简介：基因克隆一般分为定位克隆和表型克隆。表型克隆进展较快,主要有消减杂交、代表性差异分析法、mRNA差异显示、DNA转染法及抑制消减杂交法。抑制消减杂交法是1996年报道的一种表型克隆的新方法,是目前寻找差异表达基因的较有效方法,较过去的方法有许多先进之外。本文对此方法的原理及应用作一详细介绍,并与其他方法作简单比较。

简介：目的：建立盐酸雷尼替丁有关物质高效液相色谱检测方法及方法学研究.方法：采用色谱柱：AgelaVenusilASBC184.6×150mm,流动相为0.08mol/L柠檬酸溶液（用三乙胺调节pH至3.5）-乙腈（80∶20）,检测波长为314nm.流速为1.0ml/min;柱温为30？C.结果：采用该方法能将杂质与主成分有效分离,专属性良好,耐用性强,10小时内溶液较稳定,经检测限试验证明该方法能有效检出杂质.结论：高效液相方法简便,准确度高,专属性好,建议采用此法测定盐酸雷尼替丁的有关物质.

简介：反思当下语文教学改革,取得了不少经验,但也存在不少问题。让一些师生颇感疲惫。语文该怎么教?《普通高中语文课程标准》(实验)的试行如一股春风吹进课堂,为我们语文教学改革指明了方向。本文试从回归人文和走出课堂两角度分析新课标下的语文教学,以探前路。

简介：提高消防装备效能一直是消防工作的研究重点问题之一。从装备的配置要符合实际需要、普及装备常识、确保特殊装备专人负责、强化装备维护保养以及加强人和装备的结合方法研究五个方面进行了研究。

简介：日益增强的国际合作的大经济环境,使高职学生将面临着越来越强的就业压力。本文从文章层面的分析,文章的英语层面分析,分析文章的文化层面。

简介：目的：探讨Ca2＋和Na＋诱导细胞凋亡的最佳浓度及时间，并用甲基绿一派诺宁染色法检测凋亡细胞的形态变化。方法：分别用不同浓度梯度及时间梯度的Ca2＋和Na＋胁迫处理洋葱鳞茎内表皮细胞，得诱导的最佳浓度及时间；用甲基绿一派诺宁染色法检测诱导凋亡的洋葱鳞茎内表皮细胞、大蒜根尖细胞和鸡血红细胞的形态特征变化。结果：诱导处理的最佳Ca2＋和Na＋浓度为0．4mol／L，最适时间约为8h，且CaCl2的诱导效果较NaCl好；经甲基绿一派诺宁染色，洋葱鳞茎内表皮细胞、大蒜根尖细胞、鸡血红细胞凋亡细胞的细胞核均呈蓝紫色，细胞质呈红色。结论：找出了诱导细胞凋亡的最适Ca2＋和Na＋浓度和时间，并检测到细胞凋亡。

简介：锈斑楔天牛大面积危害青杨林,近年来气候干旱少雨,气温偏高,在我县浅山、半脑山地区青杨林不同程度受锈斑楔天牛危害,严重的影响了树木的生长,使青杨林面临绝亡,本文通过对锈斑楔天牛形态和生活习性及对青杨林危害规律的描述,提出对锈斑楔天牛的防治方法,以拯救面临绝亡的青杨林种。

简介：随着经济社会的飞速发展和生活水平的不断提高,人们越来越关注和重视由于微生物毒素所导致的食品污染问题.在当前涉及的所有食品安全问题,最为突出的是微生物污染而引发的食源性疾病.鉴于此,使用科学的方法准确、快速地对食品微生物进行检测,对于有效预防肠道传染病和食物中毒至关重要.随着科学技术的不断进步,检测食品微生物的相关技术也得到了飞速发展,主要包括传统的PCR检测技术、电阻电导测定法、快速测试片法、重量分析稀释计和理化检测法等.

简介：在实践中,力求从建构教学模式的角度构建一个四阶段的对话教学模式,以便将对话教学的理论具体化为教学实践中的可操作之物,增强对教学过程的指导性,避免教学实践中的盲目无序。本文首先对高中语文对话教学的现状分析,最后阐述了语文对话教学模式的实现策略。当然,语文对话教学模式的开展还需要很多条件,最主要的是:改变教学观念,提高教师水平:优化教学环境,力促学生主动参加。

简介：比较了不同偶合方法及裂解条件对ω－芋螺毒素及其衍生物线性肽合成效率的影响。结果表明，Ｂｏｃ／Ｂｚｌ策略、Ｆｍｏｃ／Ｂｕｔ策略、手工及仪器对总偶合率影响较小，但裂解条件及保护策略对肽－树脂裂解影响很大，氟化氢体系裂解Ｂｏｃ／Ｂｚｌ法合成树脂副产物较多，且主链易发生断裂，以低高法裂解效率最高。三氟乙酸体系裂解Ｆｍｏｃ法合成树脂效率高，主要副产物是含Ｔｒｔ基的线性肽，增加１，２－二巯基乙醇可提高肽纯度。

简介：英国桑德兰大学科学家领导的研究团队开发出致命超级病菌早期检测术。可在未来一年内用于临床实践。

简介：目的：通过对TRIzol一步法进行改进，建立一种从富含胶原蛋白、多糖及色素的仿刺参体壁提取总RNA的有效方法。方法：样品在液氮中研磨并用TRIzol匀浆后再进行抽提；对TRIzol一步法提取的总RNA进行DNaseⅠ消化和酚氯仿抽提，用2.5mol/L的醋酸钾沉淀，并加入适量糖原（10mg/mL）与RNA共沉淀。结果：琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度法以及RT-PCR检测结果表明，改进的方法能够有效去除基因组DNA、蛋白、多糖及色素的污染，RNA的产率提高。结论：制备的总RNA纯度高，完整性好，能够满足mRNA差异显示RT-PCR等分子生物学研究的要求，是一种提取仿刺参体壁及其他富含黏多糖、胶原蛋白和色素的动物组织总RNA的有效方法。

简介：外温动物俗称冷血动物,一般情况而言是指鱼类、两栖类和爬行类动物的统称。通过对其活动节律的研究能起到更好的认识、保护和利用的作用。本文通过简单介绍各种情况和不同种类的研究方法,以及国内外相关研究的举例举,对以后的相关研究的实验方法提供相关选择和帮助。

简介：蛋白质作为生命活动中起重要作用的生物大分子，与一切揭开生命奥秘的重大研究课题都有密切的关系。蛋白质的分离与检测是蛋白质研究的主要技术之一。我们就蛋白质检测的常规方法、电化学检测方法、分子生物学检测方法、电泳法和质谱法等进行了简要综述。

简介：随着我国畜牧业的不断发展,畜牧业为我国经济带来了巨大的影响,也做出了很多贡献。改革开放至今,畜牧业一直在走向成熟和进步,也一直受到了国家的大力扶持,使得我国的畜牧业能够快速的成长,尤其在最近几年,由于畜牧业的生产和生活越来越受到了社会的关注和国家的重视,畜牧业已经成为了我国可持续发展中重要的组成部分。牛是一种家畜型哺乳动物,具有较强的生命力,牛为人们的生产和生活提供了较大的帮助。因此,牛疾病的问题也成了现在最重要的工作,也是很多人一直关注的问题,笔者在本文分析了牛常见的疾病,并针对一些牛的疾病提出了相应的防治方法,具有一定的现实意义。

简介：新课改为高中语文教学提出了新的要求,要求提倡高中语文学生自主学习能力的培养,因此,作为教师一定要充分调动学生的学习积极性和能力,让学生学会主动的探究语文知识,提高自己的综合素质,挖掘自身的潜能,让学生在不知不觉中获得分析问题解决问题的能力,获得更强的自主学习能力,对于快节奏的高中学习而言,如果每一个知识都要老师的讲解,那么语文学习将会十分艰难,所以,笔者现针对高中语文自主学习能力的提高和培养提出了以下意见建议.

简介：目的:对临床免疫检验的质量控制方法及效果进行分析探讨。方法:选取自2011年8月至2013年8月期间实施免疫学检验的资料作为研究对象,对其进行收集整理,从临床标本、试剂及仪器等可能导致免疫检验结果出现误差的因素入手,探讨出控制临床免疫检验质量的有效方法。结果:通过分析可知,标本质量、仪器设备、人员素质以及实验室的温度、湿度等都是影响临床免疫检验质量的主要因素(P<0.05)。结论:在临床上,影响免疫检验质量的因素有很多,因此对实验室操作人员提出了更高的要求,使其必须严格按照操作规程执行,注意检验中存在的细节,从而有效的确保检验质量。

简介：目的:建立适合于止痛透骨贴微生物限度检查的方法。方法:参照《中国药典》2010版一部微生物限度检查法验证试验的要求,采用中和-离心薄膜过滤法进行细菌数检查,采用平皿法进行霉菌和酵母菌数检查,采用直接接种法进行控制菌检查。结果:5种验证菌株的回收率均高于70%,控制菌检查经方法验证,可用直接接种法对金黄色葡萄球、铜绿假单胞菌、大肠菌群进行检查。结论:建立的方法准确可靠,适用于止痛透骨贴的微生物检查。

简介：目的：对目前最常用的检测微小RNA（miRNA）的茎环实时定量PCR法和PAP实时定量PCR法进行比较。方法：分别用茎环实时定量PCR法和PAP实时定量PCR法检测人乳腺癌细胞MCF-7中U6和23种miRNA的表达,利用定量PCR分析软件和琼脂糖凝胶电泳方法,将2种方法在引物设计难度、特异性与灵敏度,以及检测通量方面进行比较。结果：茎环法的特异性和灵敏度比PAP法高,但引物设计难度大,检测通量低;PAP法引物设计难度较低,检测通量较高,但特异性和灵敏度较差。结论：茎环法实时定量PCR适于有针对性地检测小规模miRNA,而PAP法则适于大规模miRNA筛选实验。

简介：分离和鉴定不同生物基因的差异序列，有助于功能基因的分离，揭开物种间进化的规律，阐明某些疾病相关基因的作用机理。本文简述了几种近年来常用的筛选差异基因的方法，特别是最新发表的杂交监控差异分析法（HMDA）的原理、适用范围及其特点，重点探讨了HMDA法在真核基因组差异序列筛选中的技术性突破及其研究前景。