简介:目的建立多重PCR方法检测青霉素酶基因和mecA基因,了解食源性金黄色葡萄球菌两种β-内酰胺类药物耐药基因的分布情况,为金黄色葡萄球菌引起食源性疾病的防治提供参考数据。方法建立多重PCR技术检测金黄色葡萄球菌青霉素酶基因、mecA基因和16SrDNA;多重PCR方法测定食品来源的171株金黄色葡萄球菌对青霉素类药物的耐药基因型。结果165株菌携带有青霉素酶基因(96.5%),9株菌携带有mecA基因(5.3%)。结论建立的多重PCR检测方法快速、简便、准确,可满足高通量筛选菌株的需求;食源性金黄色葡萄球菌具有很高的青霉素酶基因携带率,并存在耐甲氧西林的菌株。
简介:本研究报道了以紫外诱变结合化学诱变方法选育一株高产色素低产桔霉素的红曲菌种.通过平板分离的方法从红曲米中分离红曲菌种,挑选出一株产色价较高,产桔霉素较低的菌种CG009;以CG009为出发菌种进行紫外诱变,使用紫外线照射孢子悬液90s,而后进行分离筛选得到一株突变株CG009-UV-1,其产桔霉素比出发菌株降低了87.7%,而色价基本没有太大的变化;以CG009-UV-1为出发菌株进一步使用硫酸二乙酯诱变,采用5%浓度的硫酸二乙酯处理CG009-UV-1的孢子悬液,经分离筛选得到一株突变株CG009-UV-D-9,与出发菌株CG009相比桔霉素降低93.3%,与CG009-UV-1相比桔霉素降低45.2%,产色素能力未降低.对筛选到的菌种CG009-UV-D-9进行遗传稳定性试验,检测其产色素和桔霉素情况.结果显示:经过10次传代实验,所产红曲米色价基本稳定在5000u左右,桔霉素含量均低于1mg/kg,与原始菌种相比较桔霉素含量降低了90%以上.
简介:
简介:目的建立不同水源中GⅡ型诺如病毒(NoVGⅡ)实时荧光逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测方法,对某市疾病预防控制中心送检的10份疑似引起诺如病毒中毒的水样进行NoVGⅡ检测。方法以瓶装水、河水和生活污水为研究对象,采用硝酸纤维素膜-聚乙二醇(PEG)沉淀法富集病毒,对取样体积、病毒洗脱条件、PEG终浓度及PEG沉淀条件等进行了优化,提取病毒RNA、建立实时荧光RT-PCR检测方法;通过外加MS2计算方法的回收率,评价所建方法对水样中诺如病毒的回收效果。结果建立的方法对瓶装水、河水和生活污水中NoVGⅡ的平均回收率分别为(60.1±8.0)%、(22.0±6.5)%和(35.7±8.1)%,10份送检水样中3份检出NoVGⅡ。结论建立的实时荧光RT-PCR方法适用于瓶装水、河水和生活污水中NoVGⅡ的检测,饮用水被NoVGⅡ是引发某市人员中毒的原因之一。