简介:摘要目的本研究对2019年陕西省三带喙库蚊标本中分离的病毒(SX1943)进行病毒学和分子生物学鉴定。方法蚊虫研磨液接种组织培养细胞,对分离物进行病毒学和病毒分子遗传学分析。结果在2019年于陕西省采集的三带喙库蚊标本中获得1株病毒分离物(SX1943),将该病毒接种至C6/36细胞后第3天发生明显细胞病变,表现为细胞圆缩、聚集和脱落等,分离物可稳定传代。然而,该批标本在BHK-21细胞连续传代3次均未发现显著细胞病变。SX1943病毒接种至C6/36细胞后经电子显微镜(负染)观察,可见大量圆形病毒颗粒,直径约25 nm。SX1943病毒基因组扩增与测序结果显示,该病毒基因组序列全长为3 594 nt,共编码3种蛋白,分别为非结构蛋白(NS1和NS2)和衣壳蛋白(VP),3种蛋白的基因长度分别为2 376 nt、1 098 nt和1 136 nt。经病毒分子遗传进化分析发现,SX1943病毒与浓核病毒亚科Brevidensovirus病毒属中的淡色库蚊浓核病毒(Culex pipiens pallens Densovirus, CppDNV)处于同一进化分支,上述结果提示SX1943病毒为CppDNV。结论陕西省三带喙库蚊中分离到CppDNV。
简介:摘要目的检测淡色库蚊体内弓形虫529片段,验证淡色库蚊叮咬弓形虫感染小鼠后,蚊虫体内弓形虫携带状况,为研究蚊传播弓形虫提供依据。方法通过感染105个RH株速殖子建立急性弓形虫小鼠感染模型。每天将蚊子放进笼子里吸老鼠的血。捕获吸血蚊,将其粉碎,利用酚氯仿DNA提取法,巢式聚合酶链式反应(NestedPCR)及实时荧光定量PCR(Real-timePCR)检测弓形虫529基因。结果小鼠血液中529基因的感染率为77.37%,弓形虫的含量随感染天数的增加而增加。吸血蚊血涂片在镜检下观察到弓形虫滋养体活体。47只蚊子529基因的感染率为59.57%。在28只阳性蚊子中,弓形虫的平均拷贝数约为1529.3/只。结论淡色库蚊可以通过吸血方式携带弓形虫。