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5 个结果
  • 简介:应用DNA重组技术,构建了金黄色葡萄球菌肠毒素B(SEB)的原核表达载体pET22b(+)-SEB,在大肠杆菌BL21(DE3)中进行表达。经终浓度为0.4mmol/LIPTG的诱导作用,可获得分子量约为29KD的表达蛋白。SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析结果表明,重组表达的SEB主要以可溶的形式存在于细胞周质中,表达SEB的量约占菌体总蛋白的30%左右。重组表达的SEB经HiTrap^TMchelatingHP柱纯化能达到SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳纯。ELISA试验表明纯化的重组SEB与抗天然野生型SEB单克隆抗体呈现明显的阳性免疫反应。

  • 标签: SEB 重组表达 金黄色葡萄球菌肠毒素B SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 ELISA试验 ET
  • 简介:为满足科研和医学应用上的需要,用基因工程的方法制备海蛇神经毒素。首先人工合成海蛇神经毒素Erabutoxin(Eb)的基因,重组到T载体。通过PCR扩增Eb基因,用限制性内切酶把基因片段酶切成黏性末端,然后将目标基因插入表达载体pPET22b(+),电转重组质粒到宿主菌BL21(DE3),在25℃0.5mmol/LIPTG诱导培养8h收获培养物,SDS-PAGE电泳检测目标蛋白大部分存在于包涵体中,用8mol/L尿素溶解后,利用C末端的His-6与Ni^2+离子亲和层析纯化,得到单一的电泳蛋白带。

  • 标签: 海蛇神经毒素 DNA克隆 基因表达 包涵体 亲和层析
  • 简介:用化学方法合成随机DNA库,应用SELEX技术筛选能与苏云金芽孢杆菌(Bt)结合的DNA适配子,经过12轮的筛选后,适配子与Bt结合的亲和力达到饱和。在克隆获得的18个适配子序列中,有3个适配子具有较高的亲和力,其中多数具有典型的三茎环结构。

  • 标签: 适配子 苏云金芽胞杆菌(Bt) SELEX技术
  • 简介:Crucialtolow-leveldetectionofbiowarfareagentsinaqueousenvironmentsisthemasssensitivityoptimizationofLove-waveacousticsensors.Thepresentworkisanexperimentalstudyof36(supo)YXcutLiTaO(sub3)basedLove-wavedevicesfordetectionofpathogenicsporesinaqueousconditions.

  • 标签: 勒夫波生物传感器 炭疽杆菌 生物薄膜 波导技术