简介：摘要目的探讨重组抗人表皮生长因子受体2(human epidermal growth factor receptor 2，Her2)单克隆抗体(单抗)的酸碱电荷异质体对其生物活性和亲和力的影响。方法分别用过氧化氢、肽-N-糖苷酶F、羧肽酶B对抗Her2单抗进行氧化、脱糖、酶切处理。用阳离子交换高效液相色谱法和毛细管等电聚焦电泳分析抗Her2单抗的电荷异质体，使用微量差示扫描荧光法分析抗Her2单抗的热稳定性，用细胞增殖抑制法和表面等离激元共振技术分析抗Her2单抗的亲和力。结果脱糖处理抗Her2单抗的酸性电荷异质体增加了5.58%，与免疫球蛋白G Fc受体1(high affinity immunoglobulin gamma Fc receptor Ⅰ，FcGR1A)的亲和力明显减弱，亲和力常数为9.032×10-8 mol/L。氧化和酶切处理抗Her2单抗的热稳定性降低，去折叠温度分别为63.6和59.5 ℃，均低于未处理抗Her2单抗(66.7 ℃)。结论3种处理均会使抗Her2单抗产生电荷异质性，脱糖处理抗Her2单抗与FcGR1A的亲和力减弱，氧化和酶切处理抗Her2单抗的热稳定性降低。

简介：目的研究新型NRG1依赖性HER3单克隆抗体对HER2过表达N87胃癌细胞Lapatinib耐药的逆转作用。方法HER2过度表达N87细胞接受不同浓度Lapatinib和/或NRG1依赖HER3单克隆抗体（3D4B3）处理后,利用CellTiter96Aqueous单溶液细胞增殖检测试剂盒检测细胞活力,利用BrdU掺入法检测细胞的增殖与凋亡。结果无NRG1刺激,Lapatinib对HER2过表达N87细胞增殖有显著抑制作用,而3D4B3几乎无抑制作用,联合应用无叠加效应。随着NRG1刺激和HER3的激活,Lapatinib的增殖抑制效应明显减弱或消失,Lapatinib联合3D4B3再次有效抑制N87细胞的增殖。结论3D4B3可能通过抑制HER2过表达N87胃癌细胞增殖部分逆转Lapatinib的耐药。

简介：目的:制备针对人釉原蛋白的单克隆抗体,并对其免疫学特性进行鉴定。方法:用原核表达系统表达纯化的重组人全长釉原蛋白免疫BALB/c小鼠,利用杂交瘤技术融合免疫后小鼠脾细胞和小鼠骨髓瘤SP2/0细胞,采用有限稀释法和间接酶联免疫吸附测定法筛选出能够稳定分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞株。小鼠体内诱导制备腹水,通过饱和硫酸铵沉淀法和蛋白G亲和层析柱纯化抗体。结果:筛选到3株能稳定分泌抗人釉原蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株,分别命名为H10G1、H3G1、G5H3。腹水单克隆抗体效价分别为1∶243000、1∶729000、1∶729000,纯化后单克隆抗体效价为1∶81000、1∶243000、1∶729000。3株单克隆抗体抗原表位分析显示均识别人釉原蛋白45~149位的氨基酸序列。结论:成功制备出针对人釉原蛋白的特异性单克隆抗体,为进一步研究探讨釉原蛋白在牙根发育及牙周再生中的功能奠定了基础。

简介：摘要目的评价从噬菌体库筛选获得的1株抗狂犬病病毒单克隆抗体的基本特征。方法从抗狂犬病病毒噬菌体库中筛选获得1个阳性克隆，扩增获得其抗体轻重链可变区，构建全分子抗体的表达质粒后在HEK293 EBNA1细胞中瞬时表达，亲和纯化后对该抗体进行体外抗狂犬病病毒中和活性、中和指数、逃逸株测序、差示扫描荧光法热稳定性分析，并与数据库中街毒株糖蛋白比对关键氨基酸位点。结果该抗体体外抗狂犬病病毒中和活性为691IU/mg；该抗体对狂犬病病毒CVS-11和CTN株的中和指数分别为8.52和7.05；CVS-11逃逸株糖蛋白测序分析表明，该抗体针对的关键氨基酸主要为N37 K、N194 K和K205 N。与1 338株狂犬病病毒街毒株糖蛋白基因比对表明，37、194和205位上仅有1个街毒株在194位上与突变逃逸株氨基酸类型相同。该抗体Tm值为70.58±0.31 ℃。结论获得1株高中和指数的全分子人源抗狂犬病病毒中和抗体，该抗体具有较好的热稳定性。

简介：目的建立人源性抗肝癌单克隆抗体细胞株，探讨其特异性。方法用IL-2和美洲商陆（PWM）体外刺激肝癌患者外周血淋巴细胞，再与小鼠骨髓瘤细胞NS-1融合，获得3株人源性抗肝癌单克隆抗体AF3，CB7，CH1，同时进行免疫组化及细胞免疫化学研究。结果3株人源性抗肝癌单克隆抗体AF3，CB7，CH1，可以和肝癌组织发生强阳性反应，和胃癌有微弱阳性反应，和其他3种癌组织无反应，3株单抗均能和肝癌QGY-7703细胞呈强阳性反应，与胃癌细胞有微弱阳性反应，与其他3种癌细胞反应为阴性。结论通过人-鼠杂交瘤技术获得了3株能分泌人源性抗肝癌单克隆抗体杂交瘤细胞株，免疫组化与细胞免疫化学证实该单抗具有较好的特异性。

简介：摘要CD20是一种特异性、高表达在正常B淋巴细胞和恶性B淋巴细胞的表面标识，是治疗B细胞相关性疾病理想的靶点。近年来对其研究不断深入，有多个抗CD20分子的单克隆抗体用于B细胞非霍启金淋巴瘤（NHL）及其相关疾病的治疗，取得了明显的疗效。本文综述CD20单抗研究的主要药物及其进展，探讨其未来的发展前景。

简介：摘要目的建立一种检测重组抗IgE单克隆抗体(单抗)轻链互补决定区中天冬氨酸异构化程度的疏水作用层析(hydrophobic interaction chromatography, HIC)方法。方法采用木瓜蛋白酶酶切抗IgE单抗，产生抗原结合片段和可结晶片段作为HIC方法的样品。筛选不同品牌及官能团的色谱柱，优化流动相的组成及洗脱梯度，研究样品于5 ℃和-20 ℃条件下的稳定性；同时用强制破坏的方式考察该方法的稳定性检测能力。并对该方法的专属性、精密度、线性和准确度进行验证。结果采用TSKgel Butyl-NPR色谱柱、流动相甘油含量为5%时，色谱图的分离度较好。样品在进样器(5 ℃)中放置24 h或在-20 ℃中放置48 h可保持稳定。该方法能检出强制破坏样品的各成分含量随时间的变化，且专属性良好，重复性及中间精密度均符合规定，抗原结合片段各峰的线性决定系数均≥0.990且准确度均在90%～110%。结论建立的HIC方法可有效分析单抗制品天冬氨酸异构化程度。

简介：摘要目的制备抗汉城病毒(Seoul virus，SEOV)荧光单克隆抗体(单抗)，并初步应用于Ⅱ型肾综合征出血热灭活疫苗原液的病毒灭活验证。方法以SEOV L-99株灭活病毒原液为免疫原，采用小鼠杂交瘤细胞融合技术，筛选抗SEOV特异性单抗杂交瘤；小鼠体内诱生法制备单抗腹水，蛋白A亲和层析纯化单抗，并以蛋白质印迹法鉴定其特异性；间接ELISA测定单抗效价和相对亲和力；纯化单抗采用搅拌法标记异硫氰酸荧光素，并分别采用直接免疫荧光法与小鼠脑内接种法对Ⅱ型肾综合征出血热灭活疫苗原液进行病毒灭活验证。结果共筛选出4株特异性抗SEOV L-99株杂交瘤1D5、2E3、3A4及5B7。蛋白质印迹法鉴定4株单抗均与SEOV L-99株核衣壳蛋白发生特异性反应；间接ELISA测定腹水效价为3.13×10－8~1.25×10－7；相对亲和力顺序为1D5>3A4>2E3>5B7；纯化抗体纯度>95%；异硫氰酸荧光素标记1D5株单抗的结合比率为3.4；直接免疫荧光法与小鼠脑内接种法检测盲传3代的Ⅱ型肾综合征出血热灭活疫苗原液，病毒灭活验证结果一致。结论成功筛选到高效价特异性抗SEOV单抗，并制备成荧光单抗，可用于Ⅱ型肾综合征出血热灭活疫苗生产工艺中的病毒灭活验证。

简介：制备抗青霉素的单克隆抗体(mAb)并建立双抗体夹心ELISA检测方法,用建立的ELISA方法分别检测制备的完全抗原及100倍浓度的BSA、 OA,并建立了相对定量检测青霉噻唑蛋白的双抗体夹心ELISA法

简介：摘要：现阶段，国内企业（含外企）单克隆抗体（以下简称“单抗”）药物生产设备主要有传统型生产设备和一次性抛弃型生产设备两种。通过项目设计实例，结合中国GMP（2010修订版）的要求，就一次性抛弃型生产设备的车间布局设计进行探讨与分析。

简介：目的探讨单克隆抗体的预防性诱导治疗能否提高肾移植术后1年内的人、肾存活率。方法以1996年10月～2004年12月进行的同种异体肾移植并且术后使用单克隆抗体（OKT3）的153例尿毒症患者为研究对象。所有患者均于术后6h内预防使用OKT3，每日5mg。其中111例术后5～10d内未发生排斥反应，使用OKT325～50mg，作为预防性诱导治疗。其后改为环孢霉素（CsA）、强地松（P）、硫唑嘌呤（AZA）或霉酚酸酯（MMF）维持治疗。另外40例在5d内因出现排斥反应的征像：T淋巴细胞亚群CD4／CD8〉1．5，同位素肾血流图和同位素肾胶体显相及彩色超声均提示排斥反应，使用OKT3总量60～100mg。确诊排斥反应的当日及第二日使用OKT3每日10mg。使用OKT3的总量根据临床症状是否缓解及CD4／CD8〈0．5或比值倒置而停药。结果2例术后24h内出现经病理证实的超急性排斥反应，切除移植肾。发生急性排斥反应的40例均逆转。151例人、肾存活的随访时间均达1年，只有12例（7．9％）因再排斥而住院治疗。结论肾移植术后应用OKT。作为诱导性治疗，预防急性排斥反应效果良好。肾移植术后即便用OKT3作诱导性治疗，急性排斥反应的发生率仍达36％（40／111）。但急性排斥反应的程度较轻，且可完全被加量的OKT3逆转。OKT3不能预防超急性排斥反应。另外本文也对OKT3常见的副作用进行了总结，提出了一些预防和治疗的措施。

简介：摘要CD22是特异性表达于B淋巴细胞上的Ⅰ型跨膜糖蛋白，为免疫球蛋白超家族中唾液酸黏附素家族成员，其作为抑制性辅助受体在B细胞的调节与体液免疫中发挥重要作用。自身免疫病是由自身免疫失调所致，B细胞异常激活以及致病性自身抗体的生成是自身免疫病的重要特征之一。通过抗CD22单克隆抗体治疗B细胞异常增殖活化介导为主的自身免疫病，如系统性红斑狼疮和类风湿关节炎等已引起关注。此文就CD22的分子特征、功能以及靶向CD22治疗自身免疫相关性疾病的研究进展进行综述。

简介：转化生长因子β诱导蛋白（transforminggrowthfactor-β-inducedprotein,TGFBIp）是一个多功能细胞外基质分子,在细胞黏附、迁移、增殖、分化中起十分重要作用[1,2]。近期KimHJ等[3]及RowleyJW等[4]研究显示，TGFBIp可作为一种血小板来源蛋白，在血小板活化、促进血栓形成中发挥重要作用。因此，制备抗TGFBIp单克隆抗体将更好地理解血小板活化及血栓形成，为发展新的抗血栓治疗提供有价值的手段。1材料与方法1．1材料与动物1．1．1主要试剂

简介：摘要乌司奴单克隆抗体（UST）和维得利珠单克隆抗体（VDZ）在中国已经上市1年余，初始对药物治疗应答的患者在后续继续治疗的过程中均可能存在失应答的情况，如何进行有效、规范的针对性处理成为临床工作者面临的重要问题。由于这两种药物的作用机制、剂型、使用方法及免疫原性均与既往药物不尽相同，故针对其失应答的应对策略也应作出改变。本文结合近年来国内外发表的与UST及VDZ相关的循证医学证据来探讨这两种新型生物制剂失应答的发生情况及应对策略。

简介：摘要靶向治疗具有高特异性和低毒性，是人表皮生长因子受体2（HER2）阳性乳腺癌重要治疗手段，能延长HER2阳性早期乳腺癌患者的无病生存时间和总生存时间，明显延长HER2阳性晚期乳腺癌患者的无进展生存时间和总生存时间。但靶向药物也可阻断靶器官外正常信号通路，部分患者出现治疗相关不良反应，导致剂量降低、治疗延迟和中断，甚至危及患者生命。不良反应中心脏毒性是靶向HER2药物潜在的严重不良反应之一。目前应用于HER2阳性乳腺癌临床治疗的靶向药物有大分子单克隆抗体类药物（如曲妥珠单抗、帕妥珠单抗）、抗体-药物偶联物（如T-DM1、T-DXd）以及小分子酪氨酸激酶抑制剂等。文章就包括抗体-药物偶联物的单克隆抗体类药物的HER2靶向药物在乳腺癌靶向治疗中的心脏毒性进行综述，为临床用药提供参考。

简介：摘要单克隆抗体（单抗）药物属于蛋白质类药物，具有相对分子质量大、极性强和跨膜受限等特点，药物代谢动力学有一定的特殊性和复杂性，临床应用中存在治疗效果个体差异大、生物效应多样和治疗响应丢失等问题。影响单抗药物血药浓度的因素包括靶部位受体数量、抗药物抗体水平、药物间相互作用等。早期开展治疗药物监测有助于及时调整单抗药物给药剂量，提高疗效，避免或减少不良反应的发生。应积极开展药物临床监测，提高单抗药物合理用药水平和不良反应预警能力，减少对患者的伤害。

简介：摘要免疫出生错误（IEI）这一概念是2017年由国际免疫学会联合会提出并用来替代原发性免疫缺陷病。IEI作为一大类先天性免疫功能异常疾病的统称，临床表现多样，治疗手段复杂，预后相对不良。抗CD20单克隆抗体是一类抗CD20抗体，已有3代共5种投入临床，在IEI相关肿瘤性疾病、自身免疫性疾病及淋巴增殖性疾病中有部分应用，本文讨论抗CD20单克隆抗体及其在IEI中的应用，尤其是利妥昔单抗在其疾病治疗中的应用进展。

简介：目的比较不同厂家单克隆抗体检测封闭抗体的结果差异。方法使用BD公司及贝克曼-库尔特（BC）公司的复合CD4/CD8/CD3三色荧光抗体,对30例反复自然流产（Recurrentspontaneousabortion,RSA）患者进行流式细胞术封闭抗体（Blockingantibody,BA）检测,用kappa系数评价两种抗体检测结果的一致性,用McNemar检验比较两种抗体的差异及其对临床决策的影响。结果经McNemar检验,当以BA单项阴性为需要接受主动免疫治疗的标准,则两组差异有统计学意义（P〈0.05）;若以BA双项阴性为需要治疗的标准,则两组差异无统计学意义（P〉0.05）;两种抗体检测结果一致性较差,kappa系数=0.2。结论两种单克隆抗体检测封闭抗体的结果存在差异,实验室应明确使用抗体的厂家,尤其是对同一患者治疗前后检测封闭抗体变化时应使用相同厂家的抗体。

简介：其中HNL1和HNL5用免疫组化检测对鼻咽癌组织反应的阳性率分别为60.0%和65.0%,抗体总例数阳性数(%)-+++HNL12012(60.0)875HNL52013(65.0)7103,附图　单克隆抗体HNL1(A)和HNL5(B)对鼻咽癌细胞珠(HNE2)的免疫组化染色(×400)

简介：摘要研究者发现，在临床抢救新型冠状病毒肺炎(COVID-19)危重患者中，中和活性的单克隆抗体具有靶点明确、纯度高以及可大规模制备等优势，有望成为治疗COVID-19的有力武器。本文就2019新型冠状病毒(2019-nCoV)侵入宿主细胞的途径、病毒新的主要变异体以及国内外抗2019-nCoV单克隆抗体研发进展进行介绍，以供临床工作者或研究者参考。