简介:目的:建立一种快速、稳定、灵敏且可定量的检测马尔尼菲青霉病的SYBRGreenⅠ实时荧光定量PCR方法。方法:根据马尔尼菲青霉ITS序列,设计并合成引物,通过常规PCR扩增目标序列后,将鉴定正确的目的基因片段克隆入pGEM-T载体中,转化大肠杆菌JM109,经PCR及测序鉴定后得到阳性重组质粒,作为标准品模板建立SYBRGreenⅠ荧光定量PCR标准曲线和溶解曲线,得出拷贝数与循环阈值之间的线性关系曲线表达式,并做灵敏性、特异性试验。结果:荧光定量PCR标准曲线阈值与模板浓度呈良好的线性关系,溶解曲线特异,相关系数为1.938,最低检测的拷贝数为8.5个/反应管。结论:建立了检测马尔尼菲青霉病的SYBRGreenⅠ实时荧光定量PCR方法,为该病的早期诊断及定量分析感染程度及对治疗的指示作用奠定了良好的基础。
简介:目的:分析经阴道实时三维超声子宫输卵管造影(3D-HyCoSy)对输卵管通畅性的检查评价效果,为输卵管通畅性的准确评估提供新方法、新思路。方法:选取我院2015年1月至2016年1月收治的159例不孕症患者,运用经阴道实时3D-HyCoSy检查其输卵管通畅性,并与金标准腹腔镜通染液试验(CLP)检查结果进行比较,分析其图像质量及评价输卵管通畅性的灵敏度、特异性、准确性,并对两种检查方式费用、安全性等指标进行比较,探讨经阴道实时3D-HyCoSy的临床应用价值。结果:3D-HyCoSy图像中,110例(69.18%)图像质量优,32例(20.13%)图像质量良,优良率为89.31%(142/159),其余17例(10.69%)图像质量差,通过重复试验并结合二维实时监测亦可有效评价输卵管通畅性。经阴道实时3DHyCoSy检查后2d患者VAS评分为(3.25±1.26)分,显著低于CLP患者术后2dVAS评分(4.40±1.71)分,其检查总费用亦显著低于后者,差异有统计学意义(P〈0.05)。以CLP检查结果为标准,经阴道实时3DHyCoSy评价输卵管通畅性的灵敏度为83.02%,特异性为98.11%,准确率为93.08%,一致性检验Kappa值为0.762(P〈0.05)。结论:经阴道实时3D-HyCoSy具有安全、简便的优势,能够动态、立体明确输卵管结构、走行及阻塞部位,对输卵管通畅的评价具有积极意义,值得推广。