简介:目的构建人survivin基因shRNA重组腺病毒载体,为缺氧性肺动脉高压(Hypoxicpulmonaryhypertension,HPH)的基因治疗研究提供实验基础。方法构建survivin-siRNA表达质粒,测序鉴定正确后,将survivin-siRNA表达质粒与含有腺病毒右臂的骨架质粒pBHGE3共转染至人293A细胞,包装成腺病毒Ad-survivin并扩增,TCID50法测定病毒滴度。将人肺动脉平滑肌细胞缺氧培养24h,并将细胞分为空白对照组(Con组),阴性对照组(Ad-LacZ组),不同Adsurvivin序列的干扰组(sh1组、sh2组、sh3组)。Ad-survivin感染缺氧人肺动脉平滑肌细胞,Westernblot检测survivin蛋白,验证重组腺病毒干扰效果。结果(1)将shRNA片段与pAd-U6-CMV连接后的质粒进行测序,结果提示目的基因片段插入成功;(2)TCID50法测定病毒Ad-survivin-shRNA1、Ad-survivin-shRNA2和Ad-survivin-shRNA3的滴度分别是1×1010,1.2×1010,1×1010;(3)sh2组缺氧人肺动脉平滑肌细胞内survivin蛋白表达明显低于其他4组(P〈0.05)。结论本研究成功构建人survivin腺病毒载体,为研究survivin基因在缺氧性肺动脉高压中的作用提供了实验基础。
简介:【摘要】目的:探讨重组人血小板生成素和重组人粒细胞刺激因子治疗化疗放疗后的骨髓抑制的临床疗效分析。方法:选取2018年8月至2022年8月收治的30例化疗放疗后骨髓抑制患者作为研究对象,用随机数字表法将其分对照组和观察组,各15例,对照组接受重组人血小板生成素治疗,观察组接受重组人粒细胞刺激因子治疗,比较两组患者白细胞、中性粒指标、血小板指标、不良反应发生率。结果:观察组第1d、第3d时中性粒细胞、白细胞指标更高,血小板恢复最大值更高(P0.05)。结论:重组人粒细胞刺激因子治疗化疗放疗后骨髓抑制,能更好的控制机体白细胞、中性粒细胞指标,且可确保用药安全。
简介:摘要目的应用生物信息学技术对人类巨细胞病毒(HumanCytomegalovirus,HCMV)分子进行抗原表位预测,构建并表达具有多表位的重组融合蛋白并进行免疫原性鉴定.方法GenBank中查询HCMV氨基酸序列,利用BepiPred、ABCpred、BcePred、PREDICTED四种在线表位预测软件进行细胞表位预测,筛选出可能的抗原决定簇表位,构建、原核表达,并利用免疫印迹实验筛选出可用的表位抗原,原核表达出融合蛋白,用WesternBlot和ELISA检测其抗原性.结果综合预测分析结果,得出13种可能的表位,构建出pET32a原核表达载体,表达并纯化这13种表位的融合蛋白,经免疫印迹技术筛选出gp52、GB3、PP150-1、GB-5具有较强的抗原性表位,通过Ni2+亲和柱纯化,对gp52融合蛋白免疫印迹试验结果表明,蛋白抗原性较强;ELISA法鉴定具有较高的抗原性及特异性.结论在原核表达系统中能获得高效表达,纯化的融合蛋白具有较强的免疫反应性,对后期建立人HCMV免疫检测试剂提供了可能性.关键词预测软件;抗原表位;原核表达;纯化;鉴定中图分类号R392.1文献标识码B文章编号1008-6315(2015)12-0140-01
简介:摘要目的针对在手术室管理当中应用服务流程重组所具备的影响以及其对护士日常工作的作用进行探究.方法选取我院于2014年2月到2015年2月进行外科手术的患者,从中抽出200例作为本文的主要研究对象,并按照随机的方式分成参照组和实验组两组,每组100例.对实验组加以服务流程重组,对参照组行以常规管理.对比两组的护理误差率、护患纠纷率、患者评分等.结果在各项参照指标上出误差率和纠纷率之外参照组高于实验组,其它方面均为实验组高于参照组.结论在手术室管理当中应用服务流程重组有很重要的意义,可以在很大程度上帮助医疗机构提升护理工作的水平、加强护理的质量,并且可以降低差错率,避免护患纠纷等.关键词服务流程重组;手术室管理;应用中图分类号R197文献标识码B文章编号1001-5302(2015)09-0881-01
简介:[摘要]重组人血管内皮抑制素(恩度)是我国自主研发的抗肿瘤分子靶向药物。临床研究表明,本品能抑制血管内皮细胞增殖和血管生成,从而抑制肿瘤生长;与化疗联合使用可以控制和稳定晚期恶性肿瘤的发展,改善患者生活质量,且毒性低,是一种安全有效的药物,在临床治疗得到较好的效果。本文综述了恩度联合化疗、放疗等治疗方案在非小细胞肺癌、大肠癌、胃癌、食管癌、宫颈癌等的临床研究和应用进展。
简介:目的:对大肠杆菌表达的人源重组肝细胞生长肽进行分离纯化获得目的蛋白rhALR。方法:其表达产物在大肠杆菌中以不溶性包含体形式存在,经过超声破菌、包含体抽提、洗涤处理、使包含体纯度达75%以上,用8mol/L尿素变性溶解包含体沉淀后上清直接稀释复性,再经浓缩、透析、离子交换凝胶过滤等系列纯化步骤。结果:纯化后目的蛋白纯度达95%以上。回收率达20%。
简介:目的:分析真核表达产物CTL4-Ig对T细胞活化功能的影响。方法:构建并用真核表达系统表达CTLA4-Ig,通过蛋白A亲合柱纯化获得纯品;然后观察CTLA4-Ig对淋巴细胞转化功能及T细胞表面分子CD25表达的影响;用^3H-TdR掺入法研究CTLA4-Ig对混合淋巴细胞反应的影响。结果:CTLA4-Ig抑制PHA对淋巴细胞的转化;同时,抑制PHA刺激的淋巴细胞表面CD25分子的表达,抑制率达53%,与对照相比抑制显著(P<0.05),且这种效应有剂量依赖性;CTLA4-Ig抑制单向混合淋巴细胞反应,抑制率选87.53%,与对照相比亦抑制显著(P<0.05).且效应亦呈剂量依赖性。结论:CTLA4-Ig能有效阻断T细胞的活化,并且阻断效应是通过多种信号途径起作用的。
简介:目的:构建表达趋化因子CCL20的重组腺病毒载体Ad5-CCL20,检测体外转染小鼠结肠癌细胞CT-26后的产物表达。方法:通过EcoRI/SalI双酶切CCL20质粒和pDC316质粒,将获取编码CCL20的基因片段连接到pDC316重组穿梭质粒。将测序正确的穿梭质粒pDC316-CCL20与骨架质粒pBHGlox_E1,3Cre共同转染293T细胞,构建重组腺病毒载体Ad5-CCL20。予Ad5-CCL20体外转染结肠癌细胞CT-26,Westernblotting和Elisa检测转染后不同时间段CCL20的表达情况,并以含CCL20的上清分别对mDC、iDC进行趋化实验。结果:成功构建表达趋化因子CCL20的重组腺病毒载体Ad5-CCL20;Westernblotting和Elisa均检测到CCL20表达,且CCL20表达量随病毒转染CT-26细胞的时间延长而逐渐增加;趋化实验表明,趋化因子CCL20对iDC、mDC都有趋化作用,但对iDC的趋化作用更加明显(P〈0.05)。结论:重组腺病毒载体Ad5-CCL20的构建及获取为后续开展肿瘤的免疫治疗提供实验基础。
简介:【 摘要】: 目的:观察分析 重组人脑利钠肽联合左西孟旦治疗急性心力衰竭的临床疗效。方法:选择我院 2018 年 8 月 -2019 年 7 月收治的 72 例急性心力衰竭患者为研究对象, 依据抽签法随机分为研究 组与对照组,每组患者 36 例。两组患者均给予常规治疗,在此基础上对照组患者给予左西孟旦注射液治疗,研究 组患者在对照组基础上给予冻干重组人脑利钠肽治疗 。观察两组患者的临床疗效以及 治疗前后心功能指标的变化。结果:研究组总有效率为 94.44% ,明显高于对照组的 75.00% ,差异有统计学意义( P<0.05 )。与治疗前比较, 两组患者治疗后 LVEF 及 6MWT 均明显提高,差异有统计学意义( P < 0.05 );研究组治疗后 LVEF 及 6MWT 均高于对照组治疗后,差异有统计学意义( P < 0.05 ) 。结论:冻干重组人脑利钠肽联合左西孟旦治疗急性心力衰竭临床疗效显著,患者心功能明显改善,临床大力推广及应用的价值较高 。