统活化炎症因子产生。结果与结论:血清系统ELISA检测发现LPS可以激活补体系统,以凝集素途径为主;动物实验中LTB4被LPS诱导后1~3h达到峰值,之后回落。C1INH对血清补体活化动物模型中LTB4产生均有显著抑制。

  • 标签: 脂多糖 补体 凝集素途径 白三烯B4
  • 简介:小型节肢动物,会通过吸入或动物血传染多种疾病。日本专家最近在蜱体内发现可以抑制病原体增殖酶这可能有助于开发治疗由蜱引发感染症药物。

  • 标签: 日本专家 病原体 增殖 体内 小型节肢动物