简介:目的:比较人牙周膜干细胞(humanPeriodontalligamentstemcells,hPDLSCs)和牙髓干细胞(humanDentalpulpstemcells,hDPSCs)的表型及生长特性,为深入研究这两种细胞生物学特性提供依据。方法:组织块法培养获得原代人牙周膜细胞和牙髓细胞,采用有限稀释法分别对两者克隆化培养、分离纯化得到hPDLSCs和hDPSCs,采用倒置相差显微镜观察细胞形态、CCK8法检测细胞生长活性并绘制两者生长曲线、流式细胞技术检测干细胞表面标志物,分析比较两种细胞集落形成率(colonyformationratio,CFR)。结果:hPDLSCs和hDPSCs镜下形态相似,生长曲线均呈"S"形,牙周膜细胞中STRO-1表达hPDLSCs阳性率为15.88±0.48%,牙髓细胞中STRO-1表达hDPSCs阳性率为11.86±0.43%,两者无显著性差异。两种干细胞均阳性表达间充质干细胞(Mesenchymalstemcells,MSCs)表面标志物STRO-1、CD29、CD44、CD90、CD73和血管内皮标志物CD105,其中STRO-1、CD29、CD90、CD73、CD105及CD166百分率达90%以上,阴性表达造血干细胞表面标志物CD34和CD45。hDPSCs的集落形成率(4.31±0.08%)显著高于hPDLSCs的集落形成率(2.68±0.06%)(P〈0.05)。结论:hPDLSCs和hDPSCs细胞的形态相似,均高表达MSCs表面特异性标志物,hDPSCs的集落形成率显著高于hPDLSCs,说明hDPSC自我更新能力较hPDLSCs强,可为深入研究这两种干细胞提供实验依据。
简介:摘要再生医学作为新型疗法在国际竞争中越来越激烈,日本政府对干细胞的研究一直是持积极推进的态度,因此日本的干细胞发展在亚洲也是处于领先地位,而且日本的干细胞研究涉及面极广,包括胚胎干细胞、成体干细胞和诱导型多能干细胞(iPSC),特别是iPSC的研究投入了大量的资金。为了加速再生医学疗法的实际应用并保证该领域的安全性,在2013年,日本日内阁出台了两项法案来规范再生医学细胞疗法的发展和加速此类产品的市场化,一是颁布了《再生医学安全性保障法》,此法案根据产品的预期风险程度将细胞治疗产品分为三类,并允许医院或研究机构委托企业生产细胞治疗产品;二是从新修订了《药事法》,此法案加快了细胞治疗产品上市的进度。这两项法案的颁布将使日本成为再生医学疗法临床发展的聚集地。
简介:摘要目的对结肠肿瘤干细胞的筛选及耐药性进行了探讨。方法收集了我院从2015年12月到2016年12月间50例结直肠疾病患者的标本,将结肠癌细胞在特定微环境下培养,分析结肠癌细胞形态变化与分化程度的关系,及其与干细胞特性的关系,并筛选干细胞样肿瘤细胞,了解不同结肠癌干细胞的耐药性。结果观察到在7.7%溃疡性结直肠炎患者、14.7%结直肠息肉患者和58.0%结直肠癌患者的标本中结肠癌干细胞存在较高的耐药性,在结直肠癌患者中,高耐药性的患者比低耐药性的患者显示出更短的总生存期和无病生存期。结论对结肠癌干细胞的深入研究,有可能会从全新的角度去阐明结肠癌发生、发展的机制,从而为结肠癌的诊断、治疗提供一种新的思路。
简介:摘要:目的:探究应用 ESC、 MSC构建复合皮肤修复创伤皮肤的可行性。方法:①收集烧伤患者植皮手术剩余的皮片标本,并将其标号保存。经胰蛋白酶和中性蛋白酶联合消化法分离表皮,用Ⅳ型胶原培养皿快速粘附培养,利用差速粘附法分离,将人表皮干细胞培养基进行体外培养。观察细胞生长形态。②取 SD大鼠 15只,随机分为 3组,在动物背部正中尾部用常规手术法切除大小相同的全层皮肤缺损创面,实验组 A移植复合皮肤;对照组 B移植脱细胞真皮;空白组 C组、用纱布敷盖创面。观察三周内创面愈合情况。 结果:术后 A、 B、 C三组 15d的创面愈合时间分别是 (88.02±6.82)、 (82.79±7.18)、 (69.03±6.12)。结论:通过移植表皮干细胞,同时覆盖皮肤的碎薄皮片,抑或覆盖表皮细胞,进而构建与正常皮肤相类似的皮肤替代物,可用于修复全层皮肤缺损,为临床上治疗创伤尤其是全损皮肤或难愈性创面提供一定的实验基础。
简介:摘要目的目前大剂量化疗加手术并联合自体造血干细胞移植是治疗IV期神经母细胞瘤患儿并获得长期生存的有效治疗方法,干细胞动员与采集是决定造血重建的重要因素,由于儿童本身个体的特殊性,在动员与采集过程中存在一定的风险,为了使采集能顺利进行,降低不良反应,我们为采集的儿童提供个性化的优质护理。方法使用德国费森尤斯公司COM.TEC连续离心式血细胞分离机进行采集造血干细胞。结果30例患儿通过采集前给予家长和患儿对整个过程有针对性的心理护理,在采集的全过程给予密切的监护,不需要镇静与麻醉,操作简单、损伤小,经医护配合,均顺利完成干细胞采集。采集效率均得到CD34+>2.0×106/kg患者体重的干细胞。所有采集的造血干细胞在移植后8~14d均植活。
简介:摘要目的分析面部整形美容中自体脂肪源性干细胞应用价值。方法将2015年3月—2016年3月80例面部整形美容患者回顾性分析,并根据治疗方法分组,分别40例。对照组采用传统方法,研究组采用自体脂肪源性干细胞。比较两组面部整形美容效果;皮肤湿润度、美观度、光泽度评分;不良反应发生率。结果研究组面部整形美容效果高于对照组,P<0.05;研究组皮肤湿润度、美观度、光泽度评分高于对照组,P<0.05;两组均未出现感染和排斥等症状。结论面部整形美容中自体脂肪源性干细胞应用价值高,可提高皮肤湿润度、美观度、光泽度,改善整形效果,无明显副作用,值得推广。
简介:摘要目的观察不同氧浓度对人造血干细胞(Hematopoieticstemcells,HSCs)凋亡情况的影响,及HSCs诱导分化为人软骨细胞(Humanchondrocyte)的情况。方法将HSCs分别在不同氧浓度下培养分为4个组3%氧气浓度组、5%氧气浓度组、15%氧气浓度组、20%氧气浓度组(作为对照组)。分别培养6小时、12小时、24小时,观察HSCs细胞凋亡情况,并成功将HSCs体外诱导分化为软骨细胞。结果HSCs培养6小时,5%氧气浓度组的HSCs凋亡率最低,3%和5%氧气浓度组较对照组比较差异有统计学意义(P﹤0.05);HSCs培养12小时,5%氧气浓度组的HSCs凋亡率最低,5%和15%氧气浓度组较对照组比较差异均有统计学意义(P﹤0.05);HSCs培养24小时,5%氧气浓度组的HSCs凋亡率最低,3%和5%氧气浓度组较对照组比较差异有统计学意义(P﹤0.05)。培养6小时、12小时、24小时,氧浓度变化与流式细胞仪检测HSCs凋亡率均具有相关性(P﹤0.01)。HSCs在体外成功诱导分化为软骨细胞。结论不同氧浓度对HSCs的凋亡有影响。5%氧浓度能抑制HSCs的凋亡。在特定条件下,HSCs在体外可定向诱导分化为软骨细胞。
简介:目的观察舌鳞癌SCC9细胞干细胞样特性、顺铂敏感性以及miR-21表达对其影响。方法选取人舌鳞癌SCC9细胞分别通过贴壁、悬浮培养法培养获得SCC9a和SCC9f细胞;体外转染法将miR-21mimics、miR-21inhibitor分别转染至SCC9f细胞,设为SCC9m和SCC9i细胞。实时荧光定量PCR(QPCR)法检测干细胞相关转录因子(0ct3/4、Sox2、Nanog)及miR.21表达水平,ALDEFLORkit检测ALDH阳性细胞的比例。MTT法、AnnexinV/PI双染法分别检测顺铂对舌鳞癌细胞增殖及凋亡的影响。结果SCC9f细胞中Oct3/4、Sox2和Nanog表达以及ALDH阳性比例高于SCC9a细胞(P〈0.05)。顺铂对SCC9f细胞的增殖抑制率、凋亡率均低于SCC9a细胞。miR-21表达在SCC9f细胞中高于SCC9a细胞(P〈0.05),而在SCC9m、SCC9i细胞中表达分别较SCC9f细胞明显升高与降低(均P〈0.05)。Oct3/4、Sox2和Nanog在SCC9m细胞中表达高于SCC9f细胞,其中0ct3/4上调差异具有统计学意义(P〈0.001);而Oct3/4、Sox2和Nanog在SCC9i细胞中表达均较SCC9f细胞呈显著下调(P〈0.05)。SCC9a、SCC9m和SCC9i细胞中ALDH阳性率分别与SCC9f细胞中ALDH阳性率比较,差异均有统计学意义(P〈0.05)。SCC9m、SCC9i细胞的凋亡率分别较SCC9f减低与增高(均P〈0.05)。结论舌鳞癌SCC9细胞采用悬浮培养法培养获得的SCC9f细胞具有干细胞特性,对顺铂更为耐受;抑制miR-21表达可增强SCC9细胞对顺铂的敏感性,可能与miR.21调节其肿瘤干细胞相关转录因子表达有关。