简介：观察大鼠同种异体穿透性角膜移植后无干预下角膜新生血管的生长演变。方法：SPF级雌性SD大鼠34眼行同种异体穿透性角膜移植，术后4，7，15和30d在显微镜下观察角膜新生血管的生长情况，通过公式C／12×3．14×[r^2-（r-I）^2]计算角膜新生血管的面积。结果：在移植的34眼中出现新生血管的29眼（85％）。新生血管最初环角膜缘呈毛刷状生长，后向角膜中央蔓延，为扭曲粗大的血管，末端呈树枝状分支。高峰时期交叉密布成网状，以后逐渐萎缩。角膜移植后4，7，15和30d角膜新生血管平均面积分别为11．8±3．5mm^2，18．5±4．0mm^2，14．4±4．3mm^2和6．0±1.8mm^2，总体平均面积为12．7±1．9mm^2；新生血管面积占角膜面积百分比值分别为30．8％±8．7％，65．3％±12．8％．59．4％±14．5％和36．2％±10．9％，总体为48．7％±6．4％。结论：大鼠同种异体穿透性角膜移植后角膜新生血管在第4d时出现，7d时面积达最大值；以后逐渐下降，30d时约降至7d时面积的1／2。

简介：摘要目的探讨眼表应用芦荟多糖对SD大鼠角膜新生血管(CNV)的作用。方法建立大鼠CNV模型，分为3组高浓度芦荟多糖组局部点眼；低浓度芦荟多糖组局部点眼；对照组给予生理盐水。使用NIH图像分析软件分析角膜荧光染色图片观察各组CNV的面积。结果第7天时，对照组CNV血管粗大、密集，交织成网状；低浓度组CNV较短，血管稀疏、细长；高浓度组CNV较短，血管较稀疏、细小。3个组CNV面积比较差异均有统计学意义(P<0．01)。结论芦荟多糖能抑制角膜CNV，且随浓度增加作用加强。

简介：摘要目的探讨不同水平高胆红素血症对新生大鼠心肌的影响。方法选取7日龄新生SD大鼠96只，随机分为对照组（n=32，腹腔注射生理盐水0.5 ml）、实验1组（n=32，腹腔注射胆红素溶液100 mg/kg）和实验2组（n=32，腹腔注射胆红素溶液200 mg/kg）。分别设置0 h、8 h、24 h和48 h 4个时间点，每个时间点8只大鼠。记录大鼠一般情况，测定每个时间点大鼠血清总胆红素（total serum bilirubin，TSB）、心肌肌钙蛋白Ⅰ、心型脂肪酸结合蛋白和B型利钠肽水平；摘取心脏，制作病理切片，镜下观察心肌病理学改变；检测半胱氨酸蛋白酶3（caspase-3）、B细胞淋巴瘤2（B-cell lymphoma-2，bcl-2）和bcl-2相关X蛋白（bcl-2-associated X protein，bax）。应用SPSS 20.0统计软件分析，选用两因素方差分析法。结果在实验1组内和实验2组内，8~48 h TSB［（20.8±3.0~36.5±10.4）μmol/L和（31.9±12.3~67.4±19.0）μmol/L］比0 h［（8.4±2.1）μmol/L和（9.1±2.9）μmol/L］分别升高2.5~4.4倍和3.5~7.4倍。在各时间点3组大鼠心脏组织病理均无明显改变。在48 h时间点，随着TSB水平升高，凋亡相关蛋白caspase-3和bax表达增加，bcl-2表达减少；除实验1组bcl-2灰度值与对照组相似（P=0.255）外，其余各组蛋白灰度值两两比较，差异均有统计学意义（P<0.05）。在实验2组，随着高胆红素血症持续时间延长，caspase-3和bax表达增加，bcl-2表达减少；除8 h亚组bax灰度值与12 h亚组相似（P=0.820）、8 h亚组bcl-2灰度值与0 h亚组相似（P=0.064）外，其余各时间点蛋白灰度值两两比较，差异均有统计学意义（P<0.05）。在8 h、24 h和48 h，实验1组和实验2组心肌肌钙蛋白Ⅰ均高于对照组［（543.5±167.7、675.1±162.4、584.4±125.2）ng/L和（465.7±107.2、769.4±202.1、497.1±100.8）ng/L比（361.7±102.4、324.5±170.5、377.8±65.2）ng/L］，差异均有统计学意义（P<0.05），实验1组和实验2组之间差异均无统计学意义（P>0.05）。在各时间点3组间心型脂肪酸结合蛋白和B型利钠肽差异均无统计学意义（P>0.05）。结论高胆红素血症能诱导新生大鼠心肌细胞凋亡，且呈浓度和时间依赖性，但对大鼠心脏组织病理结构无明显影响；高胆红素血症对新生大鼠心肌有轻微损伤，但损伤程度与TSB升高程度无相关性，且对大鼠B型利钠肽无明显影响。

简介：摘要目的探讨宫内缺氧对新生大鼠肠道菌群的影响。方法构建大鼠宫内缺氧模型，采集生后首日及第7日宫内缺氧及正常新生大鼠肠道内容物，分为对照1 d组、对照7 d组、宫内缺氧1 d组、宫内缺氧7 d组，应用高通量测序技术对4组样本进行16S rRNA基因测序，对测序结果进行生物信息分析，比较组间菌群多样性、丰富度及组成结构的差异。结果（1）宫内缺氧1 d组肠道菌群Alpha多样性高于对照1 d组，代表菌群丰富度的sobs指数（114.5±35.6比50.5±21.3）、chao指数（135.6±38.5比73.9±28.8）大于对照1 d组，差异有统计学意义（P<0.05）；宫内缺氧7 d组sobs、ace、chao、simpson指数低于对照7 d组，shannon指数高于对照7 d组，但差异均无统计学意义（P>0.05）。（2）门和属水平上，宫内缺氧1 d组优势菌群分别为厚壁菌门和链球菌属，对照1 d组分别为变形菌门和埃希志贺氏菌属。宫内缺氧7 d组与对照7 d组之间肠道菌群的差异较首日两组之间的差异有所减小；与宫内缺氧1 d组相比，宫内缺氧7 d组埃希志贺氏菌属占比增加，链球菌属占比降低。结论宫内缺氧改变了新生大鼠肠道菌群的初始定植，影响了新生大鼠肠道菌群的丰富度及结构组成。

简介：铅通过消化道和呼吸道进入机体后很难降解,对发育中的神经系统可造成蓄积的、不可逆的危害性,导致儿童行为和智商的发展障碍。本研究拟采用新生Wistar大鼠,观察铅损伤对体格生长及神经行为的影响,其结果报告如下。

简介：目的：探讨新生大鼠心肌细胞的分离和培养方法。方法：应用0．0625％的胰蛋白酶重复消化出生第2d乳鼠的心肌组织多次，收集的细胞用含10％胎牛血清的DMEM培养基中和，用差速贴壁分离法分离．在以溴脱氧尿嘧啶（Brdu）纯化心肌细胞后置CO2培养箱孵育7d。结果：分离1只乳鼠获得的心肌细胞产量约为140万个，且有活力心肌细胞占90％以上；培养4～6h的乳鼠心肌细胞开始贴壁生长，12～24h明显增殖，3～4d后细胞融合成片；心肌细胞由圆形变为梭形、星形、多角形。并出现自发性节律性搏动。结论：本研究应用的心肌细胞原代培养方法可获得高产量、高活力的心肌细胞，是一种可靠的心肌细胞培养方法。

简介：目的对新生大鼠耳蜗前体细胞进行分离、培养和鉴定。方法从出生7天的大鼠耳蜗中分离、培养前体细胞，用免疫细胞化学的方法对前体细胞进行鉴定；血清诱导分化后鉴定分化潜能，进一步了解其多向分化特性。结果原代培养的细胞，培养1d后即可见“细胞球”。细胞球内大部分细胞呈nestin、musashil、pax2和BrdU阳性，表明其具有自我更新及有丝分裂的能力。细胞球经诱导分化14d后，对分化细胞行免疫细胞化学鉴定，发现分化细胞表达毛细胞标志物myosinVIIA和phalloidin，表达成熟神经元标志物NeuN，表达不成熟神经元标志物Tujl，表达星形胶质细胞标志物GFAP，表达少突胶质细胞标志物galactocerebroside，以及谷氨酸能神经元标志物GluR-1，证明其具有多向分化潜能。结论本实验证明耳蜗前体细胞具有神经干细胞的多向分化潜能，为研究通过基因治疗的方法促进耳蜗神经细胞增殖提供了一种体外模型。

简介：目的研究改良体外小胶质细胞分离培养的方法及效果。传统法存在动物用量大、成本高且细胞培养时间长等局限。方法结合消化试剂组合和手摇震荡法培养分离小胶质细胞;同时采用Iba-1免疫荧光法进行细胞鉴定和纯度分析,台盼蓝染料法进行活力检测以及脂多糖刺激比较不同状态的小胶质细胞。结果改良法可在4d内稳定获得小胶质细胞>1.0×10^6个/60mm培养皿,纯度≥98%,活力>98%,较传统法在动物用量、总成本和培养时间分别减少了2、3.2、1.5倍。结论改良法可减少动物用量、降低成本,缩短细胞培养时间;为研究小胶质细胞的生物学功能和中枢神经系统疾病机制建立了一种稳定、简便、高效的细胞模型。

简介：摘要目的探讨丁酸钠在活体新生SD大鼠肠屏障功能中的保护作用，建立丁酸钠对活体肠黏膜作用的量效关系。方法将出生后9 d龄的新生SD大鼠按照随机数字表法分为5组，其中4组使用丁酸钠(sodium butyrate，NaB)，浓度分别为20 mmol/L、40 mmol/L、80 mmol/L、160 mmol/L等4组，对照组使用0.9%生理盐水；经回肠灌注不同浓度的NaB作用1 h后取回肠组织，在尤斯灌注系统(Ussing Chamber)上测定跨上皮电阻(transepithelial electrical resistance，TER)值，苏木精-伊红(HE)染色观察病理学及炎症损伤情况，实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)法检测紧密连接蛋白(Occludin、ZO -1)的mRNA表达量，Western blot法检测Occludin、ZO -1蛋白的表达水平。结果尤斯灌注系统测得对照组在30 min、60 min、120 min时的相对TER值(各个时间点测得的TER值除以0 min测得TER值得到的百分比值)分别为(87.36±1.88)、(85.98±0.99)、(101.03±1.47)，20 mmol/L组分别为(83.45±2.97)、(107.24±5.35)、(101.44±3.96)，40 mmol/L组分别为(126.07±3.48)、(140.54±3.64)、(100.50±4.64)，80 mmol/L组分别为(102.24±4.60)、(134.55±7.80)、(106.76±8.82)，160 mmol/L组分别为(84.80±2.97)、(78.16±2.89)、(67.11±4.07)；使用不同浓度NaB作用30 min，与对照组相比，40 mmol/L组的TER值明显增加(P<0.05)，作用1 h时，40 mmol/L组与80 mmol/L组的TER值明显高于对照组、20 mmol/L及160 mmol/L组(P<0.05)，但二者的差异无统计学意义(P>0.05)。使用不同浓度NaB作用1 h后，根据损伤分级评分(0～5分)结果，160 mmol/L组(2.16±0.75)分，较对照组(0.33±0.51)分损伤明显(P<0.01)，余各组损伤不明显(P>0.05)。40 mmol/L组及80 mmol/L组肠黏膜组织Occludin蛋白mRNA(1.80±0.31、2.13±0.90)表达量较对照组(1.01±0.21)上调，差异具有统计学意义(P<0.05)，蛋白表达水平(0.58±0.04、0.73±0.01)较对照组(0.24±0.01)明显升高，差异具有统计学意义(P<0.05)；而ZO -1蛋白mRNA(1.36±0.24、1.45±0.58)表达量较对照组(1.01±0.11)上调不显著，差异无统计学意义(P>0.05)，蛋白表达水平(1.46±0.04、1.34±0.07)较对照组(1.07±0.05)亦明显升高，差异具有统计学意义(P<0.05)；160 mmol/L组Occludin和ZO -1蛋白mRNA(1.27±0.47、0.92±0.25)表达量较对照组的差异无统计学意义(P>0.05)，而蛋白表达水平(0.47±0.01、2.90±0.04)均高于对照组，差异具有统计学意义(P<0.01)。结论NaB对活体新生SD大鼠肠黏膜的作用具有浓度依赖性，40 mmol/L或80 mmol/L的NaB能增强肠黏膜屏障的功能，这可能与肠黏膜组织Occludin和ZO -1蛋白的表达增加有关。

简介：结果缺氧组新生鼠海马巢蛋白免疫组化阳性细胞的积分光密度（IOD）值较对照组增加［IOD缺氧组,当归治疗组新生鼠海马巢蛋白免疫组化阳性细胞的IOD值较缺氧组减弱［IOD治疗组,本实验发现应用当归注射液组新生大鼠神经干细胞巢蛋白免疫反应阳性细胞数量较缺氧组减少

简介：结果缺氧组新生鼠海马巢蛋白免疫组化阳性细胞的积分光密度（IOD）值较对照组增加［IOD缺氧组,当归治疗组新生鼠海马巢蛋白免疫组化阳性细胞的IOD值较缺氧组减弱［IOD治疗组,本实验发现应用当归注射液组新生大鼠神经干细胞巢蛋白免疫反应阳性细胞数量较缺氧组减少

简介：目的观察原位注射新生大鼠肝细胞构建的工程化肝组织对实验性肝纤维化大鼠血清和肝组织学的影响，探讨其抗肝纤维化的作用。方法用四氯化碳制成实验性肝纤维化造模大鼠，肝脏原位多点注射工程化肝组织，3周后测定血清肝功能并行肝组织学检查。结果原位注射组大鼠肝功能较单纯假手术组大鼠有改善，且具有显著差异（P〈0．05），HE染色提示纤维化明显改善。结论肝脏原位多点注射新生大鼠肝细胞的工程化肝组织能改善大鼠肝纤维化进程，有一定抗肝纤维化作用。

简介：摘要目的评估缺氧缺血(HI)自我复苏的新生SD大鼠模型外周血微小RNA(miRNA)指标。方法3只孕鼠所产幼鼠按窝别分为3组，A组为空白对照组，B组为HI组，C组备用。采用高通量深度测序方法比较对照组和HI组新生4日龄SD大鼠外周血中miRNA的表达谱。应用生物信息学分析研究这些差异表达的miRNA。采用基因本体论(GO)和京都基因与基因组学百科全书(KEGG)分析方法预测相关的细胞信号通路和功能。通过miRBD预测miRNA及与缺氧缺血性脑病(HIBD)相关的靶基因。应用HE染色观察脑组织病理变化。结果经外周血深度测序后可得到成熟miRNA序列为1 049种。A组miRNA种类为525种；HI组miRNA种类为524种；其中A组有27种miRNA与HI组存在差异，且2组间miRNA种类呈高度相关。HI新生大鼠外周血中有38个miRNA表达异常，并存在显著差异表达(2-ΔΔCt值>2.5，P< 0.05),其中21个miRNA显著过表达，17个显著低表达。KEGG通路富集分析和GO分析显示这些差异的miRNA与谷氨酸能突触通路、髓鞘脂类代谢、神经活性配体-受体相互作用和血管上皮生长因子(VEGF)信号通路与缺氧/缺血诱导的脑损伤有关，并且过度活化。2组间幼鼠脑组织未见皮质及胼胝体下白质病变、脑室扩大、灰质神经元排列紊乱和明显凋亡。结论HI自然复苏模型大鼠外周血中miRNA差异表达提示，miRNA对缺氧缺血有积极的应答。存在高度显著差异的miR-200家族、miR-471家族、miR-429、miR-216和miR-871，与神经系统损伤分子生物学机制有关，有望成为HIBD或HI新的生物学诊断指标，对HI新的治疗靶点的研究探索是有益的。

简介：目的了解有糖尿病基础的机体烫伤后，创面新生血管化程度与创面难以愈合的关系。方法将sD大鼠分成对照组和以链脲佐菌素诱导的糖尿病组，每组50只。2组大鼠均造成20％TBSA的深Ⅱ度烫伤，于伤后即刻及1、3、7、14和21d取创面组织，行组织学观察评分，并计算创面愈合率；同时采用免疫荧光双标记法检测创面组织的新生血管化程度及血管内皮细胞数量。结果糖尿病组大鼠创面组织评分及创面愈合率均低于对照组；糖尿病组大鼠各时相点新生血管化程度较对照组明显降低（伤后7d，糖尿病组为12．00±1．40、对照组为60．00±3．00，P〈0．01）。2组大鼠各时相点创面血管内皮细胞数量差异不明显，但糖尿病组大部分血管内皮细胞未形成功能性微血管。结论糖尿病深Ⅱ度烫伤难愈创面虽血管内皮细胞增殖活跃但仍血供不良，其机制与功能性微血管形成障碍有关。

简介：心复康对血管新生数目CD31表达的影响模型组CD31阳性细胞数量较假手术组表达升高,心复康对心肌组织VEGF和bFGF表达的影响与假手术组比较,探讨中药复方心复康对心肌梗塞大鼠心肌血管新生的作用

简介：摘要目的探讨不同性别缺氧缺血性脑损伤（HIBI）新生大鼠脑发育的差异。方法2018年1月1日至12月31日，新生7日龄SD大鼠60只（雌性30只、雄性30只），按随机数字表法将大鼠分为HIBI组40只（雄性20只、雌性20只），对照组20只（雌性10只、雄性10只）。HIBI组大鼠采用Rice-Vannucci方法制作缺氧缺血性脑损伤模型，分离左侧颈总动脉，双重结扎后切断，再置于8%O2和92%N2的混合气体的缺氧箱中90 min；对照组不进行任何处理。缺氧缺血处理后2周，应用步迹分析评价各组大鼠21日龄运动发育功能，头颅磁共振成像（MRI）测量大鼠脑组织的残存脑容量，透射电镜下分析运动区域神经元突触结构的破坏程度。采用方差分析和χ2检验进行组间统计学比较，同组步长及趾间距比较采用配对t检验。结果HIBI-雄性组大鼠的病死率明显高于HIBI-雌性组[20%（4/20）比10%（2/20），χ2=40.000，P=0.001]；HIBI-雄性组和HIBI-雌性组大鼠脑损伤对侧（右侧）步长及趾间距均明显小于对照组[（7.5±0.3）和（7.9±0.5）比（8.2±0.5）cm，（0.9±0.1）和（1.0±0.0）比（1.1±0.1）cm，F=9.605、71.437，P均<0.01]；且HIBI-雄性组均明显小于雌性组（P均<0.01）。HIBI-雄性组和HIBI-雌性组大鼠右侧步长及趾间距均明显小于同组左侧步长[（8.3±0.4）和（8.3±0.5）cm，t=5.289、10.580，P=0.001、0.010]及趾间距[（1.1±0.1）和（1.1±0.1）cm，t=7.953、6.435，P均<0.01]。HIBI-雄性组与HIBI-雌性组的残存脑容量明显小于对照组[（67±4）%和（75±5）%比100%，F=406.122，P<0.01]，其中HIBI-雄性组小于HIBI-雌性组（t=-5.281，P<0.01）。HIBI-雄性组和HIBI-雌性组左侧中央前回神经元突触间隙均明显大于对照组[（23.4±1.3）和（19.7±1.6）比（18.9±0.6）nm，F=71.719，P<0.01]，其中HIBI-雄性组大于HIBI-雌性组（t=7.645，P<0.01）。结论雄性新生大鼠更易受到HIBI的危害，具有更严重的脑损伤程度及偏瘫症状，对不同性别HIBI患儿应采用不同的更合适的治疗策略。

简介：目的：研究柚皮素对激光诱发大鼠脉络膜新生血管形成（CNV）、高眼压兔眼血流和缺血大鼠眼视网膜功能恢复的作用。方法：选择雄性棕色挪威大鼠，采用激光诱发Bruch膜破裂后，予10g/L（20mg／kg）柚皮素，1次／d，持续4wk；光凝后2，4wk分别做眼底荧光血管造影，评估CNV的形成。采用彩色微球技术、眼电生理技术检测兔眼血流和大鼠视网膜功能恢复。结果：与对照组比较，10g／L柚皮素能明显增加高眼压兔眼脉络膜血流（P〈0．05），能明显增加缺血大鼠眼视网膜功能恢复（P〈0．05），能明显减轻光凝点荧光素渗漏（75．8％～95．0％，P〈0．01）。结论：柚皮素能抑制激光诱发大鼠络膜新生血管形成；增加高眼压兔眼脉络膜血流；增加缺血大鼠眼视网膜功能恢复。

简介：摘要目的观察白杨素对缺血缺氧性脑病模型新生大鼠的脑保护作用，探讨其作用机制。方法将大鼠按随机数字表法分为假手术组、模型组和白杨素低、高剂量组，每组12只。除假手术组外，其余各组大鼠制备缺血缺氧性脑病大鼠模型。模型制作完成后，白杨素低、高剂量组立刻腹腔注射白杨素30、60 mg/kg，假手术组和模型组腹腔注射等体积生理盐水，1次/d，连续给药4 d。采用HE染色观察各组大鼠脑组织病理学改变，生化测定脑组织SOD、CAT、MDA水平，采用Western blot法检测脑组织血红素加氧酶-1(heme oxygenase-1, HO-1)、转录因子NF-E2相关因子2(NF-E2-related factor 2, Nrf2)蛋白表达。结果假手术组大鼠神经细胞排列规则有序，胞核圆形，核仁明显；模型组大鼠脑组织水肿，神经细胞排列松散；白杨素低、高剂量组神经细胞变性、坏死较模型组减轻。与模型组比较，白杨素低、高剂量组大鼠脑组织中SOD[(55.74±5.14)U/mg、(69.84±5.05)U/mg比(37.64±6.41)U/mg]、CAT[(2.44±0.22)U/mg、(2.59±0.42)U/mg比(2.08±0.37)U/mg]活性升高(P<0.05)，MDA[(3.74±0.05)mmol/mg、(2.60±0.18)mmol/mg比(4.35±0.24)mmol/mg]水平降低(P<0.05)；脑组织HO-1[(0.43±0.08)、(1.02±0.15)比(0.14±0.07)]、Nrf2[(0.48±0.07)、(0.79±0.09)比(0.26±0.08)]蛋白表达增加(P<0.05)。结论白杨素可减轻缺血缺氧性脑病大鼠神经损伤，其机制可能与上调HO-1、Nrf2蛋白表达有关。

简介：摘要目的探讨丙泊酚是否对新生大鼠海马线粒体造成损伤，以及兴奋性氨基酸受体AMPA受体的调控作用。方法将48只7日龄SD大鼠按随机数字表法分为对照组、丙泊酚组、丙泊酚+AMPA受体激动剂AMPA组（丙泊酚+AMPA组）和丙泊酚+AMPA受体抑制剂CNQX组（丙泊酚+CNQX组），每组12只。丙泊酚各组大鼠腹腔注射30 mg/kg丙泊酚，对照组注射生理盐水3 mg/kg；各组均于首次给药后每隔20 min给予首剂量的1/2，每日3次，连续注射3 d。丙泊酚+AMPA组和丙泊酚+CNQX组分别于首次给药后经左侧脑室注射1 g/L的AMPA或CNQX 5 μL。各组给药3 d后处死大鼠取脑组织，采用蛋白质免疫印迹试验（Western blotting）检测海马AMPA受体谷氨酸受体（GluR1、GluR2）亚单位的总蛋白（T）及膜蛋白（M）表达量，并计算二者比值（M/T）；采用Western blotting检测线粒体动力相关蛋白-1（DRP-1）、磷酸化DRP-1（p-DRP-1）和线粒体融合蛋白2（Mfn2）表达；同时测定海马三磷酸腺苷（ATP）含量及ATP相关酶活性。结果与对照组相比，丙泊酚处理后大鼠海马GluR1的表达及其M/T比值均明显升高，而GluR2的表达及其M/T比值则明显降低，ATP含量及ATP相关酶活性明显下降，同时DRP-1表达及其磷酸化水平明显升高，而Mfn2表达明显下降，说明反复多次腹腔注射30 mg/kg丙泊酚可导致神经细胞线粒体损伤。与丙泊酚组比较，加入AMPA激动剂后，GluR1表达及其M/T比值进一步升高〔T-GluR1蛋白（T-GluR1/β-actin）：2.41±0.29比1.72±0.11，M-GluR1蛋白（M-GluR1/β-actin）：1.18±0.15比0.79±0.09，M/T比值：0.78±0.12比0.46±0.08，均P<0.01〕；GluR2表达明显升高〔T-GluR2蛋白（T-GluR2/β-actin）：0.65±0.13比0.30±0.14，P<0.01；M-GluR2蛋白（M-GluR2/β-actin）：0.17±0.05比0.13±0.07，P>0.05〕，但其M/T比值进一步降低（0.27±0.10比0.41±0.08，P<0.05）；ATP相关酶活性进一步降低，ATP含量进一步下降（μmol/g：0.32±0.07比0.70±0.10，P<0.01）；线粒体DRP-1表达及其磷酸化水平进一步升高〔DRP-1蛋白（DRP-1/GAPDH）：2.75±0.36比1.70±0.19，p-DRP-1蛋白（p-DRP-1/GAPDH）：0.99±0.14比0.76±0.15，均P<0.05〕，Mfn2表达进一步下降（Mfn2/GAPDH：0.23±0.12比0.54±0.12，P<0.05），说明AMPA激动剂增加了大鼠神经细胞膜上AMPA受体GluR1亚单位的表达，同时使GluR2向细胞内移动，从而加剧了丙泊酚所致的线粒体损伤。而加入AMPA抑制剂后，与丙泊酚组比较，GluR1表达及其M/T比值均明显降低〔T-GluR1蛋白（T-GluR1/β-actin）：0.99±0.14比1.72±0.11，M-GluR1蛋白（M-GluR1/β-actin）：0.21±0.07比0.79±0.09，M/T比值：0.21±0.07比0.46±0.08，均P<0.01〕；GluR2表达变化则不明显，但其M/T比值明显升高（0.59±0.09比0.41±0.08，P<0.05）；ATP酶活性明显升高，且ATP含量明显上升（μmol/g：0.87±0.12比0.70±0.10，P<0.05）；线粒体DRP-1表达及其磷酸化水平明显下降〔DRP-1蛋白（DRP-1/GAPDH）：1.18±0.17比1.70±0.19，p-DRP-1蛋白（p-DRP-1/GAPDH）：0.37±0.10比0.76±0.15，均P<0.05〕，而线粒体Mfn2表达则明显升高（Mfn2/GAPDH：0.78±0.10比0.54±0.12，P<0.05），说明AMPA抑制剂通过抑制GluR1亚单位的表达，促使GluR2亚单位向细胞膜移动，从而缓解了丙泊酚导致的大鼠脑组织线粒体产能及动力学损伤。结论连续3 d多次腹腔注射丙泊酚30 mg/kg，可引起7日龄新生大鼠海马AMPA受体GluR1亚单位表达升高且主要分布于细胞膜，GluR2亚单位表达下降且向细胞内移动，从而导致线粒体功能及动力学损伤；AMPA受体激动剂可加重上述损伤，而AMPA受体抑制剂可减轻这一损伤。

简介：摘要目的建立一种简单、稳定、高效的新生大鼠背根神经节神经元原代培养方法。方法摘取新生24hSD大鼠背根神经节，采用0.25%胰酶和0.1%Ⅳ型胶原酶消化，制成单细胞悬液，接种于Neurobasal/B27无血清培养液中。将培养3d的DRGn于倒置相差显微镜下进行形态学观察，扫描电镜行细胞形态学检测，应用β-tubulinⅢ进行免疫细胞化学染色，鉴定细胞纯度。结果体外培养的背根神经节神经元生长状态良好，纯度可达到(92±6)%。结论本实验方法简单、稳定、高效，可以获得高纯度的背根神经节神经元。