简介：目的:构建表达基因编辑钙探针(GECIs)的细胞系HeLa-GECIs,探究细胞应答外界ATP刺激中钙离子在细胞内的响应和变化。方法:分别用能够直接通过荧光强度反映细胞胞浆内和线粒体内钙离子相对浓度的2种钙探针cyto-GCaMP6和4mt-GCaMP6感染HeLa细胞,获得2种表达钙离子探针的HeLa细胞系;在感染了2种腺病毒探针24h后,用共聚焦荧光显微镜检测荧光探针在HeLa细胞内的表达情况;在表达2种钙探针的细胞的培养基中加入外源ATP,用Time-lapse成像动态观测技术观察HeLa细胞内钙离子对外环境中ATP的响应。结果:共聚焦荧光显微镜观察,确定95%以上的细胞表达了对应的钙离子指示荧光探针;Time-lapse成像动态观测技术观察发现,在细胞培养基中加入ATP后,细胞胞浆钙探针荧光强度瞬时(3~6s)升至10倍,200s后逐渐降低到基础水平;线粒体钙到达峰值(4倍)的时间稍滞后(5~8s),并且回落更慢,300s时至1.5倍。在ATP受体P2X7抑制剂A438079预处理的实验组,上述胞浆钙和线粒体钙浓度上升不明显。结论:构建了能在活体细胞内通过荧光探针实时监测钙离子响应胞外ATP刺激的细胞实验体系,为进一步深入探究ATP等危险信号导致细胞的炎性损伤机制奠定了基础。

简介：本文对培养20天后葛仙米不同氯化钙浓度下的三种酶活性进行对比发现,超氧化物歧化酶(SOD)活性随着钙离子浓度的升高而降低,多酚氧化酶(PPO)活性随着钙离子浓度的升高而降低。苯丙氨酸转氨酶(PAL)在较低钙浓度下表现出较高的活性,而在较高的钙浓度下活性较低。

简介：骨钙素(osteocalcin,OC)由成熟成骨细胞合成及分泌,是临床常用的骨形成标志物。其合成后大部分以羧化形式沉积在骨基质中参与骨骼矿化,少量未羧化或羧化不全直接分泌入血。未羧基化OC可作用于胰岛β细胞、脂肪细胞而促进胰岛素、脂联素的分泌,对能量代谢具调节作用,这使OC成为一种新型的能量代谢调节激素。

简介：目的了解和掌握引入西藏高原家兔的生理生化指标,以便为实践教学、临床诊疗和科学研究提供参数。方法采用朗道全自动生化分析仪对引入西藏高原20年的加利福尼亚兔（Californianrabbit）和中国白兔（Chinesewhiterabbit）的12项血清生化指标进行了测定。结果加利福尼亚兔在品种内比较发现TP、ALB、A/G、CRE、CHOL、LDH指标表现极强的雄兔特征（P〈0.01）,而ALT、GLU测定值雌兔明显高于雄兔（P〈0.05）;中国白兔在品种内比较发现CRE、LDH指标显示差异有显著性（P〈0.01）,CRE指标是雄兔高于雌兔,LDH参数是雌兔高于雄兔。加利福尼亚雄兔与中国白雄兔的参数比较中发现AST、TP、ALB、GLO、A/G、GLU、CRE、LDH指标显示差异有显著性（P〈0.01）,而TG、BUN指标显示差异有显著性（P〈0.05）;加尼福利亚母兔与中国白母兔的参数比较中发现ALT、GLO、CRE、TG指标显示差异有显著性（P〈0.05）,AST、TP、BUN、LDH指标显示差异有显著性（P〈0.01）。结论实验结果将为西藏高原的教学、临床诊疗和科学研究提供生理数据参考。

简介：本文提出一种水嘴中六价铬析出量的测定方法。该方法通过测定了水嘴的体积,再按体积比例加入提取液进行浸泡处理,收集水嘴析出的六价铬溶液,用二苯碳酰二肼分光光度法进行检测。该方法简单快捷、灵敏度高,解决了水嘴的表面积难以测定、提取液用量难以确定的问题。本方法适合于不同形状、不同规格的水嘴产品中六价铬析出量的测定。

简介：根据转录组测序获得的钙依赖蛋白激酶基因的EST序列设计特异引物,利用RT-PCR和RACE技术从油菜中克隆获得BnCDPK1基因全长序列,NCBI登录号为KF740477,其cDNA和gDNA全长分别为2115bp和2857bp,含有11个内含子和12个外显子。生物信息学分析表明其开放阅读框为1581bp,编码527个氨基酸,具有CDPKs家族典型的特征,含有1个激酶区域和4个钙离子手型结构域,与拟南芥AtCDPK28同源性最高,属于第Ⅳ亚家族。BnCDPK1在油菜的根、茎、叶、花、种子中均有表达,但表达丰度存在差异,叶片中表达量最高,其次为茎、根和种子,花中的表达量最低;在高抗和高感油菜品种中,菌核菌胁迫均能够诱导BnCDPK1上调表达,但是高抗品种比高感品种反应更迅速,表达量更高。接种前、接种后12h、接种后24h,高抗品种的表达量相比高感品种分别提高1.4倍、4倍和3倍,推测其可能参与油菜的生长发育以及油菜对菌核菌侵染的应答和防御反应。

简介：木耳（Auriculariaauricula-judae）在菌丝体阶段极易感染绿色木霉（Trichodermavider）等多种杂菌。本研究以木耳176个杂交子为供试菌株,采用木耳与绿色木霉菌丝体对峙培养,发酵液相互抑制菌丝体生长,以及调查木耳菌袋田间污染率,比较了杂交子抗绿色木霉的能力,初步建立了木耳抗霉菌污染能力的技术体系。

简介：在15例氯胺酮麻醉的Wistar大鼠利用皮层内微刺激技术测定了躯体的运动皮层代表区。电刺激为350Hz的阴极串脉冲，电流最大值阻为80μA。结果表明大多数皮层点诱发对侧肌肉反应。虽然代表区的大小有很大个体差异。分区的相对位置是恒定的。但在分区内部未见分域排列。部分大鼠存在前部前肢区，但无一例发现前部后肢区。比较文献结果提示Wistar大鼠的运动皮层的分化程度比Long-Evans黑顶鼠低。

简介：测定了真姬菇子实体中粗蛋白、粗纤维、粗脂肪、水分、灰分、多糖、维生素、氨基酸和矿物质元素。结果表明，其粗蛋白、粗纤维、粗脂肪、水分、灰分、多糖含量分别为22．3％、3．2％、3．4％、91．7％、7．8％和5．5％；维生素B2、B6，VA、VE、叶酸、烟酸、生物素含量分别为15．8mg/kg、92．0mg/kg、1140．0IU／kg、7．3IU／kg、188mg／Zg、1640．0mg/kg、〈3．1mg/kg；测定了18种氨基酸，8种必需氨基酸占氨基酸总量的37．86％；矿物质元素Mn、K、Ca、Na、Mg、Se、P、Cu、Fe和Zn分别为45．3，25723．8，466．6，169．7，1308．0，65．7，571．0，11．8，237．9，98．0mg/kg。

简介：目的:建立一个稳定可靠分离度好的方法测定黄芪桂枝五物颗粒中芍药苷的含量。方法:采用高效液相色谱法,色谱柱:YMC-PackODS-A(250×4.6mm,5μ);流动相:以乙腈—0.1%磷酸溶液(14:86)为流动相;检测波长:230nm;流速为1.0ml/min;柱温为30℃。结果:芍药苷的进样量在0.120μg~1.200μg范围内有良好的线性关系,平均回收率为99.22%,RSD为0.89%。建立了高效液相色谱法测定黄芪桂枝五物颗粒的含量的方法,该方法准确、可靠、分离度好。

简介：利用比色法简便、准确和快速地测定发酵生产的古尼虫草菌丝中甘露醇含量.结果表明,甘露醇的最大特征吸收峰在412nm处,质量浓度在10～50mg/L范围内线性较好,其回归方程ρ=-0.842+97.329A,r=0.9992;平均回收率100.24%,RSD=0.54%(n=5).样品中甘露醇采用水提取法,提取时间2h.甘露醇显色后20min内测定对结果影响不大,在测定时要注意排除果糖对测定结果的影响.用此法测得发酵古尼虫草菌丝体中甘露醇的含量为7.4%,RSD=0.24%(n=6).

简介：为研究人血小板因子4(hPF4)的生物学性能和用于肿瘤生物治疗的可能性,运用反转录聚合酶链反应(RTPCR)从人红白血病细胞系HEL细胞总RNA中扩增出hPF4基因cDNA序列,将其克隆至pUC18载体中.序列分析证实克隆片段与文献报道的hPF4基因cDNA序列完全一致,说明已成功克隆到hPF4基因cDNA.

简介：血清钠离子和钾离子的测定在临床诊断上意义重大，其常规检测方法火焰光度法和离子选择性电极法都需要昂贵的仪器且操作复杂，因此近年来开发了一些均相直接测定方法。本文综述了近年研制出的血清中钠、钾离子的各种均相直接测定方法，评述了各种直接测定方法的优、缺点。血清中钠、钾离子进行均相直接测定有着准确度高、重复性好等优点，可在临床生化自动化分析仪上应用。

简介：目的：研究羟苯磺酸钙对小鼠肾间质纤维化、Ⅰ型胶原表达的影响。方法：将C57小鼠随机分为假手术组（Sham组,n=4）、肾间质纤维化模型组（UUO组,n=5）及羟苯磺酸钙治疗组（CDT组,n=4）;采用单侧输尿管梗阻制备肾间质纤维化模型,CDT组给予羟苯磺酸钙灌胃、Sham组和UUO组给予双蒸水灌胃;采用HE染色、Masson染色、免疫组化、实时定量PCR以及蛋白免疫印迹观察单侧输尿管梗阻术后14d小鼠术侧肾脏的肾间质纤维化程度和Ⅰ型胶原表达情况。结果：与Sham组比较,UUO组小鼠术后14d术侧肾脏肾发生显著肾间质纤维化,Ⅰ型胶原表达显著增强（Ⅰ型胶原基因相对表达量：Sham组：1.00000,UUO组：114.92289,P〈0.0001）。与UUO组比较,CDT组小鼠术后14d术侧肾间质纤维化程度显著减轻,Ⅰ型胶原表达显著减弱（Ⅰ型胶原基因相对表达量：UUO组：114.92289,CDT组：45.33516,P〈0.005）。结论：羟苯磺酸钙通过抑制小鼠肾间质Ⅰ型胶原表达从而减轻单侧输尿管结扎小鼠肾间质纤维化。

简介：在建设有中国特设社会主义社会当中,发展社会就是要始终坚持走可持续发展道路,发展绿色经济、环保经济。木材主要来源于树木,通过对木材的含碳率进行准确的测定以及碳素数据的存数对我国实现可持续发展有着重大作用。本文就木材含碳率的测定以及碳素储存数据库进行了相关的研究。

简介：采用聚合酶链反应从炭疽芽孢杆菌减毒株ＹＢ１中扩增其保护性抗原（ＰＡ）的编码区基因，将其克隆至ｐＧＥＭ－Ｔ载体中，并分步测定其序列。序列测定表明，该基因长２２０５ｂｐ，编码７３５个氨基酸残基，与文献报道的标准菌株Ｓｔｅｒｎｅ株的ＰＡ序列只有４个碱基的差异。

简介：采用高效液相色谱法（Highperformanceliquidchromatography，HPLC）建立了测定菇柄麦角甾醇的含量测定方法。确定提取过程中皂化剂的种类和醇碱比后，将样品皂化，萃取后蒸干溶剂，乙醇定容测定。采用Phe—nomenex-C18色谱柱，y（流动相甲醇）：V（水）=98：2，流速1．0mL／min，检测波长282nm。结果表明：麦角甾醇线性回归方程为Y=9E＋9×106x-8919。9（X：质量浓度，mg／mL），R0=O．9989，0.0l～0．30mg/mL范围内线性关系良好，回收率为97．31％～101．95％。与紫外分光光度法所测结果比较，HPLC法测定菇柄中麦角甾醇含量灵敏、快速、准确，适用菇柄中麦角甾醇的含量测定。

简介：

简介：第六届全国钙信号和细胞功能研讨会“ChineseSymposiumonCaSignaling”（简称CSCS）作为第十次中国生物物理学术大会（htto：／／www．bsc．org．cn／cn／nav2．asp）的“卫星会议”于2006年5月22日青岛召开。原名“全国钙与细胞功能暨细胞信号转导专题学术会议”自1999年在徐州召开第五次会议后因故中断了7年。本次CSCS会议拥有自己独立的征文、会议程序和论文集。本次CSCS会议由中国生物物理学会、北京大学分子医学研究所（http：／／www．pku．edu．cn）共同主办，北京大学分子医学研究所承办。周专（北京大学）任本次CSCS会议主任，崔宗杰（北京师范大学）任副主任。

简介：用气相色谱法对发酵液中的乙酸进行了分析。以丙酸为内标，样品用硫酸酸化后再用乙醚提取，在ＨＰ－ＦＦＡＰ毛细管分析柱上进行色谱分析，采用ＦＩＤ检测器检测。该方法样品制备过程简捷精密度和回收率都很高。乙酸的回收率为９９．４４％－１０２．４１％，变异系数１．６９％－６．１１％。方法的建立为工程菌发酵控制和代谢工程研究提供了良好的研究手段。