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  • 简介:目的:评估化学发光微粒子免疫分析(CMIA)对输血前感染性指标检测结果重复性,并制定合理复查策略。方法:对2010-05-2011-11送检标本中低浓度HBsAg或属于乙肝少见指标组合模式HBsAg436例、HBsAb194例、HBeAg147例、HBeAb161例、HBcAb85例,以及756例HCV阳性、707例Syphilis阳性和94例HIV初筛阳性标本进行复查,评估两者之间重复性。结果:HBsAg复查前后符合率为63.07%,HBsAg在浓度≤0.1U/mL、0.1~1.0U/mL、1~10U/mL和〉10U/mL符合率分别为38.25%、66.07%、84.21%、96.11%,各组均差异有统计学意义(P〈0.01)。进一步分组后在0.05~0.15U/mL与0.15~1.00U/mL两组中复查前后符合率在统计学上有差异(均P〈0.05);HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb、HCV、Syphilis和HIV复查前后符合率分别为96.39%、91.16%、96.27%、96.47%、97.35%、98.73%、91.49%。HCV在S/CO值为0.90~1.09与1.10~1.59,两组复查前后符合率差异有统计学意义(P〈0.01)。结论:CMIA检测HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb、HCV、Syphilis和HIV重复性好,但HBsAg重复性较差。当HCVS/CO值在0.90~1.09以及HBsAg浓度≤0.15U/mL时,必须通过高速离心复查以确保检测结果真实性。

  • 标签: 化学发光微粒子免疫分析法 复查 输血前检查 感染性指标
  • 简介:目的:探讨正常妊娠晚期凝血指标及血小板数值特异与妊娠期糖尿病(GDM)变化趋势。方法:对非孕生育期妇女100例和正常妊娠晚期妇女100例,妊娠晚期合并GDM100例患者进行凝血指标及血小板数值监测。结果:与正常非孕生育期妇女相比,正常妊娠晚期凝血酶原时间(PT)、部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶时间(TT)、国际标准化比值(INR)显著降低(10.76s、26.62s、15.93s、0.85s),纤维蛋白原(Fg)和D-二聚体(DD)显著升高(4.10g/L、2.23g/L),血小板(PLT)2组样本均数相比差异无统计学意义;与正常妊娠晚期相比,GDMPT、APTT、INR显著升高(11.27s、27.36s、0.89s);Fg、DD、PLT2组样本数均差异无统计学意义。结论:正常妊娠晚期血凝呈高凝状态,妊娠期糖尿病呈病理性高凝,其凝血与继发性纤溶呈动态平衡,注意其凝血指标特殊性有助于及时诊断和(或)排除肺栓塞、弥散性血管内凝血。

  • 标签: 妊娠晚期 妊娠期糖尿病 凝血功能
  • 简介:目的:探索应用免疫磁珠富集母体外周血DNA并预测其胎儿RHD血型。方法:采集96例来自武汉大学中南医院产前诊断确诊为RHD阴性孕妇外周血,使用免疫磁珠和血液DNA提取试剂盒(QIAgeneDNA)抽提母体外周血DNA用以提取胎儿DNA。通过测定母体血浆中SRY和STR来证实是否获得胎儿DNA,同时使用荧光定量PCR(RQ-PCR)扩增胎儿RHD基因外显子7,预测胎儿RHD血型。结果:通过免疫磁珠,胎儿DNA总提取量提高了1.8倍。配对四格表2检验结果显示免疫磁珠在准确度方面与QIAgeneDNA法相较,妊娠早期(≤14周)2种方法差异有统计学意义(P〈0.05),妊娠中晚期(〉14周)2种方法差异无统计学意义。另外,使用免疫磁珠提取DNA预测胎儿RHD血型时,有86例结果与胎儿RHD血清学方法鉴定一致,使胎儿RHD血型预测准确率高达89.6%。结论:使用免疫磁珠提取胎儿DNA不仅能够改善胎儿DNA总提取量,同时还可以提高妊娠早期胎儿RHD血型预测准确率,为RHD血型不合导致新生儿溶血病早期诊断和治疗提供更好试验基础。

  • 标签: 免疫磁珠法 母体外周血DNA RHD血型
  • 简介:目的:研究武汉地区人群HPA-1-17基因多态性及其表达频率,建立HPA基因型资料库。方法:采用序列特异引物-聚合酶链反应(SSP-PCR)对284名健康已加入中华骨髓库血小板捐献者HPA基因进行分型,计算基因型频率、基因频率。结果:武汉地区健康血小板捐献者中检测出HPA-a基因中1a-17a基因;各基因独立分布频率中,HPA-1a(98.77%)、2a(97.01%)、3a(59.68%)、4a(99.82%)、5a(99.82%)、6a(98.42%)、15a(49.47%),HPA-7a-14a、16a和17a均为100%。仅检测出HPA-b基因中HPA-1b(1.23%)、2b(2.99%)、3b(40.32%)、4b(0.18%)、5b(0.18%)、6b(1.58%)、15b(50.53%),未检测出HPA-7b-14b、16b和17b。文中调查和分析了HPA基因组合型及其频率,发现武汉地区HPA基因有28种组合型,其中仅有3种基因组合型频率〉10%(44%),另外25种基因组合型频率均〈9%(56%)。在与国内外不同地区人群HPA基因多态性分布比较分析中发现,武汉地区人群中HPA基因频率与上海、成都地区人群没有差异性,与美国、英国、欧洲人群有较有明显差异,而与日本人群差异较小。结论:HPA-3、15系统具有多态性,在随机血小板输注中,供受者HPA-3、HPA-15系统不配合机会分别为36.54%、37.50%,HPA配合性输注关注重点。HPA基因多态性研究数据有利于指导地区性血小板供者库库容设计,配合临床开展选择适合性血小板输注具有重要意义。

  • 标签: 武汉地区 血小板 HPA 频率 多态性
  • 简介:目的:对细菌内毒素运用凝胶定性和动态浊度定量检查进行比较。为血站提供在原辅材料内毒素检测时更适合方法。方法:用鲎试剂凝胶定性分别做灵敏度复核、干扰试验、供试品检测,方法用药典规定生物制品细菌内毒素试验规程。动态浊度定量分别做标准曲线检验试剂灵敏度、回收率判断干扰试验、供试品检测,方法药典规定仪器试验。结果:动态浊度定量结果易保存,在临界状态下,更容易进行结果判断。结论:血站在进行细菌内毒素检测时,最好选用定量

  • 标签: 细菌内毒素 凝胶法 动态浊度法 鲎试剂
  • 简介:近年来,核酸检测技术在我国得到逐步推广和应用[1-4],并已成为血液筛查实验重要试验手段,但因其灵敏度高特点,同时实验也容易导致污染,笔者结合工作中实验污染发生和处理案例,探讨核酸实验污染监测和处理策略供大家参考。

  • 标签: 核酸检测 实验室污染 污染监测
  • 简介:目的:探讨微柱凝胶抗人球蛋白(MGT-AGT)替代Coombs试验检测IgG抗体敏感性和对临床患者血液标本直接抗人球蛋白试验(DAT)阳性检出率。方法:采用MGT-AGT对不同浓度DAT阳性标本或IgG抗D致敏红细胞及IgG游离抗D抗体进行实验比较,并用MGT-AGT、凝聚胺试验(MPT)和Coombs试验,对81例临床患者血液标本DAT阳性检出率进行了比较。结果:对于DAT阳性标本或IgG抗D致敏红细胞检测,MGT-AGT在1:128稀释时可以检出,MPT在1:32稀释时可以检出,Coombs试验在1:32稀释时可以检出。对于IgG游离抗D抗体检测,MGT-AGT在1:32稀释时可以检出,MPT在1:16稀释时可以检出,Coombs试验在1:16稀释时可以检出。对于81例临床患者血液标本DAT阳性检出率,MGT-AGT为:免疫性溶血性贫血患者87.8%,新生儿溶血病患者68.2%,系统性红斑狼疮患者55.5%;MPT分别为75.6%、54.5%和33.3%;Coombs试验分别为78.1%、54.5%和11.1%,MGT-AGT敏感性高于MPT和Coombs试验(P<0.01)。结论:MGT-AGT检测DAT阳性标本、IgG抗D致敏红细胞、IgG游离抗D抗体敏感性和对临床患者血液标本DAT阳性检出率均高于MPT和传统Coombs试验。

  • 标签: 微柱凝胶法 抗人球蛋白试验 IgG抗D抗体
  • 简介:目的:评价输血管理在ISO15189实验认可中作用。方法:回顾性分析中山市博爱医院检验科2008年1—12月输血情况。结果:2008年全院用血量5742人次,与去年同比增长23.1%。全血用量减少40%,冰冻血小板用量增长103.8%,血浆用量增长92.30%,悬浮红细胞增长19.10%。结论:加强临床用血监控,有助合理用血,有利于ISO15189实验认可。

  • 标签: 检验科 临床输血 ISO15189实验室认可
  • 简介:目的:比较微柱凝胶与试管法对母婴血型不合新生儿溶血病(HDN)免疫性抗体检出率。方法:对临床表现为高胆红素血症、疑似HDN患儿血标本同时用微柱凝胶和试管法进行直接抗人球蛋白试验、抗体游离试验及抗体放散试验,并对患儿阳性血标本进行血型不规则抗体特异鉴定及其效价测定。结果:在275例临床表现为高胆红素血症、疑似HDN患儿血标本中,用试管法检出直接抗人球蛋白试验阳性180例(65.5%),抗体游离试验阳性197例(71.6%),抗体放散试验阳性210例(76.4%);用微柱凝胶检出直接抗人球蛋白试验阳性224例(81.5%),抗体游离试验阳性238例(86.5%),抗体放散试验阳性251例(91.3%)。微柱凝胶比试管法凝集强度高1+~2+。结论:微柱凝胶敏感性略高于试管法,具有操作简便,影响因素少,易于标准化,结果客观及保存时间长优点。

  • 标签: 新生儿溶血病 微柱凝胶法 IGG抗体检测
  • 简介:目的:探讨用法国Sebia公司Capillarys2全自动毛细管电泳(CZE)对血红蛋白定性与定量分析准确性。方法:采集205例广东地区成人EDTA-K2抗凝血2ml,分别采用高效液相色谱(HPLC)和capillarys方法各自测定血红蛋白含量。结果:两种方法测定HbA2准确度,在205例样本中,CZE测定有93%测定结果与HPLC测定值百分差异在±20%范围内,与95%相比较,P值为0.1944,差异无统计学意义。其中CZE测得HbA2异常21例,HbF增高5例,HbA2+HbF同时增高12例;用HPLC对这205例样本进行复检对照,结果基本一致。检测出HbH7例,HbE7例,HbNewYork5例,HbG-thailand3例,HbBart's3例,HbS2例。但是,对于HbA2定量,用CZE测得水平高于HPLC。同时,我们观察到CZEHPLC对HbH和HbBart's检测更为敏感。结论:HPLC和CZE都能能够分离和量化出HbA2和HbF异常增高,一种快速、准确、可靠筛查地中海海贫血实验方法,但是两者在鉴定异常血红蛋白时存在区别。

  • 标签: 全自动毛细管电泳 HPLC 血红蛋白 贫血 地中海
  • 简介:目的:应用PCR-SSP对吉林省汉族人群人血小板同种抗原系统(HPA)1~6进行基因及其多态性分布特征研究。方法:用DNA试剂盒提取外周血标本中DNA,通过特异引物(PCR—SSP)扩增HPA等位基因。检测200名HPAl~6抗原系统共12个抗原基因分型。结果:200名无偿献血并无血缘关系吉林省汉族人群HPA基因频率为:HPA-1a0.9900、Ib0.0100;2a0.9300、2b0.0700;3a0.5575、3b0.4425;4a1.0000、4b0.0000;5a0.9900、5b0.0100;6a0.9875、6b0.0125。结论:吉林地区血小板志愿捐献者HPAl~6抗原系统基因频率符合Hardy-Weinberg遗传定律,与其他地区和国家同类资料相比显示出种族和地域性差异,由此建立起了吉林地区已知HPA基因型血小板捐献者资料库。

  • 标签: PCR-SSP法 人血小板同种抗原 基因频率
  • 简介:目的:使用全自动血型分析仪对批量无偿献血者标本进行血型检测,分析检测结果可靠性。方法:使用全自动血型分析仪对75765例标本进行血型检测,ABO正反定型不一致而无法定型、O细胞凝集标本由本站血型研究进一步用试管法进行正反定型、亚型检测、冷抗体及其它不规则抗体检测,并对RhD初筛为阴性标本进行RhD阴性确认和C、c、E、e抗原检测及不规则抗体筛查。结果:对75765例标本检测发现ABO正反定型不一致30例(0.04%),反定型中仅O细胞凝集8例(0.01%),RhD初筛为阴性348例(0.46%),血型研究进一步鉴定结果为亚型22例,冷凝集3例,抗-M6例,抗-Leb2例,其他未确定抗体5例;RhD确认阴性340例,RhD变异型8例。结论:全自动血型分析仪具有全自动化、标准化、网络化优点,适合大批量标本检测,检测结果可靠,可以满足血站实验工作需求。

  • 标签: 全自动 ABO/RhD血型 正反定型
  • 简介:目的:探讨红细胞抗原浓度对固相ABO血型正定型及Rh(D)血型鉴定影响。方法:随机选取健康成人O型Rh(D)阴性和AB型Rh(D)阳性个体各5例,采集静脉血3~5ml置于EDTA抗凝管中,将O型和AB型血液配制成不同高低浓度红细胞悬液,并用固相进行ABO血型正定型及Rh(D)血型鉴定,同时以10%浓度红细胞浓度作为对照参考,观察假阳性和假阴性出现情况及假性结果出现时红细胞抗原浓度。结果:红细胞抗原浓度超过25%易出现假阳性;红细胞抗原浓度低于2%易出现假阴性;低浓度红细胞抗原对抗B、抗D影响更明显;高浓度红细胞抗原对抗A影响更明显。结论:红细胞浓度对对固相ABO血型正定型及Rh(D)血型鉴定有影响,且高、低浓度对不同单克隆抗体结合抗原能力影响不尽相同。

  • 标签: 固相法 血型鉴定 红细胞浓度 单克隆抗体
  • 简介:目的:分析ELISA检测HIV抗体室内质控,总结失控原因,加强实验管理,保证检验结果准确可靠。方法:运用L-J质控图,结合Westgard多规则质控,进行室内质控及分析。结果:2013-01-2014-10共检测2033批次,其中警告57次,失控29次,分别占质控总数2.80%和1.42%。其中随机误差10次,系统误差19次,分别占质控总数0.49%和0.93%。22个RCV处于9.72%~22.85%,其中21个均处于20.00%以内,1次22.85%。结论:ELISA影响因素较多,要严格按照操作规程,加强室内质控,以保证检验结果准确性。

  • 标签: ELISA HIV抗体 室内质控 Westgard规则
  • 简介:目的:建立SYBRGreenⅠ实时荧光PCR定量检测人POT1基因方法。方法:依据人POT1基因及参照基因TBP基因序列设计引物,以人类乳腺癌细胞系MCF-7总RNA逆转录合成cDNA为模版,以TBP基因为参照基因,应用SYBRGreenⅠ实时荧光定量PCR检测POT1基因表达。结果:POT1和TBP基因熔解曲线为单峰,无杂峰及二聚体。POT1基因及参照基因TBP基因扩增效率相同(直线斜率0.0171〈0.1)。POT1基因批内变异与批间变异分别为1.3%和2.1%;TBP基因批内变异与批间变异分别为1.2%和2.6%。结论:建立了SYBRGreenⅠ实时定量检测人类POT1基因方法,该方法简单快速,经济,灵敏度高,特异和重复性好,可用于人类POT1基因定量分析。

  • 标签: POT1基因 相对定量 实时荧光定量PCR
  • 简介:临床检验水平关系到医疗质量,临床检验标准化和规范化管理目前我国医院亟待解决问题之一。为加强湖北省医疗机构临床实验标准化建设,湖北省临床检验中心根据省卫生厅制定标准,对81所临床实验标准化管理实施情况进行了调查考核,现将有关情况分析如下。

  • 标签: 实验室 标准化 管理
  • 简介:目的:了解Dombrock血型Do^a和Do^b基因在汉族人群中分布。方法:采用PCR—SSP技术对Dombrock血型进行Do^a和Do^b基因分型。结果:248例Dombrock血型Do^a基因频率为0.0867,Do^b基因频率为0.9133。结论:248例Dombrock血型Do^a及Do^b基因频率分别为0.0867和0.9133。PCR—SSP技术可以较好对Dombrock血型进行DO基因分型。

  • 标签: Dombrock Do^a Do^b 血型
  • 简介:目的:用全自动微孔代替传统方法检测梅毒抗体,并对改进进行对比分析和评价。方法:用全自动酶免分析仪与传统甲苯胺红卡片试验(TRUST)对比检测了75例梅毒患者和1061份献血员血清,不符合者用螺旋体血球凝集试验(TPHA)验证。对18000份献血员标本用改进方法检测,并与传统方法对比,用TPHA验证。结果:改进方法与传统方法相比,75例梅毒患者血清均呈阳性结果,但改进方法比传统凝集颗粒大均匀,更易判读。在1061份献血员血清中,用改进方法检出2份阳性血清,并经TPHA证实,用传统方法则判为可疑血清。用改进方法在18000份献血员血清中7份标本呈阳性,TPHA方法亦为阳性,传统方法3例呈阳性;2例可疑,2例阴性。结论:改进全自动微孔板比传统方法具有敏感性高、特异好、自动化程度高、易于标准化优点,适合献血员筛查和临床大批量梅毒患者标本检验

  • 标签: 梅毒抗体 检测 全自动 微孔板法
  • 简介:目的:建立并改良磁珠提取基因DNA方法,以应用于HLA常规测序分型。方法:使用磁珠自动提取系统从全血中提取基因组DNA,利用DNA定量仪测定DNA浓度与纯度,利用测序仪对PCR扩增产物进行测序及相关分析软件进行HLA分型结果分析。比较改良前后DNA浓度与纯度、HLA分型结果成功率、信噪比及测序胶图反应格局。结果:改良后96份DNA浓度均一性、纯度均优于改良前;32份HLA分型结果中HLA-A、B位点成功率改良后高于改良前,差异有统计学意义(P〈0.01);改良后32人份HLA-B第二外显子信噪比(N/S)合格率均高于改良前,差异有统计学意义(P〈0.01);改良后32份分型胶图反应格局均优于改良前。结论:改良磁珠提取DNA能稳定、可靠地应用于HLA测序分型,具有快速、高通量化特点和广泛应用前景。

  • 标签: 脱氧核糖核酸 标本 基因分型 测序分型
  • 简介:目的:本文旨在对行剖宫产术孕产妇进行容稀释性自体输血(ANH)初期研究基础上,探讨异体输血及ANH对行剖宫产术孕产妇免疫功能影响差异。方法:选择待进行剖宫产术分娩孕产妇50例,随机分为2组。ANH组(Ⅰ组):于麻醉后手术切皮前经桡动脉放血400~600ml,同时经静脉输入容量扩容液,产后或产程即将结束时将自体血回输。异体输血组(Ⅱ组):剖宫产术中据情况给予异体悬浮红细胞2~3单位。分别于产前、产后第1、5天抽取静脉血,用流式细胞仪测定外周血中自然杀伤细胞(NK)、巨噬细胞、IL系列因子、IgG、IgM、CD3+、CD4+、CD4+/CD8+变化情况。结果:12组产后1天CD3+、CD4+、CD4+/CD8+产前显著减少,其中Ⅱ组Ⅰ组减少更明显,NK细胞升高,P〈0.05。产后5天Ⅱ组CD3+、CD4+、CD4+/CD8+仍产前显著减少,Ⅰ组均基本恢复正常,且Ⅰ组CD3+、CD4+、高于Ⅱ组,P〈0.05。2产后1天IgA、lgG2组均减少,IL-6、IL-8、TNF-a2组均升高,差异有统计学意义(P〈0.05);产后5天Ⅰ组均基本恢复正常,Ⅱ组与产前相比,2组差异有统计学意义(P〈0.05);IgM2组变化不显著,差异无统计学意义(P〉0.05)。结论:12组产后1天CD3+、CD4+、CD4+/CD8+产前显著减少,其中Ⅱ组Ⅰ组减少更明显,NK细胞升高,P〈0.05。产后5天Ⅱ组CD3+、CD4+、CD4+/CD8+仍产前显著减少,Ⅰ组均基本恢复正常,且Ⅰ组CD3+、CD4+、高于Ⅱ组,P〈0.05。2产后1天IgA、lgG2组均减少,IL-6、IL-8、TNF-a2组均升高,差异有统计学意义(P〈0.05);产后5天Ⅰ组均基本恢复正常,Ⅱ组与产前相比,2组差异有统计学意义(P〈0.05);IgM2组变化不显著,差异无统计学意义(P〉0.05)。

  • 标签: 等容稀释 自体输血 孕产妇 免疫功能