简介:摘要目的分析靶向乙型肝炎表面抗原(HBsAg)的嵌合抗原受体(CAR)-T细胞对表达HBsAg的肝癌细胞的杀伤作用。方法构建HBsAg-CAR基因,通过慢病毒载体将其转导入T细胞(健康捐献者的血液中获取),制备HBsAg-CAR-T细胞。制备CD19-CAR-T细胞作为Mock组,未转导的T细胞为Untransduced组。上述三种效应细胞分别与肝癌细胞共同培养,检测三组细胞对肝癌细胞的杀伤作用及抗肿瘤细胞因子(肿瘤坏死因子-α、干扰素-γ、白细胞介素2等)释放水平。建立免疫缺陷NPG小鼠PLC/PRF/5肝癌皮下成瘤模型,随机分组,尾静脉注射HBsAg-CAR-T细胞(实验组,n=5)或未转导的T细胞(对照组,n=5),注射后第15天测量肿瘤体积。结果体外培养过程中,HBsAg-CAR-T细胞具有较高的增殖能力及存活率,CAR的表达稳定。与表达HBsAg的肝癌细胞共培养后,HBsAg-CAR-T组释放的抗肿瘤细胞因子明显高于Mock组及Untransduced组,差异均有统计学意义(均P<0.05);HBsAg-CAR-T组对HBsAg表达阳性的肝癌细胞的杀伤率明显高于Mock组及Untransduced组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。实验组NPG小鼠肿瘤体积为(250.8±62.8)mm3,低于对照组小鼠肿瘤体积(757.5±102.6)mm3,差异有统计学意义(P<0.05)。结论HBsAg-CAR-T细胞能够特异性识别并杀伤HBsAg阳性肝癌细胞,并释放高水平的抗肿瘤细胞因子。
简介:摘要目的探讨癌抗原125与乙型肝炎肝硬化患者肝硬化的严重程度、并发消化道出血和并发腹水间的相关性。方法纳入2017年1月至2019年7月于宿迁市人民医院感染科住院的294例乙型肝炎肝硬化患者,分析其血清癌抗原125的水平。采用logistics回归分析癌抗原125与肝硬化失代偿和并发腹水的相关危险因素,以受试者操作特征曲线(receiver operating characteristic curve,ROC曲线)下面积评估癌抗原125对乙型肝炎肝硬化失代偿及并发腹水的临床诊断价值。结果代偿期肝硬化患者癌抗原125水平为9.38(6.42,15.22) IU/mL,低于失代偿期肝硬化患者的56.04 (20.70,354.95) IU/mL,差异有统计学意义(Z=-9.937,P<0.01);未并发消化道出血和并发消化道出血患者的癌抗原125水平分别为15.15(8.32,48.34) IU/mL和21.22(13.18,55.79) IU/mL,差异无统计学意义(Z=-1.186,P=0.236);腹水患者的癌抗原125水平为105.01(22.08,419.53) IU/mL,高于无腹水患者的9.59(6.60,16.49) IU/mL,差异有统计学意义(Z=-10.592,P<0.01)。癌抗原125水平与白蛋白-胆红素评分、终末期肝病模型评分、Child-Pugh评分和腹水量均呈正相关(r=0.585、0.393、0.696、0.697,均P<0.01)。血清癌抗原125水平是乙型肝炎肝硬化失代偿及并发腹水的独立相关因素,两者呈正相关。在诊断乙型肝炎肝硬化失代偿及并发腹水方面,癌抗原125的ROC曲线下面积为0.895,高于癌抗原199和癌抗原50;在诊断乙型肝炎肝硬化失代偿方面,癌抗原125的ROC曲线下面积为0.874,亦高于癌抗原199和癌抗原50。结论血清癌抗原125水平与乙型肝炎肝硬化的严重程度和腹水量均呈正相关,与是否合并消化道出血无关,可作为评估乙型肝炎肝硬化严重程度和腹水的重要指标。
简介:摘要降钙素和癌胚抗原是甲状腺髓样癌(MTC)最重要的血清学标志物。在甲状腺结节人群筛查中0.3%~5.9%的人降钙素升高;当降钙素>100 pg/mL时基本可以确诊MTC;术前降钙素及癌胚抗原水平可反映肿瘤负荷、辅助疾病的诊治:当降钙素>200 pg/mL、癌胚抗原>30 ng/mL时约1/3以上患者有侧颈淋巴结转移,当降钙素<500 pg/mL时鲜有患者出现远处转移,而当癌胚抗原>100 ng/mL时远处转移比例可达75%;在遗传型MTC中降钙素<30 pg/mL时肿瘤多局限在腺体内、不发生转移。手术后多数患者降钙素和癌胚抗原水平可在1月内降至正常,初始疗效反应评估时,无结构复发患者术后血清降钙素降至不可测、癌胚抗原降至正常者预后好,未来极少会出现死亡且鲜有复发;而随着术后降钙素水平增高,患者局部复发、淋巴结及远处转移的风险也将增加;降钙素、癌胚抗原倍增时间(Ctn-dt、CEA-dt)可反映疾病预后,当其<0.5年时患者多会死亡。
简介:摘要目的探讨血清癌胚抗原(carcinoembryonic antigen,CEA)在预测可手术甲状腺髓样癌(medullary thyroid carcinoma,MTC)淋巴结转移中的临床应用价值。方法选取2009年1月至2019年2月在中国科学院大学附属肿瘤医院(浙江省肿瘤医院)头颈肿瘤外科和杭州市第一人民医院肿瘤外科接受手术的140例MTC,回顾性分析血清CEA和140例可手术MTC淋巴结转移的相关性,计算血清CEA预测可手术MTC总体、中央区、侧颈和上纵隔淋巴结转移的受试者工作特征曲线下面积(area under the curve,AUC)、敏感性、特异性,以评估血清CEA表达水平预测可手术MTC淋巴结转移的临床价值。结果140例可手术MTC中有108例血清CEA呈阳性表达,阳性率77.14%。伴淋巴结转移的MTC患者血清CEA显著高于无淋巴结转移者(P<0.001),且血清CEA与淋巴结转移数目正相关(P<0.001)。血清CEA预测可手术MTC总体、中央区、侧颈和上纵隔淋巴结转移的AUC分别为0.773、0.768、0.827及0.847。以约登指数最大时,分别取界值为6.58、11.43、15.74、30.45 ng/ml,血清CEA预测总体、中央区、侧颈和上纵隔淋巴结转移的敏感性分别为88.46%、81.43%、85.00%、95.00%,特异性分别为56.45%、60.00%、71.25%、69.17%。结论血清CEA在可手术MTC中有较高的阳性率,其表达水平在评估MTC淋巴结转移方面具有重要的临床价值。
简介:摘要目的探讨尿液核基质蛋白22(NMP22)联合膀胱肿瘤抗原(BTA)检测在膀胱癌诊断中的价值,为膀胱癌的早期筛查提供实验室依据。方法回顾性分析2018年8月至2019年7月陕西省宝鸡市中心医院收治的315例疑似膀胱癌患者的临床病理资料,其中经手术病理或膀胱镜活组织检查确诊为膀胱癌248例,泌尿系统良性疾病67例;同时选择同期体检健康者100名作为健康对照组。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测尿液NMP22和BTA水平。结果膀胱癌组、泌尿系统良性疾病组和健康对照组尿液NMP22表达水平分别为(28.4±8.8)ng/ml、(12.7±3.0)ng/ml、(4.3±1.5)ng/ml,差异具有统计学意义(F=26.41,P<0.05);BTA表达水平分别为(25.1±8.1)ng/ml、(10.4±2.9)ng/ml、(6.4±2.4)ng/ml,差异具有统计学意义(F=23.62,P<0.05)。不同TNM分期、病理分级的膀胱癌患者尿液NMP22和BTA表达水平比较,差异均具有统计学意义(均P<0.05)。尿液NMP22和BTA联合检测的受试者工作特征曲线下面积、灵敏度、阴性预测值分别为0.895、96.98%和61.11%,均高于其单项检测,差异均具有统计学意义(均P<0.05)。NMP22和BTA诊断膀胱癌的cut-off值分别为32.42 ng/ml和29.13 ng/ml。结论尿液NMP22和BTA联合检测对膀胱癌诊断具有较高的临床价值,检测具有简便、快速、无创、批量筛查等优点,值得在临床上推广。
简介:摘要目的探讨肝细胞癌患者术前血清糖类抗原19-9(CA19-9)水平与肝切除术预后的关系。方法回顾分析2012年1月至2017年12月在广西医科大学附属肿瘤医院行肝切除术的1 102例肝细胞癌患者临床资料,其中男性960例,女性142例,平均年龄51岁。随访复发和生存情况。应用X-tile软件确定55 U/ml作为CA19-9预测预后的最佳界值,并据此将入组患者分为低水平组(CA19-9≤55 U/ml,n=956)和高水平组(CA19-9>55 U/ml,n=146)。采用Kaplan-Meier法进行生存分析,log-rank检验比较生存率,Cox回归分析肝细胞癌患者预后的危险因素。结果低水平组术后1、3、5年累积生存率分别为85.0%、68.2%、60.9%,高于高水平组80.1%、58.2%、47.0%,差异有统计学意义(P<0.05)。低水平组术后1、3、5年累积无复发生存率分别为60.5%、44.6%、37.9%,高于高水平组53.4%、33.3%、25.1%,差异有统计学意义(P<0.05)。Cox回归多因素分析,CA19-9>55 U/ml(HR=1.323,95%CI:1.070~1.636,P=0.010)的肝细胞癌患者肝切除术后复发风险高,CA19-9 >55 U/ml(HR=1.511,95%CI:1.163~1.964,P=0.002)的肝细胞癌患者肝切除术后生存预后差。结论术前血清CA19-9>55U/ml是肝细胞癌患者肝切除术后生存和复发的独立危险因素,CA19-9对肝细胞癌患者的预后具有一定的预测价值。
简介:摘要目的观察颈部淋巴结转移癌的超声影像特点,并分析其与细胞核增殖相关抗原(Ki-67)表达的关系。方法回顾性分析浙江衢化医院2017年6月至2019年7月收治的颈部淋巴结转移癌患者92例的临床资料,观察其超声影像特点和Ki-67表达情况,分析两者的相关性。结果92例患者中经病理检查确诊158枚转移淋巴结,其主要的超声影像特点为长短径比<2有119枚(75.32%)、门部高回声消失127枚(80.38%),点状回声高回声108枚(68.35%),囊性变57枚(36.08%)、周边血流信号为混合型124枚(78.48%)、淋巴结微钙化123枚(77.85%);其中长短径比<2、点状回声高回声、周边血流信号为混合型与Ki-67高表达有相关性(χ2长短径比=24.252,χ2点状回声高回声=15.732,χ2混合型周边血流信号=17.033,均P<0.05)。结论颈部淋巴结转移癌的超声影像征象长短径比<2、点状回声高回声、周边血流信号为混合型与Ki-67高表达有相关性。
简介:摘要目的比较卵巢癌患者绝经前后人附睾蛋白4(human epididymis protein 4,HE4)和糖类抗原125(carbohydrate antigen 125,CA125)的差异,并评价卵巢癌风险预测模型(risk of ovarian malignancy algorithm,ROMA)指数的早期诊断效能。方法选择2018年4月至2019年9月期间在中国医科大学肿瘤医院住院治疗的236例卵巢癌(恶性卵巢肿瘤组)患者的临床资料进行回顾性分析,另选取同期治疗的良性卵巢肿瘤患者312例作为对照(良性卵巢肿瘤组)。在临床病理切片确认的基础上,分别采集患者的血清以检测HE4和CA125,同时依据公式计算得出ROMA;比较绝经前后HE4、CA125和ROMA指数的差异性,以及三者的ROC生存曲线的诊断效能,并且评价其在卵巢癌患者不同的临床特征之间的关系,以全面分析ROMA指数的早期诊断效能。结果在恶性卵巢肿瘤者血清中,HE4、CA125以及ROMA指数均异常高表达,且HE4绝经前[263.2(128.4,385.6) pmol/L]后[354.8(179.5,554.2) pmol/L]比较差异有统计学意义(Z=2.09,P=0.037);通过拟合ROC曲线:绝经前ROMA指数的AUC为0.939,绝经后ROMA指数的AUC为0.933,均高于HE4(0.937,0.906)和CA125(0.913,0.924),其分别对应的Youden正确诊断指数分别为0.800和0.742,均高于相应的HE4(0.788,0.653)和CA125(0.498,0.565)指标;HE4两分类与腹腔积液发生有关联[绝经HE4<140 nmol/L和未绝经HE4<70 nmol/L者占25.77%,绝经HE4≥140 nmol/L和未绝经HE4≥70 nmol/L者占74.23%],差异有统计学意义(χ2=10.155,P=0.006);CA125与实质肿瘤最大直径分类、腹腔积液发生有关联,差异均有统计学意义(P均<0.05);ROMA指数与绝经与否、肿块最大直径分类、实质肿瘤最大直径分类、腹腔积液发生均有关联,差异均有统计学意义(P均<0.05)。结论ROMA指数针对于恶性卵巢癌尤其是绝经前的患者具有良好的诊断效能,对于卵巢癌的早期诊断有一定的指导价值,后续还会进一步开展验证性研究。
简介:摘要目的探讨周围型肺癌血清中基质金属蛋白酶(MMP-9)、鳞状细胞癌抗原(SCC)、角蛋白19片段(CYFRA21-1)、癌胚抗原(CEA)、神经元烯醇化酶(NSE)的水平变化及临床意义。方法选择2017年1月至2020年1月台州恩泽医疗中心(集团)路桥医院收治的周围型肺癌患者68例作为观察组,选择同期肺部良性疾病患者65例作为观察1组、同期健康体检者65例作为对照组。比较三组受试者血清MMP-9、CYFRA21-1、SCC、NSE、CEA水平,对比上述指标单独检测与联合检测诊断周围型肺癌的敏感性、特异性。结果观察组血清MMP-9、CYFRA21-1、SCC、NSE、CEA水平[(14.98±2.10)ng/mL、(17.13±2.71)ng/mL、(1.98±0.41)μg/mL、(24.13±2.10)ng/mL、(17.10±2.10)ng/mL]均高于观察1组[(9.12±1.41)ng/mL、(10.12±1.58)ng/mL、(1.37±0.31)μg/mL、(16.31±1.78)ng/mL、(12.13±1.79)ng/mL]和对照组[(5.10±0.68)ng/mL、(6.02±0.94)ng/mL、(0.71±0.11)μg/mL、(11.10±1.02)ng/mL、(8.13±1.02)ng/mL],差异均有统计学意义(F1=932.781,F2=737.100,F3=368.591,F4=989.851,F5=462.291,均P<0.05);Ⅰ~Ⅱ期患者MMP-9、CYFRA21-1、SCC、NSE、CEA水平[(11.12±2.10)ng/mL、(9.12±1.85)ng/mL、(1.52±0.21)μg/mL、(18.12±3.02)ng/mL、(7.52±1.02)ng/mL]均低于Ⅲ~Ⅳ期患者[(15.89±2.18)ng/mL、(21.56±2.11)ng/mL、(2.04±0.31)μg/mL、(28.15±2.62)ng/mL、(15.12±1.55)ng/mL],差异均有统计学意义(t1=9.013,t2=25.146,t3=7.714,t4=14.586,t5=22.705,均P<0.05);联合检测的敏感性(83.33%)、特异性(86.67%)均高于单项检测MMP-9(50.00%、59.68%)、CEA(50.00%、61.29%)、CYFRA21-1(66.67%、58.06%)、SCC(50.00%、54.84%)、NSE(66.67%、58.06%),差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论周围型肺癌患者的血清MMP-9、CYFRA21-1、SCC、NSE、CEA水平均明显升高,对诊断周围型肺癌具有重要价值,上述指标联合检测可提高临床诊断周围型肺癌的准确率。
简介:摘要目的探讨人滋养层细胞表面抗原2(Trop2)在卵巢癌侵袭和转移中的作用及其分子机制。方法通过对Cancer Cell Line Encyclopedia(CCLE)和The Cancer Genome Atlas(TCGA)数据库进行数据挖掘,分析Trop2表达的临床意义。采用Western blot法检测卵巢癌细胞系A3O、A1780和SKOV3中Trop2蛋白的表达。采用Trop2-shRNA构建SKOV3-shRNA细胞模型,以定量逆转录聚合酶链反应检测SKOV3-shRNA和SKOV3-NC组细胞中SKOV3 mRNA的表达,以细胞计数盒8法检测SKOV3-shRNA组和SKOV3-NC组细胞的增殖,以流式细胞仪检测SKOV3-shRNA和SKOV3-NC组细胞的细胞周期和凋亡,以Transwell实验检测SKOV3-shRNA和SKOV3-NC组细胞的侵袭和迁移,以Western blot法检测SKOV3-shRNA和SKOV3-NC组细胞中AKT、p-AKT、β-catenin、caspase3、bcl-2、E-cadherin和vimentin蛋白的表达。结果Trop2 mRNA在卵巢癌中高表达,其表达高低与肿瘤分期有关,也与患者预后有关。与A3O细胞比较,A1780和SKOV3细胞高表达Trop2蛋白(P<0.05)。SKOV3-NC组和SKOV3-shRNA组中Trop2 mRNA的相对表达量分别为1.18±0.24和0.42±0.08,差异有统计学意义(P<0.05)。SKOV3-NC组细胞的活力明显高于SKOV3-shRNA组(P<0.05)。SKOV3-NC和SKOV3-shRNA组G0/G1期细胞的比例分别为(38.67±4.22)%和(60.24±8.17)%,SKOV3-shRNA组细胞阻滞于G0/G1期(P<0.05)。SKOV3-shRNA组细胞的凋亡率为(26.32±1.81)%,明显高于SKOV3-NC组[(6.54±1.32)%,P<0.05]。SKOV3-shRNA组和SKOV3-NC组SKOV3细胞的迁移细胞数分别为(1 255.83±108.44)个/视野和(1 679.71±213.92)个/视野,侵袭细胞数分别为(242.49±52.09)个/视野和(473.54±73.11)个/视野,与SKOV3-NC组比较,SKOV3-shRNA组的迁移和侵袭细胞数均明显减少(均P<0.05)。SKOV3-shRNA细胞中p-AKT、bcl-2、vimentin、β-catenin表达下调,caspase3、E-cadherin表达上调,总AKT没有明显变化。结论Trop2的表达与卵巢癌分期和预后有关,Trop2可通过激活AKT/β-catenin信号通路促进卵巢癌细胞增殖和转移,沉默Trop2的表达可以抑制卵巢癌进展。
简介:摘要目的探讨鼻窦内翻性乳头状瘤(IP)患者和鼻息肉(NP)、鼻炎患者的血清鳞状细胞癌抗原(SCCA)水平差异。方法术前1 d和术后7 d分别检测30例IP患者和30例NP患者的血清SCCA,并检测28例鼻炎患者的血清SCCA。结果IP组中80.0%的患者、NP组中6.7%的患者、鼻炎组中14.3%的患者血清SCCA水平升高(>1.5 ng/ml),差异具有统计学意义。IP、NP和鼻炎组的血清SCCA含量的中位数分别为3.9、0.8和1.1 ng/ml,差异具有统计学意义。IP组血清SCCA水平与Krouse分期无相关性。IP组术前和术后血清SCCA含量的中位数分别为3.9、0.8 ng/ml,差异具有统计学意义。NP组术前和术后血清SCCA含量的中位数分别为0.8和1.0 ng/ml,差异无统计学意义。在IP和NP患者中,用SCCA水平(>1.5 ng/ml)诊断IP的敏感度和特异度分别是80.0%和93.3%。结论IP患者血清SCCA水平升高,手术后降低。而NP和鼻炎患者血清SCCA水平大多正常,术后水平不变。
简介:摘要目的探讨人滋养层细胞表面抗原2(Trop2)在卵巢癌侵袭和转移中的作用及其分子机制。方法通过对Cancer Cell Line Encyclopedia(CCLE)和The Cancer Genome Atlas(TCGA)数据库进行数据挖掘,分析Trop2表达的临床意义。采用Western blot法检测卵巢癌细胞系A3O、A1780和SKOV3中Trop2蛋白的表达。采用Trop2-shRNA构建SKOV3-shRNA细胞模型,以定量逆转录聚合酶链反应检测SKOV3-shRNA和SKOV3-NC组细胞中SKOV3 mRNA的表达,以细胞计数盒8法检测SKOV3-shRNA组和SKOV3-NC组细胞的增殖,以流式细胞仪检测SKOV3-shRNA和SKOV3-NC组细胞的细胞周期和凋亡,以Transwell实验检测SKOV3-shRNA和SKOV3-NC组细胞的侵袭和迁移,以Western blot法检测SKOV3-shRNA和SKOV3-NC组细胞中AKT、p-AKT、β-catenin、caspase3、bcl-2、E-cadherin和vimentin蛋白的表达。结果Trop2 mRNA在卵巢癌中高表达,其表达高低与肿瘤分期有关,也与患者预后有关。与A3O细胞比较,A1780和SKOV3细胞高表达Trop2蛋白(P<0.05)。SKOV3-NC组和SKOV3-shRNA组中Trop2 mRNA的相对表达量分别为1.18±0.24和0.42±0.08,差异有统计学意义(P<0.05)。SKOV3-NC组细胞的活力明显高于SKOV3-shRNA组(P<0.05)。SKOV3-NC和SKOV3-shRNA组G0/G1期细胞的比例分别为(38.67±4.22)%和(60.24±8.17)%,SKOV3-shRNA组细胞阻滞于G0/G1期(P<0.05)。SKOV3-shRNA组细胞的凋亡率为(26.32±1.81)%,明显高于SKOV3-NC组[(6.54±1.32)%,P<0.05]。SKOV3-shRNA组和SKOV3-NC组SKOV3细胞的迁移细胞数分别为(1 255.83±108.44)个/视野和(1 679.71±213.92)个/视野,侵袭细胞数分别为(242.49±52.09)个/视野和(473.54±73.11)个/视野,与SKOV3-NC组比较,SKOV3-shRNA组的迁移和侵袭细胞数均明显减少(均P<0.05)。SKOV3-shRNA细胞中p-AKT、bcl-2、vimentin、β-catenin表达下调,caspase3、E-cadherin表达上调,总AKT没有明显变化。结论Trop2的表达与卵巢癌分期和预后有关,Trop2可通过激活AKT/β-catenin信号通路促进卵巢癌细胞增殖和转移,沉默Trop2的表达可以抑制卵巢癌进展。
简介:摘要目的评价人附睾蛋白4(HE4)、糖类抗原125(CA125)和卵巢恶性肿瘤风险模型(ROMA)在卵巢癌鉴别诊断中的应用价值。方法选取徐州市肿瘤医院2016年5月至2017年10月收治的卵巢肿瘤患者240例,根据术后病理结果将卵巢肿瘤患者分为两组,其中卵巢癌组120例,卵巢良性肿瘤组120例(良性组);选取同期该院体检中心体检的健康女性100名作为对照组。电化学发光法检测三组受试者血清HE4和CA125浓度,并计算ROMA,统计分析CA125、HE4、ROMA对卵巢癌的诊断性能。结果卵巢癌组CA125、HE4、ROMA依次为(370.9±213.2)U/mL、(364.4±227.0)pmpl/L、(80.2±26.1)%,与良性组及对照组相比,卵巢癌组均高于良性组和对照组(均P<0.01),良性组与对照组相比三项指标均差异无统计学意义(P=0.356,P=0.321,P=0.292);ROMA的灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值、准确度均高于HE4和CA125,HE4的特异度、阳性预测值、阴性预测值、准确度均高于CA125,CA125灵敏度高于HE4;应用受试者工作特征曲线分析三项指标对卵巢癌的诊断价值,CA125、HE4、ROMA的曲线下面积分别为0.832、0.888、0.960。结论CA125、HE4在卵巢癌鉴别诊断中具有重要价值,而ROMA诊断性能优于HE4、CA125,在卵巢癌诊断中具有更高的应用价值。
简介:摘要目的研究结核分枝杆菌Rv0446c的抗原表位及其免疫原性,为结核病的免疫诊断技术及疫苗研发提供候选抗原及表位。方法利用生物信息学软件TE-predict和IEDB的T细胞表位预测软件对结核分枝杆菌抗原Rv0446c进行T细胞表位预测,用ELISPOT实验检测表位在2019年1月到2020年12月期间来自佛山市第四人民医院和福州肺科医院的结核病患者(50例)、肺部疾病患者(39例)及健康志愿者(55例)中的免疫反应性。将60只6周龄BALB/c小鼠随机分成10组,每组6只,分别采用PBS、血蓝蛋白(KLH)、高剂量结核分枝杆菌抗原Ag85B(50 μg/只)、低剂量Ag85B(20 μg/只)、高计量P120、低剂量P120、高计量P121、低剂量P121、高剂量P123、低剂量P123(P120、P121、P123高剂量为100 μg/只、低剂量为50 μg/只)多肽对其皮下免疫,每只小鼠免疫3次,每次间隔2周,末次免疫后4周,应用ELISA方法检测各组小鼠脾细胞产生的IFN-γ、IL-2、IL-4、IL-10细胞因子水平。结果预测的7条表位多肽中,ELISPOT试验筛选出4条阳性T细胞表位多肽P120、P121、P122、P123,在结核病患者中检测灵敏度和特异度分别为30.0%、18.0%、6.0%、22.0%和96.8%、98.9%、100%、96.8%。与对照PBS组和KLH组比较,P120多肽能刺激小鼠产生较高水平的IFN-γ、IL-4、IL-10,P121多肽刺激小鼠产生较高水平的IFN-γ和IL-4(均P<0.05),P123多肽刺激小鼠产生较高水平的IFN-γ(均P<0.05)。P120、P121、P123多肽刺激小鼠产生的IL-2的水平高于PBS组低于Ag85B-L组和Ag85B-H组(均P<0.05),但与KLH组差异无统计学意义(均P>0.05)。结论Rv0446c蛋白及其T细胞表位具有较好的免疫原性及免疫反应性,能刺激机体产生强烈的细胞免疫应答,可用于结核病的临床诊断技术研究和新型结核亚单位疫苗的构建。