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61 个结果
  • 简介:木糖还原酶是酵母代谢木糖发酵的关键酶之一。根据已报道的木糖还原酶基因的全序列设计引物,从休哈塔假丝酵母中克隆得到1110bp大小的片段。将木糖还原酶基因亚克隆到酿酒酵母的整合表达载体p406ADH1中,醋酸锂转化法将线性化重组质粒pYX-AK-xyl1转化到酿酒酵母W5,对阳性转化子进行酶活测定,结果表明,以辅酶DANH和NADPH为底物诱导,转化子均表现出活性,酶活分别为6.513U/mg和7.080U/mg,是受体菌W5酶活的1.4倍(NADH)和1.3倍(NADPH),其酶活比为0.919。

  • 标签: 休哈塔假丝酵母 木糖还原酶 重组酿酒酵母
  • 简介:为探究荧光素酶编码基因表达产物发光特性,以青海弧菌基因组为模版扩增得到luxCDABE基因,构建表达载体pHSG396-luxCDABE。将载体导入大肠杆菌Top10,成功获得表达菌株Top10/pHSG396-luxCDABE(T-pluxCDABE),测定重组菌株的表达活性,与实验室构建的菌株Top10/pHSG396-luxAB(T-pluxAB)发光情况进行比较。

  • 标签: 青海弧菌 LUXCDABE 克隆 表达
  • 简介:生物发光标记以其可视化,便捷,快速,灵敏,可用于活体研究等诸多优点越来越多地应用于科学研究中。本研究通过CaCl2方法将实验室构建的带有青海弧菌荧光素酶基因luxAB的重组质粒导入大肠杆菌Top10中,利用酶切和核酸电泳检测荧光素酶基因的存在,利用SDS-PAGE检测荧光素酶表达的情况,然后对其表达条件进行优化。单因素试验结果表明:在培养基初始pH值6.0,癸醛体积分数1.25‰,接种量1%,IPTG浓度0.1mmol/L,装液量50mL/150mL,温度37℃条件下,重组菌的发光度最大,即表达量最高。正交试验结果表明:当pH6,IPTG浓度0.08mmol/L,接种量1.2%,温度36℃时重组大肠杆菌表达情况最好,发光度达1262.7。本研究中的重组大肠杆菌为在益生菌等食品微生物中的应用提供技术依据。

  • 标签: 青海弧菌 荧光素酶 优化 生物发光
  • 简介:以罗伊氏乳杆菌基因组DNA为模板,采用PCR技术克隆获得果聚糖蔗糖酶基因lev。生物信息学分析表明:该基因全长1776bp,编码一个含591个氨基酸残基的多肽。该多肽的预测分子质量为65.47ku,等电点为4.74,二级结构主要有α-螺旋、β-转角、延伸链和无规则卷曲组成。克隆所得的lev基因与GenBank注册的罗伊氏乳杆菌lev基因(注册号:EF534264.1)的核苷酸序列同源为97.97%。本研究所得lev基因经构建表达载体在大肠杆菌BL21中表达,重组酶具有果聚糖蔗糖酶的活性。

  • 标签: 果聚糖蔗糖酶 基因克隆 序列分析 原核表达
  • 简介:以分离筛选、鉴定的假单胞菌为研究材料,提取假单胞菌的基因组为模板基因.设计引物进行PCR扩增。扩增的条件为94℃预变性4min,98℃变性10S,58℃退火1min,72℃延伸2min,35个循环,72℃复性10min。用试剂盒回收PCR产物,以PGEM—TEasyVector为载体。产生重组质粒,转化到大肠杆菌(E’coli)JM109细胞中,于LB平板上进行蓝白筛选阳性克隆。提取阳性克隆的质粒,电泳筛选滞后质粒,EcoRⅠ酶切验证后进行测序,检测弹性蛋白酶基因在JM109Ecoli细胞中的表达。结果表明:PCR扩增出1,67kh的基因片段。并成功克隆在EcoliJM109细胞中:挑取白斑提取的质粒,检测有滞后质粒,EcoRⅠ酶切检测到3.0kh的载体和1,67kb的基因片段;以滞后质粒为模板再次进行PCR扩增,扩增出1.67kb基因片段。证明该质粒为重组质粒,经上海博亚生物技术公司测序为1.67kh的基因片段。并在EcoliJM109细胞中表达

  • 标签: 胞外弹性蛋白酶 基因克隆 表达
  • 简介:目的:构建高产转谷氨酰胺酶且具有活性的基因工程菌。方法:以茂原链霉菌总DNA为模板,利用PCR技术扩增目的基因,构建重组质粒pET-22b-MTG,使其在大肠杆菌中得到高效表达并优化表达时间和温度。结果:成功构建产转谷氨酰胺酶的基因工程菌,酶活为15.9U/mL,最优表达时间5h,温度25℃。结论:成功构建TG基因工程菌,TG基因在大肠杆菌中得到高效表达,为后续试验提供原材料,为微生物发酵生产TG打下基础。

  • 标签: 转谷氨酰胺酶 大肠杆菌 表达 改性 大豆分离蛋白
  • 简介:乳铁蛋白作为一种活性蛋白,在功能营养食品及医药等方面具有广阔的应用前景。但很久以来,如何获得廉价的人乳铁蛋白一直是开发乳铁蛋白遇到的最大难题,而利用基因工程技术生产重组蛋白给乳铁蛋白的开发利用提供了可行途径,这也是乳铁蛋白研究的发展趋势。随着基因工程技术和遗传学的迅速发展,以及人们对乳铁蛋白基因及其表达调控机制深人了解,重组生产将成为的人乳铁蛋白来源的主要渠道。

  • 标签: 乳铁蛋白基因 基因工程技术 人乳铁蛋白 真菌 乳品 三元
  • 简介:国标方法检测面粉灰分以坩埚做载体,基本步骤为:坩埚预处理→坩埚第一次称量→称样于坩埚内→样品炭化→样品灰化→坩埚冷却后第二次称量→灰分数值计算,坩埚两次称量的差即样品灰分质量,可见坩埚称量的准确是影响灰分检测准确的关键因素。因坩埚需要在高温炉、干燥器、天平、电热板等多个仪器和设备上转移,容易造成操作误差,本人从各操作细节分析影响灰分检测准确和及时的因素。

  • 标签: 面粉 灰分 准确 及时 坩埚
  • 简介:为分析菌株的脂肪酸构成与胆盐耐受能力的关系,本文对8株分离自发酵乳制品的植物乳杆菌展开研究。以菌体在含有0.3%胆盐的MRS肉汤培养基中的对数存活率作为其胆盐耐受能力评价的指标,并通过气相色谱法分析各菌株的脂肪酸构成。Pearson相关分析表明,菌体中棕榈酸(C16:0)和19碳环丙烷脂肪酸(cycC19:0)含量与其胆盐耐受能力呈显著正相关(P〈0.05),而豆蔻酸(C14:0)和油酸(C18:1)含量与菌体胆盐耐受能力呈显著负相关(P〈0.05)。细胞完整评价表明:胆盐敏感型菌株在胆盐环境中具有较弱的细胞完整,而这一指标受脂肪酸构成影响。本研究结果表明:特定脂肪酸对天然来源的菌体而言,在胆盐环境中维持细胞完整和提高胆盐耐受方面扮演着重要角色。

  • 标签: 脂肪酸构成 胆盐耐受 植物乳杆菌 细胞完整性
  • 简介:利用网路检索NCBI有关植物机能成分的文献,最近在实验动物的研究动向方面,依照文献的多寡排列是:类胡萝卜素、辣椒素、异硫氰酸盐、金雀异黄素(genistein)、皂素(saponin)、槲皮酮(quercetin)、白藜芦醇。从论文研究的领域来看,生理学及药理学领域各2000篇以上,营养学领域157篇。探讨的项目以肿瘤、癌症、脑神经系统最多,有500篇以上,远比血管系统、免疫系统、骨骼代谢项目多,主要是期待植物机能成分,能用于疾病治疗、预防、维持健康及新药开发。

  • 标签: 机能性成分 植物 类胡萝卜素 异硫氰酸盐 金雀异黄素 脑神经系统
  • 简介:最近,菲律宾一家公司科研人员利用椰子油研制开发出具有特殊脂肪合成品、风味香精酯化合物和抗菌剂三种功能新产品。特殊脂肪合成品是将椰子油经过脂肪酶作用水解后生成的低热量的中碳

  • 标签: 功能性添加剂 低热量 风味 成品 酶作用 新产品
  • 简介:红薯又称甘薯,番薯、山药等,在我国大多省份普遍栽培。红薯叶作为红薯的副产品,我国年产1t以上,它富含糖、淀粉、蛋白质、氨基酸、VC、矿物质、黄酮、类胡萝卜素等许多活性成分,目前红薯叶一部分用作禽畜饲料,但大部分被丢弃,利用率很低。如果利用现代高新技术把红薯叶加工成功能食品,则能使红薯叶得到更好的利用,取得较高的经济效益。

  • 标签: 红薯叶 功能性饮料 工艺流程 灭菌
  • 简介:近日,日本安全委员会进行了食品对健康的影响的风险评估,其中问题比较集中的是食品中的化学物质。如,农药残留、食品添加剂、兽药残留等,但也不排除来自自然界的毒素。化学物质的风险,最基本的是剂量和毒性强弱的相互作用。

  • 标签: 食品添加剂 化学物质 安全性分析 日本 风险评估 安全委员会
  • 简介:最近酒业新三板很火,我电想提几点看法,主要是酒企新三板提高市值的建议。要想提高市值,我们首先要理清酒企为什么要上新三板。我认为新三板对酒企至少有四方面的价值:第一是新三板是对酒企的公信力和品牌背书,第二是新三板经营管理规范化给投资人、公众的信任感,第三是新三板能将财务报表外资产证券化,第四是新三板可以融资。

  • 标签: 快速复制 管理规范化 资产证券化 财务报表 酒业
  • 简介:分析了全麦粉应用的局限性及主要原凶,综述了全麦粉品质改良的技术进展,介绍了微波在粮油食品加工中的应用,分析了微波辐照改善全麦粉食用品质的可行

  • 标签: 微波 全麦粉 食用品质