简介:摘要目的探讨自噬对Sprague-Dawley(SD)大鼠梗阻性黄疸肝损伤的影响及其机制。方法健康雄性SD大鼠35只,SPF级,6~8周龄,200~300 g,分为5组:假手术组(单纯游离胆总管,不结扎,腹腔内注射生理盐水)、胆总管结扎(OJ)组(游离胆总管,并双重丝线结扎,腹腔内注射生理盐水)、OJ+3-甲基腺嘌呤(3-MA)组、OJ+雷帕霉素(Rapamycin)组和OJ+3-MA+VX-765组,每组7只。HE染色观察肝脏组织学变化。免疫组化染色检测自噬相关蛋白Atg5表达水平。全自动生化仪检测肝功能。酶联免疫吸附试剂盒检测血清白细胞介素(IL)-18水平。蛋白质印迹法检测自噬相关蛋白水平及内质网应激相关凋亡通路。结果通过免疫组化染色,OJ组自噬相关蛋白Atg5相对表达量较假手术组增加[(5.0±1.0)比(2.8±1.3)],差异有统计学意义(t=-3.00,P<0.05)。与假手术组比较,OJ组自噬活性增加,半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(Caspase)-1/p-65及炎症因子IL-18水平升高,同时内质网发生应激并诱导其相关性凋亡。应用自噬抑制剂3-MA后,与OJ组比较,OJ+3-MA组中Caspase-1/p-65蛋白水平及炎症因子IL-18水平增加,同时肝损伤加重;而应用自噬激动剂Rapamycin后,与OJ组比较,OJ+Rapamycin组中Caspase-1/p-65蛋白水平及炎症因子IL-18水平下降,同时肝损伤减轻。应用Caspase-1特异性阻断剂VX-765后,与OJ+3-MA组比较,OJ+3-MA+VX-765组中Caspase-1/p-65蛋白水平及炎症因子IL-18水平下降,同时肝损伤减轻。结论胆总管结扎后,诱导内质网应激相关性凋亡及激活自噬。活化的自噬减轻SD大鼠梗阻性黄疸肝损伤,可能与抑制Caspase-1/p-65炎症通路相关。
简介:摘要目的观察胆总管结扎诱导的梗阻性黄疸大鼠成纤维细胞活化的影响。方法雄性无特定病原体(SPF)级大鼠(第二军医大学实验动物中心提供)24只随机分为假手术组与实验组,每组大鼠各12只。所有大鼠均进行胆总管结扎。实验组大鼠用3-0丝线双重结扎且于结间切断胆总管。两组大鼠分别于术后2 d和7 d取材。采用酶联免疫吸附试验(ELISA法)检测人转化生长因子-β1(TGF-β1)含量;采用免疫组织化学法检测TGF-β1蛋白表达;采用实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)法检测TGF-β1 mRNA表达;采用蛋白质印迹法(Western blot)检测TGF-β1蛋白表达。应用SPSS 22.0统计软件分析,计量资料采用t检验。结果假手术组大鼠肝小叶结构清晰,肝索排列整齐;实验组大鼠肝小叶结构紊乱不清,并且肝索解离。实验组血清TGF-β1水平术后2 d[(689.42±58.13) ng/L]和术后7 d[(867.53±45.62) ng/L]高于假手术组[(519.92±32.41) ng/L和(536.52±41.29) ng/L,t=8.822、18.635,P<0.05],差异有统计学意义。实验组肝组织中TGF-β1蛋白表达术后2 d[(6.53±1.29)%]和术后7 d[(8.97±1.85)%]高于假手术组[(1.17±0.24)%和(1.54±0.39)%,t=14.151、13.613,P<0.05],差异有统计学意义。实验组肝组织中TGF-β1 mRNA表达术后2 d[(0.89±0.14)%]和术后7 d[(0.95±0.19)%]高于假手术组[(0.52±1.32)%和(0.31±1.76)%,t=14.693、18.316,P<0.05],差异有统计学意义。实验组肝组织中TGF-β1蛋白表达灰度值术后2 d(0.62±0.13)和术后7 d(0.78±0.10)高于假手术组(0.21±0.05和0.23±0.06,t=10.197、16.337,P<0.05),差异有统计学意义。结论胆总管结扎诱导的梗阻性黄疸大鼠TGF-β1表达明显上调,胆管上皮细胞增殖诱导成纤维细胞活化。
简介:目的观察复方黄栌口服液对异硫氰酸-萘酯致大鼠黄疸型肝炎模型的肝脏保护作用。方法将Wistar大鼠随机分为空白组,模型组,护肝宁片组,复方黄栌口服液低、中、高剂量组,连续灌胃给药10d。除空白组外,各组于实验第8天,灌胃异硫氰酸-萘酯造模,48h后处死大鼠,取少量肝组织制肝匀浆液和做病理切片,检测肝匀浆中MDA、SOD、TC、TG的活性以及肝脏病理组织学的改变为观察指标。结果与模型组相比,复方黄栌口服液低、中、高剂量均可显著降低肝脏TC、TG、MDA水平(P〈0.01),可显著升高肝脏SOD水平(P〈0.01,P〈0.05);复方黄栌口服液低、中、高剂量的肝脏指数均显著降低(P〈0.01,P〈0.05);结论复方黄栌口服液对异硫氰酸-萘酯诱导的大鼠急性肝损伤具有很好的保护作用。
简介:摘要:目的:探讨在进行新生儿黄疸的治疗时,探讨分析将黄疸洗应用于患儿治疗中的效果,分析其临床应用效果以及安全性。方法:本次研究将试验时间段设置为2023年1月至2023年3月录入该时段82名黄疸新生儿作为研究对象并对其进行分组处理,采用不同的治疗方式。对照组内患儿接受单纯蓝光照射治疗,实验组内患儿在蓝光照射基础上配合应用黄疸洗进行治疗,治疗后评价总有效率。结果:相较于对照组来说,实验组儿童的治疗总有效率略高,但对两组儿童的总有效率进行对比后,不存在明显差异(P>0.05)。结论:本研究的结论表明,在治疗新生儿黄疸时,将黄疸洗与蓝光照射相比,虽然实验组儿童的治疗总有效率略高,但在统计学上不存在明显差异(P>0.05)。这意味着在临床实践中,黄疸洗的应用效果与蓝光照射相似,两者在治疗新生儿黄疸方面都可以考虑使用。