简介:摘要目的观察肝细胞癌患者血清中微小RNA(miRNA,miR)-432、微小RNA-432(miR-30b)及微小RNA-432(miR-764)水平。方法选取安徽医科大学第三附属医院2015年1月30日至2018年1月30日收治的150例肝细胞癌患者,同时选取150例年龄匹配的体检结果健康者作为对照组,采用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)法检测研究对象外周血中miR-432、miR-30b及miR-764表达水平。观察miR-432、miR-30b及miR-764与肝细胞癌患者临床病理因素的相关性,并对肝细胞癌患者进行随访,观察miR-432、miR-30b及miR-764与患者总生存期(OS)的相关性。采用独立样本t检验及Log-rank检验。结果肝细胞癌患者外周血中miR-432(2.11±0.71)、miR-30b(1.88±0.68)及miR-764(1.90±0.65)水平均较对照组高(1.12±0.40、1.01±0.38、0.99±0.35,t=4.879、13.679、15.097,P<0.01)。miR-432、miR-764表达量与肝细胞癌TNM分期有相关(P<0.05),miR-30b与肝细胞癌TNM分期及分化程度有相关(P<0.05)。Kaplan-Meier法及Log-rank检验显示,miR-432、miR-30b及miR-764表达量升高组OS短于降低组(Log-rank χ2=16.433、10.575、7.998,P<0.05)。Cox多因素分析均显示,TNM分期、miR-432、miR-30b、miR-764、肿瘤分化程度是肝细胞癌OS的独立影响因素[比值比(OR)=2.904、2.135、1.651、1.496、1.205,P<0.05]。结论肝细胞癌患者循环中miR-432、miR-30b及miR-764表达上调,且与患者总生存率降低密切相关。
简介:摘要目的探讨老年急性缺血性脑卒中(AIS)患者血清微小RNA-24(miR-24)和微小RNA-29b(miR-29b)表达水平及其对神经功能预后的预测价值。方法采用前瞻性研究方法,选择2017年1月1日至2019年3月31日儋州市人民医院神经内科收治的170例老年AIS患者。根据改良Rankin量表(mRS)评分将患者分为神经功能预后良好组(mRS评分≤2分,105例)和预后不良组(mRS评分>2分,65例);根据美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分将患者分为轻度组(NIHSS评分<5分,50例)、中度组(NIHSS评分5~20分,76例)、重度组(NIHSS评分>20分,44例)。选择同期本院65例体检正常者作为健康对照组。采用实时荧光定量反转录-聚合酶链反应(RT-qPCR)检测血清miR-24、miR-29b表达水平。绘制受试者工作特征曲线(ROC),分析血清miR-24、miR-29b表达水平对老年AIS患者神经功能预后不良的预测价值;采用Pearson相关法分析老年AIS患者血清miR-24、miR-29b表达水平与NIHSS、mRS评分的相关性。结果AIS组患者血清miR-24、miR-29b表达均明显低于健康对照组〔miR-24(2-ΔΔCt):0.64±0.17比2.18±0.85,miR-29b(2-ΔΔCt):0.72±0.21比3.05±0.96,均P<0.01〕。预后不良组患者血清miR-24、miR-29b表达均明显低于预后良好组〔miR-24(2-ΔΔCt):0.20±0.05比1.16±0.48,miR-29b(2-ΔΔCt):0.18±0.03比1.41±0.56,均P<0.01〕。重度组患者血清miR-24、miR-29b表达明显低于轻度组和中度组〔miR-24(2-ΔΔCt):0.13±0.02比1.30±0.51、0.56±0.14,miR-29b(2-ΔΔCt):0.09±0.01比1.52±0.60、0.62±0.13,均P<0.01〕,且中度组表达水平明显低于轻度组(均P<0.01)。ROC曲线分析显示,血清miR-24、miR-29b表达水平预测老年AIS患者神经功能预后不良的最佳截断值分别为0.53、0.48,二者联合预测的ROC曲线下面积(AUC)为0.920〔95%可信区间(95%CI)为0.861~0.982〕,明显大于miR-24(AUC为0.802,95%CI为0.742~0.860)或者miR-29b(AUC为0.835,95%CI为0.778~0.890)单独预测(Z值分别为6.513、4.902,均P<0.05),其敏感度、特异度分别为92.0%和85.7%。Pearson相关分析显示,老年AIS患者血清miR-24、miR-29b表达水平与NIHSS评分(r值分别为-0.758、-0.794)、mRS评分(r值分别为-0.817、-0.860)均呈显著负相关(均P<0.01)。结论血清miR-24、miR-29b表达水平与老年AIS患者神经功能缺损程度及神经功能预后相关,二者联合检测对老年AIS患者神经功能预后具有一定预测价值。
简介:摘要目的探讨微小RNA-29b对老年冠心病患者左心室肥厚(LVH)的诊断价值。方法研究对象为2015年1月至2018年12月于我院心血管内科住院的老年冠心病患者140例,其中以单纯冠心病(无LVH)患者70例作为NLVH组,以冠心病合并LVH患者70例作为LVH组,选择同期于我院进行健康检查的70例老年无冠心病人群为对照组。观察并比较3组人群之间的室间隔厚度(IVSD)、左心室后壁厚度(LVPWD)、微小RNA-29b的相对表达量;分析微小RNA-29b与IVSD、LVPWD的相关性;分析微小RNA-29b对老年冠心病伴LVH患者的诊断价值。结果3组间IVSD、LVPWD、微小RNA-29b相对表达量比较差异均具有统计学意义(F=22.838、22.147、114.096,均P=0.000);LVH组IVSD、LVPWD、微小RNA-29b的相对表达量明显高于NLVH组(t=3.479、3.206、9.852,均P=0.000),也高于对照组(t=3.904、3.553、10.792,均P=0.000);NLVH组微小RNA-29b的相对表达量明显高于对照组(t=2.306,P=0.420)。微小RNA-29b诊断老年人冠心病伴LVH的ROC曲线分析结果显示,Youden指数的最大切入点为0.80,微小RNA-29b诊断老年人冠心病伴LVH的最佳临界值为3.52,诊断LVH的敏感度为91.73%、特异度为88.27%;Pearson相关分析结果显示,微小RNA-29b表达水平与IVSD、LVPWD呈明显正相关关系(r=0.63、0.61,均P=0.000)。结论老年冠心病伴LVH患者微小RNA-29b的表达明显升高,微小RNA-29b表达水平与IVSD、LVPWD呈正相关,对老年人冠心病伴LVH诊断具有较高的灵敏度与特异度。
简介:摘要目的观察微小RNA(miRNA,miR)-29a-5p在心肌梗死后心室重塑心肌纤维化中的作用,探讨miR-29a-5p通过靶基因Endoglin调控心肌梗死后心肌纤维化的作用机制。方法选取2019年1月至2019年10月在郑州大学第二附属医院收治的30例心肌梗死患者和20例非急性冠脉综合征的患者,取血液标本,分别进行血清miR-29a-5p和NTPRO-脑钠肽(BNP)的检测。体内实验,建立小鼠心肌梗死模型,尾静脉分别注射miR-29a-5p mimics和阴性对照试剂。4周后处死小鼠,取部分心肌组织用实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)和蛋白质印迹法(Western blot)分别对miR-29a-5p、Endoglin、BNP进行检测。体外实验,处死1日龄小鼠,分离获得心肌成纤维细胞并进行培养。将培养的细胞用脂质体2000对细胞进行转染miR-29a-5p mimics和阴性对照试剂,转染后加入50 μmol/L血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)或等体积的磷酸盐缓冲液(PBS)持续48 h。用图像J软件检测各组成纤维细胞的表面积。另取细胞用miR-29a-5p mimics或antagomir,pRL-TK-endoglin-3’端非编码区(3’UTR)载体,pGL3-basic质粒进行共转染。转染48 h,获得细胞,用双荧光素酶报告试验系统检测细胞相对荧光素酶活性,并用Real-time PCR和Western blot分别检测Endoglin在各组的表达。采用单因素方差分析和LSD检验。结果急性心肌梗死(AMI)患者血清中miR-29a-5p含量[(3.57±0.53) ng/ml]明显降低(F=935.899,P<0.01),NTPRO-BNP含量明显升高[(9.47±5.06) ng/ml,F=65.440,P<0.01]。小鼠MI组miR-29a-5p表达水平明显降低(0.51±0.12,t=4.315,P<0.01),在AngⅡ诱导的心肌纤维化模型中同样发现miR-29a-5p的表达水平明显降低(0.65±0.26,t=4.511,P<0.01)。miR-29a-5p mimics处理心肌成纤维细胞中Endoglin蛋白含量和mRNA表达水平降低(0.49±0.09,t=352.312,P<0.01),在miR-29a-5p antagomir处理心肌成纤维细胞中Endoglin蛋白含量和mRNA表达水平升高(2.15±0.14,t=7.814,P<0.05)。结论miR-29a-5p是心肌纤维化的重要调节因子。
简介:摘要目的探讨精神分裂症患者外周血微小RNA-16、微小RNA-124和微小RNA-195表达与认知功能和社会功能的相关性。方法选择台州市第二人民医院2016年1月至2018年12月收治的精神分裂症患者112例为观察组;另选择台州市第二人民医院2016年1月至2018年12月健康体检者93例作为对照组。采用实时定量荧光聚合酶链式反应法检测外周血微小RNA-16、微小RNA-124和微小RNA-195表达;采用中文版蒙特利尔认知评估量表(MoCA)评价患者认知功能;采用住院精神病人社会功能评定量表(SSPI)评价患者社会功能。结果观察组外周血微小RNA-16(0.03±0.01)和微小RNA-195(0.08±0.03)表达低于对照组(0.12±0.02)和(0.27±0.06),而微小RNA-124(14.63±3.24)表达高于对照组(7.45±1.39),差异均有统计学意义(t=41.763、19.898、29.389,均P<0.05)。观察组MoCA量表评分[(22.17±3.45)分]低于对照组[(28.39±1.28)分],差异有统计学意义(t=16.465,P<0.05)。观察组SSPI量表评分[(26.58±5.16)分]低于对照组[(45.37±3.27)分],差异有统计学意义(t=30.405,P<0.05)。微小RNA-16和微小RNA-195与MoCA量表评分和SSPI量表评分呈线性正相关(MoCA量表评分:r=0.641、0.724,SSPI量表评分:r=0.801、0.657,均P<0.05),微小RNA-124与MoCA量表评分和SSPI量表评分呈线性负相关(r=-0.738、-0.769,均P<0.05)。结论精神分裂症患者外周血微小RNA-16和微小RNA-195表达降低而微小RNA-124表达升高,其中微小RNA-16和微小RNA-195表达与认知功能和社会功能呈正相关,而微小RNA-124与认知功能和社会功能呈负相关。
简介:摘要目的探讨微小RNA(miR)-29b-3p对大鼠膝骨关节炎模型的保护作用及其机制。方法30只SD大鼠随机分为对照组、模型组和miR-29b-3p KD组,miR-29b-3p KD组大鼠经膝关节腔注射过表达miR-29b-3p沉默腺相关病毒,对照组和模型组经膝关节腔给予对照腺相关病毒。3组大鼠表达30 d后,模型组和miR-29b-3p KD组大鼠采用木瓜蛋白酶局部注射复制膝骨关节炎动物模型。建模4周后,采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)分析膝关节miR-29b-3p表达水平;Mankin组织学评分和Pelletier评分分析关节炎病变程度;分析3组大鼠膝关节最大活动度;采用酶联免疫吸附实验分析白细胞介素(IL)-1β、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和转化生长因子-β1(TGF-β1)水平;采用免疫组织化学分析基质金属蛋白酶(MMP)-13和Ⅱ型胶原的表达水平。组间比较采用单因素方差分析。结果miR-29b-3p KD组大鼠膝关节组织miR-29b-3p表达水平(0.76±0.11)明显低于模型组(2.09±0.15),差异有统计学意义(t=22.240,P<0.05)。miR-29b-3p KD组大鼠膝关节最大屈伸角度[(126.51±6.50)°]明显大于模型组[(102.53±5.33)°],差异有统计学意义(t=9.017,P<0.05)。miR-29b-3p KD组大鼠膝关节Pelletier评分[(2.36±0.24)分]明显低于模型组[(3.40±0.84)分],差异有统计学意义(t=5.196,P<0.05),miR-29b-3p KD组大鼠膝关节Mankin评分[(2.50±0.85)分]明显低于模型组[(3.70±0.0.82)分],差异有统计学意义(t=3.207,P<0.05)。miR-29b-3p KD组大鼠膝关节滑膜液IL-1β和TNF-α水平[(82.62±8.76)、(51.43±5.61) ng/mg]明显低于模型组[(163.02±11.87)、(122.07±13.21) ng/mg],差异有统计学意义(t=17.250,P<0.05;t=15.560,P<0.05)。miR-29b-3p KD组大鼠膝关节滑膜液TGF-β1水平[(55.44±5.91) ng/mg]明显高于模型组[(25.40±4.09) ng/mg],差异有统计学意义(t=13.230,P<0.05)。miR-29b-3pKD组大鼠膝关节胶原酶Ⅱ水平(50.12±4.17)明显高于模型组(33.43±3.61),差异有统计学意义(t=9.579,P<0.05)。miR-29b-3p KD组大鼠膝关节MMP-13水平(82.62±8.76)明显低于模型组(163.02±11.87),差异有统计学意义(t=17.250,P<0.05)。结论miR-29b-3p沉默可显著上调TGF-β1表达水平,进而对大鼠膝关节软骨具有修复与保护作用。
简介:摘要目的探讨血清微小RNA-206(miR-206)、微小RNA-590-3p(miR-590-3p)水平与室性心律失常患者预后的关系。方法选取2016年7月至2019年2月于河北燕达医院住院治疗的117例室性心律失常患者(室性心律失常组),同期选取104例健康体健者作为对照组。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测两组血清中miR-206和miR-590-3p水平;分析室性心律失常患者血压、血脂水平与血清miR-206、miR-590-3p水平的相关性;比较室性心律失常患者不同预后组血清miR-206和miR-590-3p水平;分析室性心律失常患者预后不良的影响因素。结果室性心律失常组与对照组的性别、年龄、体质指数、肌酐、高血压、高脂血症和吸烟比例比较,差异均无统计学意义(均为P>0.05)。室性心律失常组的miR-206、miR-590-3p、收缩压、舒张压、总胆固醇、三酰甘油和低密度脂蛋白胆固醇水平显著高于对照组,而高密度脂蛋白胆固醇水平低于对照组(均为P<0.05)。室性心律失常患者miR-206与miR-590-3p水平呈正相关,且与收缩压、舒张压、总胆固醇、三酰甘油和低密度脂蛋白胆固醇水平呈正相关,与高密度脂蛋白胆固醇水平呈负相关(均为P<0.05)。预后不良组患者的血清miR-206和miR-590-3p水平均显著高于预后良好组(均为P<0.05);miR-206升高(OR=6.98,95%CI:2.96~16.45,P=0.001)、miR-590-3p升高(OR=7.07,95%CI:4.33~11.54,P=0.002)和总胆固醇升高(OR=6.27,95%CI:4.38~8.97,P=0.008)是室性心律失常患者预后不良的危险因素,高密度脂蛋白胆固醇升高(OR=0.42,95%CI:0.21~0.84,P=0.004)是室性心律失常患者预后不良的保护因素。结论室性心律失常患者血清miR-206和miR- 590-3p水平升高与预后不良密切相关,可作为评估预后的参考指标。
简介:摘要目的探讨急性脑梗死(ACI)患者血清微小RNA-1(miR-1)和微小RNA-155(miR-155)的表达与ACI疾病程度及预后的关系。方法选取台州市立医院2018年4月至2019年8月收治的ACI患者173例为研究组,并根据美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分分为轻度组(78例)、中度组(54例)、重度组(41例)三个亚组。同期选取体检健康者180例作为对照组。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测所有受试者血清miR-1和miR-155表达水平。根据90 d内患者改良Rankin量表(mRS)评分将患者分为预后不良与预后良好组。评估血清miR-1和miR-155表达对ACI预后的预测效能以及ACI不良预后的危险因素。结果研究组高血压史[56.65%(98/173)]、收缩压[(134.02±27.35)mmHg]、舒张压[(88.45±9.52)mmHg]、总胆固醇[(3.78±0.82)mmol/L]、低密度脂蛋白胆固醇[(2.08±0.73)mmol/L]、血清miR-1(2.07±0.37)和miR-155(1.56±0.32)表达水平均显著高于对照组[39.44%(71/180)、(119.37±22.14)mmHg、(81.46±14.13)mmHg、(3.59±0.68)mmol/L、(1.74±0.69)mmol/L、(1.01±0.22)、(1.02±0.24)],高密度脂蛋白胆固醇[(1.24±0.22)mmol/L]显著低于对照组[(1.31±0.26)mmol/L],差异均有统计学意义(χ2=10.462,t=5.542、5.429、2.373、4.498、32.865、17.982、2.725,均P<0.05);随着疾病程度的增加,ACI患者血清miR-1、miR-155表达水平逐渐升高(t=10.212、13.050、3.092、7.027、3.983、4.099,均P<0.05);预后不良组高血压史[64.47%(49/76)]显著高于预后良好组[42.27%(41/97)](χ2=8.419,P<0.05),收缩压[(136.51±12.56)mmHg]、舒张压[(89.53±6.65)mmHg]、NIHSS评分[(7.26±0.58)分]、血清miR-1(1.32±0.15)、miR-155(1.21±0.12)表达水平均显著高于预后良好组[42.27%(41/97)、(132.19±9.32)mmHg、(86.34±5.62)mmHg、(6.44±0.62)分、(1.01±0.07)、(0.99±0.05)](t=2.597、3.418、8.880、10.695、4.633,均P<0.05);受试者工作特征曲线(ROC曲线)分析结果表明血清miR-1和miR-155表达预测ACI预后的曲线下面积(AUC)分别为0.814(95%CI:0.745~0.884)、0.839(95%CI:0.780~0.897),二者联合对预测ACI预后的AUC为0.944(95%CI:0.912~0.976);logistic回归分析表明入院NIHSS评分、miR-1与miR-155升高是ACI预后不良的危险因素(P<0.05)。结论miR-1和miR-155表达水平与ACI患者疾病严重程度有关,可能是ACI预后不良的预测指标。
简介:摘要目的探讨微小RNA(miR)-21、miR-29a和D-二聚体对心肌缺血再灌注的诊断价值。方法回顾性分析浙江省乐清市人民医院2017年5月至2018年10月80例心肌缺血再灌注患者(缺血再灌注组)和80例行冠状动脉造影检查未发现冠状动脉狭窄病变患者(对照组)。缺血再灌注组患者均采用经皮冠状动脉介入疗法(PCI)治疗。缺血再灌注组于术前、术后1 d、术后5 d,对照组于入院当天,检测miR-21,miR-29a、D-二聚体、心肌肌钙蛋白(cTn)、高敏C反应蛋白(hs-CRP)和N末端脑钠肽前体(NT-proBNP)水平。结果对照组miR-21、miR-29a、D-二聚体、cTn、hs-CRP和NT-proBNP分别为0.14 ± 0.03、0.19 ± 0.07、(123.2 ± 23.1)μg/L、(0.02 ± 0.01)μg/L、(0.65 ± 0.23)mg/L和(160 ± 78)ng/L;缺血再灌注组术前分别为0.36 ± 0.08、0.30 ± 0.05、(812.2 ± 95.7)μg/L、(0.48 ± 0.07)μg/L、(5.36 ± 2.67)mg/L和(853 ± 462)ng/L,术后1 d分别为0.31 ± 0.07、0.26 ± 0.04、(685.0 ± 29.3)μg/L、(0.41 ± 0.09)μg/L、(4.28 ± 1.59)mg/L和(560 ± 256)ng/L,术后5 d分别为0.22 ± 0.03、0.20 ± 0.04、(216.0 ± 27.6)μg/L、(0.30 ± 0.06)μg/L、(2.36 ± 0.78)mg/L和(382 ± 136)ng/L。缺血再灌注组术前及术后1、5 d miR-21、miR-29a、D-二聚体、cTn、hs-CRP和NT-proBNP水平均明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);在缺血再灌注组中,术后1和5 d各指标均明显低于术前,术后5 d明显低于术后1 d,差异有统计学意义(P<0.05)。结论miR-21、miR-29a、D-二聚体、cTn、hs-CRP和NT-proBNP与患者临床心肌缺血再灌注状态密切相关。