简介：目的从成年大鼠脊髓中培养神经干细胞，并对其进行鉴定。方法采用悬浮培养神经干细胞技术，对成年大鼠脊髓组织进行干细胞培养，并通过自我增殖实验和免疫细胞化学技术进行鉴定。结果培养1-2周时，培养液中即出现神经干细胞克隆球。该克隆球有很强的自我增殖能力，可多次传代。免疫细胞化学技术证明该克隆球表达大量神经干细胞特征性的中间丝——巢蛋白（Nestin）。结论正常成年大鼠脊髓中含神经干细胞，在体外条件下可大量增殖。

简介：摘要目的探索成年大鼠骨骼肌成肌细胞的原代培养方法。方法取成年Wistar大鼠的后肢肌肉,利用组织块法培养成肌细胞。并对培养细胞进行形态学研究和细胞鉴定。结果采用组织块培养成肌细胞的密度可达118/ml,成肌细胞的分化鉴定显示94%以上的细胞呈骨骼肌特异的肌细胞。结论利用组织块法成功培养成年大鼠原代骨骼肌成肌细胞,该方法实用性强,所得成肌细胞纯度高,为深入研究心力衰竭骨骼肌成肌细胞自体移植奠定了基础。

简介：目的探索Math1基因导人大鼠前庭简便有效的方法和途径，为前庭功能障碍基因治疗的相关研究提供参考。方法将20只成年Wistar大鼠分为缺失E1、E3基因片段且构建有Math1基因和增强型绿色荧光蛋白报告基凶的复制缺陷型腺病毒（adnovirus—Math1—enhancedgreenfluorescenceprotein,Ad—Math1—EGFP）鼓阶导入组和前庭阶导人组．Ad—Math1—EGFP导入组大鼠在右耳通过耳蜗底转鼓阶或前庭阶打孔的方法导人物理滴度为2．1×1011v．p／ml的上述腺病毒5μl。在导入3天、7天后分别将动物处死，进行GFP表达观察。结果导入Ad—Mathl—EGFP3天后，前庭阶导入组大鼠的前庭终末器官及耳蜗均出现明显的GFP阳性表达；而鼓阶导入组的表达则局限于耳蜗，7天后仍未见前庭终末器官的GFP阳性表达。结论耳蜗底转前庭阶打孔可以作为Math1基因导入大鼠前庭简便有效的途径。

简介：目的研究雌激素膜受体—G蛋白偶联受体30（GPR30）在正常成年大鼠脊髓中的表达与分布。方法采用免疫组化染色法观察4只成年大鼠脊髓各节段中GPR30的表达和分布情况。结果在脊髓的各个节段,GPR30在脊髓中均有表达,但主要分布在灰质中,且以腹角为主,除腰段脊髓背角有少量GPR30阳性信号外,其余节段脊髓背角均未见明显GPR30阳性信号。GPR30在白质中的信号分布较均匀。结论GPR30在脊髓呈特异性分布,提示其在脊髓的生理和病理过程中可能起重要的作用。

简介：摘要目的探索不同浓度牛磺酸对成年雄性大鼠脊髓胶状质（substantiagelatinosa,SG;laminaIIofRexed）神经细胞的作用机制。方法用乌拉坦（1.5g/kg，腹腔注射）向成熟雄性Wistar大鼠（6～7周）施以全身麻醉，随后行腰骶部椎板切除术。取出腰骶部的脊髓（L1-S3），利用振动微切片机切取500-600μm厚度的脊髓切片，放置于标本记录槽内的尼龙网托上。然后利用全细胞膜片钳技术记录SG神经元的生物电信号。用不同浓度牛磺酸、荷包牡丹碱以及士的宁等溶液灌注记录槽。结果牛磺酸在作用于SG神经元甘氨酸受体所引起的效应远大于甘氨酸本研究中当牛磺酸和甘氨酸应用浓度相同时，牛磺酸的诱发电流振幅（ITau）都比甘氨酸的诱发电流(IGly）振幅大。牛磺酸所引起的电流可能与氯离子的电导率增加有关。牛磺酸在0.3mM时可以激活甘氨酸受体，在3mM时不仅激活甘氨酸受体并且激活γ氨基丁酸A（GABAARS）受体。结论牛磺酸在SG神经元中可能扮演一种重要的神经递质或调节器，并且可能具有镇痛作用。

简介：摘要目的评价吸入时间对成年大鼠七氟烷最低肺泡有效浓度(MAC)的影响。方法SPF级健康成年SD大鼠200只，8~10周龄，体重200~260 g，雌雄各半，采用随机数字表法分为2组(n＝100)：七氟烷吸入1 h组和20 min组，每组再分为10个亚组(n＝10)，预设起始浓度为1.50%，相邻浓度比值r为1.08，通过夹尾刺激判定各亚组麻醉效果，1 min内出现体动反应为阳性，未出现为阴性。采用Bliss法计算2组七氟烷MAC、EC95及其95%置信区间。结果吸入1 h组七氟烷MAC、EC95及其95%置信区间分别为2.09%(1.98%~2.20%)和2.75%(2.56%~3.04%)，吸入20 min组七氟烷MAC、EC95及其95%置信区间分别为2.35%(2.22%~2.49%)和3.10%(2.87%~3.45%)，差异有统计学意义(P<0.05)。结论吸入七氟烷1 h成年大鼠MAC较吸入20 min时降低。

简介：目的观察成年大鼠下颌功能性前伸后翼外肌的超微结构变化.方法成年雄性Sprague-Dawley大鼠40只,随机分为4个实验组和4个对照组,每组5只.实验组大鼠配戴固定的前伸下颌矫治器,对照组不配戴矫治器.分别于下颌前伸3、7、14、28d处死实验组和对照组大鼠.取大鼠左右侧的翼外肌,制作电镜标本,透射电镜下观察成年大鼠翼外肌的超微结构变化.结果在实验组大鼠翼外肌细胞内,下颌前伸3d时,部分肌丝溶解断裂;下颌前伸7d和14d时,肌丝方向紊乱,肌小节宽度不规则;下颌前伸28d时,局部仍可见肌丝方向紊乱和肌小节宽度不规则.下颌前伸3、7、14d时实验组大鼠翼外肌细胞肌膜下及肌丝间线粒体增多,形态改变.下颌前伸28d时,线粒体数量和形态基本正常.下颌前伸14d时,在实验组大鼠翼外肌细胞内,终板内的神经递质较多.结论成年大鼠下颌功能性前伸后翼外肌细胞的结构发生了改变.

简介：目的探讨一种简便、稳定、可重复的大鼠成年神经干细胞体外氧糖剥夺／复氧模型的制备方法。方法以来自于成年Fisher344大鼠的海马神经干细胞系为研究对象，以无血清培养基培养并传代．并用nestin和DAPI免疫荧光双染确认其生物学特性。将三气培养箱氧气浓度调至1％以制备缺氧环境，将培养基换为不含葡萄糖的Earle’s平衡盐溶液，分别缺氧缺糖2h、4h、6h、8h、10h后取出细胞，恢复正常条件继续培养24h后倒置显微镜下观察细胞形态学变化，CCK-8比色法检测细胞存活率，流式细胞术检测细胞凋亡率。同时设置常氧常糖的正常对照组。结果与正常对照组相比．缺氧缺糖2h组细胞吸光度值明显升高，细胞存活率有一定的增长，但差异无统计学意义（P〉0．05）。随着缺氧缺糖时间延长，神经干细胞形态学损伤逐渐加重，细胞吸光度值逐渐下降．缺氧缺糖6h后与正常对照组比较差异有统计学意义（P〈0．05）；缺氧缺糖6h起细胞存活率均较正常对照组明显下降，比较差异有统计学意义伊〈0．05）；神经干细胞凋亡率逐渐增高，且均明显高于正常对照组，差异有统计学意义（P〈0．05），其中缺氧缺糖6h时细胞的凋亡率已超过50％。结论利用三气培养箱物理缺氧方法可成功建立一种简便、有效的神经干细胞体外氧糖剥夺／复氧模型。

简介：

简介：【摘要】目的：研究改良法体外分离培养成年大鼠骨髓间充质干细胞实验情况。方法：用全骨髓贴壁法对成年大鼠BMSCs分离，创设含胎牛血清10%（FBS）的DMEM/F12培养组是对照组，含10%FBS、10ng/mL表皮生长因子（EGF）的DMEM/F12培养组是实验组，经对显微镜倒置对两组原代、传代后BMSCs形态与生长进行观察，用流式细胞仪对观察组P6、P10细胞表面展开标记。结果：换液时，造血细胞渐渐消除，BMSCs按集落为中心逐渐分裂增殖，对照组BMSCs原代培养7-9d时，细胞会融合为单层。观察组BMSCs原代细胞到融合时间达5-6d。原代BMSCs形态不相同，是由梭形、宽大的扁平状细胞构成。结论：10%FBS、10ng/mL表皮生长因子（EGF）的DMEM/F12全骨髓粘壁法培养BMSCs可使其更加稳定与边界，短时间取得较多纯度高的成年大鼠BMSCs，满足组织工程对种子细胞要求。

简介：摘要目的探讨早期母婴分离应激联合成年慢性不可预知性应激制备成年SD大鼠抑郁模型，观察大鼠行为学表现和突触蛋白的表达。方法将刚出生的24只雄性大鼠随机分为空白组(CON组)、慢性不可预知性应激组(CUMS组)、母婴分离联合慢性不可预知性应激组(MS＋CUMS组)，每组8只。CUMS组大鼠成年期采用慢性不可预知性应激(chronic unpredictable mild stress，CUMS)建立抑郁模型，MS＋CUMS组大鼠采用母婴分离＋慢性不可预知性应激建立大鼠成年期抑郁模型。采用体质量和外观观察、糖水偏好实验、旷场实验、强迫游泳实验评价大鼠抑郁模型；免疫组化检测海马中Syn的表达以及Western blot检测大鼠海马PSD-95、Syn蛋白表达水平。结果(1)应激造模结束后，与CON组相比，CUMS组和MS＋CUMS组大鼠体质量明显降低[(126.43±3.88) g，(91.04±3.85) g，(69.89±6.67) g；t＝5.03，8.03，均P<0.01]，糖水偏好度显著下降[(94.21±0.56)%，(79.30±1.13)%，(72.73±1.82)%；t＝8.24，11.87，均P<0.01)，不动时间明显增加[(3.50±0.84) s，(13.59±2.40) s，(15.70±2.97) s；t＝3.16，3.82，均P<0.01]；其中，MS＋CUMS组的体质量和糖水偏好度比CUMS组大鼠的更低(t＝3.00，3.63，均P<0.01)。(2)与正常组相比，MS＋CUMS大鼠的中央区域活动时间明显缩短[(21.41±4.65) s，(8.96±2.37) s；t＝2.66，P<0.05]。(3)在免疫组化实验中，与正常组相比，CUMS组和MS＋CUMS组大鼠海马Syn阳性面积百分比明显减少[(24.42±0.76)%，(14.00±0.95)%，(10.38±1.38)%；t＝6.93，9.33，P<0.01)]。(4)Western blot结果显示，与CON组相比，CUMS组和MS＋CUMS组大鼠海马中PSD-95[(1.18±0.02)，(0.74±0.06)，(0.52±0.05)；t＝6.29，9.31，均P<0.05]和Syn[(1.12±0.08)，(0.95±0.06)，(0.90±0.07)；t＝3.10，4.04，均P<0.05]蛋白的表达情况明显下降；其中，与CUMS组相比，MS＋CUMS组的PSD-95的蛋白表达更低[(0.74±0.06)，(0.52±0.05)；t＝0.93，P<0.05]。结论母婴分离联合CUMS应激造模能诱发大鼠出现抑郁样行为，降低海马突触可塑性相关蛋白的表达。

简介：目的：观察成年大鼠全脑缺血再灌注损伤对海马齿状回神经的影响，并探讨缺血性脑损伤后神经发生的相关机制。方法：采用4支血管闭塞法建立大鼠全脑缺血模型，应用5－溴脱氧尿核苷（5-bromodeoxyuridine,BrdU)标记分裂细胞、观察全脑缺血－再灌注损伤后3、7、14、21d时大鼠海马齿状回神经体细胞的增殖速度。并应用免疫荧光双标记法结合激光共聚显微镜观察确定新生细胞的分化特点。结果：全脑缺血－再灌注损伤后齿状回神经前体细胞增殖速度在7－14d时明显增加，BrdU免疫阳性细胞数目与相应对照组比较，差异有显著性意义（P＜0．01）。21d时恢复正常水平。新生细胞大多迁移入颗粒细胞层，并分化为神经元。结论：缺血性脑损伤可增强每马齿状回神经发生，其机制可能与缺血引起的激素水平、神经递质、神经营养因子浓度改变以及齿状回局部微环境变化有关。

简介：目的研究成年大鼠局灶性脑缺血损伤(脑梗死)后康复训练对海马结构中内源性神经干细胞增殖的影响,探讨脑梗死后康复训练使神经功能改善的理论基础.方法采用线栓法造成成年大鼠永久性MCAO(middlecerebralarteryocculsion),形成脑梗死动物模型.大鼠脑梗死24小时后,随机分为梗死对照组和梗死后康复训练组.康复训练组每天进行平衡木、转棒、滚笼训练,对照组不进行训练饲养于标准笼中.运用免疫组化方法,通过神经上皮干细胞蛋白即nestin标记神经干细胞,观察、比较脑梗死后7天、14天、21天时两组大鼠海马结构中nestin阳性细胞分布和数量的变化及差异.结果脑梗死后两组大鼠梗死侧海马结构中nestin阳性细胞均较对侧显著增多,海马附近的侧脑室后角与CA1区之间及齿状回中阳性细胞密集,其中脑梗死后7天阳性细胞最多,以后逐渐减少.脑梗死后7天及14天康复训练组大鼠梗死侧海马结构中nestin阳性细胞数较对照组显著增加(P＜0.01),脑梗死后21天两组无显著性差异(P＞0.05).结论康复训练可以促进成年大鼠局灶性脑缺血损伤(脑梗死)后海马结构中神经干细胞增殖水平上调,这可能是脑梗死后康复训练有助于缺损的神经功能恢复的一个机制.

简介：目的：研究硫酸锌预处理对成年大鼠缺氧／复氧心肌细胞超微结构的影响。方法：分离培养SD成年大鼠心肌细胞，建立心肌细胞缺氧／复氧损伤模型，将细胞随机分为正常组（N），缺氧复氧组（H／R），缺氧预处理组（HP），硫酸锌（ZnSO4）预处理组（ZnP），分别进行相应处理，然后用透射电镜对各组心肌细胞超微结构进行观察，并进行线粒体评分。结果：N组、HP组、ZnP组超微结构优于H／R组，线粒体评分较H／R组低（P〈0．05），HP组、ZnP组超微结构变化相似且线粒体评分无统计学差异，但均高于N组（P〈0．05）。结论：缺氧／复氧可造成成年大鼠心肌细胞超微结构的损伤，ZnSO4预处理、缺氧预处理均能减轻这种损伤，且两者效果相当。

简介：应用Disector方法研究一侧肾切除成年大鼠留存肾肾小球的形态计量学改变。结果表明，成年SD大鼠行一侧切除术后四周，留存肾（右）肾小球平均体积较假手术对照组（右肾）增加43％（分别为6．49±1．15×10^5μm^3，4．55±1．00×10^5μm^3，P＜0．05）全肾体积增加49％（P＜0．01），肾小球体密度没有改变（分别为5．58±0．22×10^-2,5．51±0．44×10^-2,P=0.7790)；肾小球数密度较正常对照组减少36％（分别为79．9±13．3mm^-3，125．6±28．2mm^-3,P<0.05)，全肾（右）肾小球总数没有改变（2．55±0．33×10^4，2．53±0．45×10^4，P＝0．9500）。提示成年及成年以后肾切除，留存肾肾小球功能的代偿主要依赖于体积增大以增加滤过面积，肾小球平均体积与全肾体积增加相仿，肾小球的代偿性生长不包括肾小球数量的增加。

简介：

简介：我又回到了这座小镇。我并不是这里人，只是在这里上了初中。自从我中考考上了市里的高中，就再也没有回来过。小镇上有一个小小的火车站，只有最慢的绿皮火车才会在这里停留二三分钟。车站前简陋的小卖部鲜有人光顾，昏暗破旧的招待所前挂着“住宿”的字样。烟尘的味道唤醒了我大脑里的某个回路，像血液一下流入麻木的器官。街道边有些店面的招贴画还和当年一样，细看，却早换了主人。

简介：   【摘要】本文主要通过分析我国成年监护制度的现状，基于我国逐渐步入人口老龄化现状，通过研究德国有关成年监护制度的变迁从中获得借鉴，并得出对于解决我国成年监护问题的启示，最后综合全文提出有关人口老龄化背景下成年监护制度的建议。

简介：摘要目的探索ω3-长链多不饱和脂肪酸(ω3-PUFA)膳食干预对早期过度营养大鼠成年期白色脂肪组织线粒体功能的影响和机制。方法应用小窝鼠模型，形成营养过度组(SL组，3只/窝)或正常营养组(NL组，10只/窝)，断奶后给予正常饮食或ω3-PUFA饮食(SL-FO组)，喂养至13周。定期测量大鼠摄食量、体重和直肠温度，13周进行动物能量代谢监测；分别于3周、13周处死，收集皮下脂肪组织。分离小鼠腹股沟皮下前脂肪细胞诱导分化，并在分化晚期给予50 μmol/L二十碳五烯酸(EPA)干预48 h。检测脂肪组织和脂肪细胞线粒体相关基因的mRNA和蛋白表达水平，以及线粒体拷贝数和细胞耗氧率。结果3周时，SL组大鼠体重、摄食量、脂肪细胞面积均大于NL组，体温低于NL组并持续到13周；13周时，SL组大鼠耗氧量、CO2产出量、产热量均低于NL组；同时3周和13周脂肪组织的线粒体功能相关基因解耦联蛋白1(UCP1)、肉毒碱棕榈酰转移酶1(CPT1)、沉默信息调节蛋白1(SIRT1)及线粒体生物合成调控基因过氧化物酶体增殖物激活受体γ共激活因子1α(PGC1α)表达均显著降低(P<0.05)。断乳后ω3-PUFA膳食能减低SL大鼠体重增加，提高白色脂肪UCP1蛋白表达，恢复能量代谢水平和线粒体功能相关基因表达。体外EPA干预，脂肪细胞线粒体拷贝数增加，线粒体生物合成和功能相关基因mRNA和蛋白表达水平提高，线粒体基础耗氧率和质子漏增加(P<0.05)。结论ω3-PUFA能改善因早期过度营养而降低的大鼠皮下白色脂肪线粒体功能和生物合成，可能是鱼油膳食阻止早期过度营养程序化，恢复产热代谢的重要机制。

简介：目的通过观察不对称牵引引起的成年SD大鼠髁突软骨下骨组织形态学变化,了解关节外不对称机械应力对髁突软骨下骨的影响.方法选用10周龄雄性SD大鼠220只（随机分为轻力组104只、重力组104只、对照组12只）,实验组动物使用关节外固定加力装置,分别施加0.39、1.18N,加力28d拆除加力装置.在3、7、14、28、31、35、42、56d取得标本,对髁突软骨的形态、骨小梁密度进行观察分析并进行统计学处理.结果正常髁突软骨下骨骨小梁连续,与髁突表面垂直以顺应髁突的力学环境,在负荷加载后出现骨小梁形态和排列变化,密度发生相应波动.结论髁突软骨下骨在外力刺激下,出现排列和骨小梁密度的变化以适应变化的机械应力环境.