简介:1鸡群产生免疫抑制现象的原因1.1原发性免疫抑制病的存在当前,规模化鸡场虽然都非常重视病毒病的免疫预防,但传染性法氏囊炎、禽流感、马立克氏病、白血病、传染性贫血、呼肠孤病毒病、网状内皮组织增生症等仍然存在,严重影响着机体免疫系统,成为多种疾病继发感染、影响生产性能和经济效益的重要因素。当这些疾病中的许多种病原体感染鸡群后。可能就会引起免疫抑制。例如,法氏囊炎主要侵害免疫器官法氏囊:禽流感对机体的侵害更为严重,它不仅仅损害法氏囊,而且对胸腺、胰腺、扁桃体、盲肠等全身免疫器官造成破坏,甚至连骨髓的造血功能也被损害。
简介:采用平板稀释法,用MRS和M17培养基从鸡的新鲜粪便中分离出7株菌,进一步初筛得到3株对普通大肠杆菌有抑制作用的菌株,且他们的菌落是圆形稍扁平的黄色菌落,周围培养基变为黄色,根据这些特征初步将其定为乳酸菌。观察发现其中编号为1,5,7的LB平板上的圆形滤纸片周围有抑菌圈,初步筛选出1,5,7号菌,保留有抑菌活性的1号,5号,7号菌株。各菌的抑菌圈直径分别为:1号:11mm;5号:13mm;7号:10mm。进一步用弱毒型大肠杆菌作为实验菌复筛得到对弱毒型大肠杆菌抑菌圈直径最大的菌株为5号菌株。糖发酵实验,吲哚实验,伏—普实验,甲基红实验进一步验证其为乳酸菌,显微镜下观察有杆状和链球状两种菌株。乳酸菌产生益菌素对革兰氏阴性的大肠杆菌有抑制作用,其中对革兰氏阴性菌的抑制作用为近年来新发现,所以尤其受关注。
简介:试验旨在构建表达鸡新城疫病毒(NDV)HN基因的大肠杆菌原核表达栽体。以pMD18-T—HN为模板,通过设计的特异性引物PCR扩增出(NDV)HN基因片段,连接至pMD-18T载体,通过双酶切定向插入原核表达载体pET32a中,转化到感受态细胞Rosetta中,获得表达HN基因的阳性亚克隆重组质粒,用lmmol/LIPTG诱导表达,并对表达产物进行鉴定。SDS—PAGE电泳结果显示,HN基因片段在大肠杆菌Rosetta细胞中实现融合表达,表达产物大小约为90KD左右,western—blotting试验证实其有较好的反应原性。本研究为进一步研究HN蛋白功能结构域的免疫原性和研制鸡新城疫HN基因工程疫苗奠定了基础。
简介:为了研制新型细胞因子制剂,将鸡白细胞介素18(ChIL-18)基因和鸡α-干扰素(ChIFN-α)基因通过多肽氨基酸接头(Linker)连接在一起构成mChIL-18/mChIFN-α融合蛋白基因,并构建原核重组表达载体,以期表达具有生物学活性的融合蛋白。以mChIL-18cDNA与mChIFN—αDNA为模板,通过PCR及PCR重叠延伸技术(SOE)得到mChIL-18/mChIFN-α融合DNA。将回收的DNA克隆于pGEM—TEasy载体,并对其进行了测序。测序结果表明获得了阅读框完整、连接部位正确的mChIL-18/mChIFN—α融合分子DNA。将所克隆的目的片断亚克隆到原核表达载体pQE30,构建重组质粒pQE30-mChIL-18/mChIFN-α。pQE30-mChIL-18/mChIFN—α的成功构建为研制开发新一代的多功能、多靶点的细胞因子制剂奠定了基础。