简介：摘要目的检测1例以先天性头发扭曲和感音性听力丧失为主要表现的Björnstad综合征（扭曲发综合征）患者的致病基因BCS1L的突变情况。方法收集患者临床资料，提取患者及其父母的外周血DNA，PCR扩增BCS1L基因全部外显子及侧翼序列并进行Sanger测序，测序结果与正常序列进行比对；取患者头发进行扫描电镜检查。结果患者BCS1L基因存在2处突变：①第4号外显子上存在杂合无义突变，即第144位密码子CGA→TGA，导致其编码氨基酸序列由精氨酸变为终止密码子（p.R144*），此为BCS1L基因突变导致Björnstad综合征新发现的致病突变位点，属国际首例；②第8号外显子上存在杂合错义突变，即第306位密码子CGC→CAC，导致其编码氨基酸序列由精氨酸变为组氨酸（p.R306H）。患者母亲仅在BCS1L基因第4号外显子发生c.430 C>T杂合突变（p.R144*），患者父亲仅在BCS1L基因第8号外显子发生c.917 G>A杂合突变（p.R306H）。扫描电镜显示，患者发干以不规则的间隔出现扁平、沟槽和沿长轴的扭曲。结论首次报道BCS1L基因第144位密码子CGA→TGA导致的编码终止为该基因突变导致Björnstad综合征的新发突变位点，BCS1L基因复合杂合突变与患者的临床表现相关，基因检测有助于Björnstad综合征的诊断。

简介：目的:探索建立一种利用核酸酶免疫试验中探针的熔解温度差异检测已知突变位点的方法.方法:目的靶基因经扩增后,5'末端标记洋地黄毒苷(digoxigenin,Dig)的等位基因探针与已结合在酶标板上的扩增产物杂交,其杂交的探针-DNA二聚体的碱基错配与未错配之间存在变性温度差异.选择适宜的熔解温度进行已知突变位点的检测,并利用酶联免疫吸附试验对标记探针进行识别、放大和结果判断.结果:实验结果表明,当熔解温度为37℃时,扩增产物的加样量为5μl/孔和检测探针加入量为10pmol/孔时所测得A450值为0.800～0.923.等位基因检测探针的熔解温度为53℃,P1、P2与靶DNA结合率分别为86%和16%.当P1、P2按不同比例杂合时,其与结合率存在着明显的线性关系(r=0.9985).从8例人类乙型肝炎病毒(HBV)DNA阳性的血清标本检测中证实1例酪氨酸-缬氨酸-天冬氨酸-天冬氨酸(YVDD)突变、3例野生型,其余4例可能是杂合型突变.结论:本法具较高的检测灵敏度,且其突出的特点是能检测出标本中杂合突变所占的比例,间接反映出患者体内突变的类型和比例.这对于疾病的诊断、治疗、预后评价等都具有较高的价值.

简介：摘要目的探讨120例湖南省汉族黄疸新生儿葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(glucose-6-phosphate dehydrogenase，G6PD)基因突变类型。方法采用Sanger测序技术对120例湖南省汉族黄疸新生儿进行G6PD基因检测并收集有关临床资料。结果该研究检测出61例患儿存在G6PD基因突变，共13种突变类型、12个突变位点，突变类型分别为c.1376G>T(p.Arg459Leu)37.70%(23/61)、c.1388G>A(p.Arg463His)31.15%(19/61)、c.1024C>T(p.Leu342Phe)8.20%(5/61)、c.95A>G(p.His32Arg)6.56%(4/61)、c.392G>T(p.Gly131Val)3.27%(2/61)、c.196T>A(p.Phe66Ile)1.64%(1/61)、c.1311C>T(p.Tyr437Tyr)1.64%(1/61)、c.227C>T(p.Thr76Ile)1.64%(1/61)、c.487G>A(p.Gly163Ser)1.64%(1/61)、c.871G>A(p.Val291Met)1.64%(1/61)、c.871G>A/1311C>T(p.Val291Met/p.Tyr437Tyr)1.64%(1/61)、c.1004C>A/1311C>T(p.Ala335Asp/p.Tyr437Tyr)1.64%(1/61)、c.1311C>T/IVS-11 93T>C 1.64%(1/61)，其中c.227C>T(p.Thr76Ile)为新发现突变类型。结论120例湖南省汉族黄疸新生儿G6PD基因突变常见突变类型为c.1376G>T(p.Arg459Leu)、c.1388G>A(p.Arg463His)和c.1024C>T(p.Leu342Phe)，对于临床高度怀疑G6PD缺乏症但酶活性检测正常的患儿，可采用基因检测明确诊断。

简介：摘要遗传性胰腺炎(hereditary pancreatitis)为临床急性或复发性胰腺炎的少见病因，本文1例反复发作3次急性胰腺炎的青年女性患者，在其囊性纤维化跨膜转导调节因子(CFTR)基因上发现一处c.374T>C杂合变异，临床表现为血脂肪酶明显升高。临床实践中对于年轻的反复发作急性胰腺炎或者慢性胰腺炎的患者，即便没有家族史可循，也应考虑到遗传性胰腺炎，二代基因测序检测可帮助诊断。

简介：【摘要】目的 分析耳聋-视网膜色素变性综合征（USH）的基本表型、致病基因及新突变位点。方法 对经诊断确诊的USH患者的资料及样本进行收集，开展全外显子测序操作与回顾分析，然后从中将致病基因、突变位点予以锁定，Sanger测序并对突变位点进行检验。结果 对先证者，从测序数据解读得知，USH2A基因是致病基因，于USH2A基因上，检出c.5459T＞C（p.M1820T）杂合错义突变。结论 对USH而言，USH2A基因突变为其致病原因，而其所引起的疾病有临床、遗传异质性特征，且突变不同，所引起的疾病表型也不同。

简介：突变选择窗（MSW）,是指抗菌药物防止细菌选择第一步耐药突变的最低浓度（防耐药突变浓度,MPC）与最小抑菌浓度（MIC）的浓度范围。当血清或组织液药物浓度低于MIC时,治疗无效但也不会导致细菌耐药突变体的富集;超过MPC时细菌要生长需同时具备两种或以上突变,因而不仅治疗成功并且也很难出现耐药突变体的选择性扩增;处于窗内时将选择出耐药突变菌,尽管临床治疗成功率很高,但会促使细菌耐药性的形成。

简介：摘要目的探究对结核分枝杆菌利福平耐药相关基因rpoB突变以PCR-反向点杂交法检测的效果。方法设计结核分歧杆菌rpoB基因引物，采用PCR-反向点杂交法对40例结核杆菌临床菌株耐药性进行检测，对照由DNA测序法检测的标准结核分歧杆菌（H37Rv）rpoB基因，确定rpoB基因的变异情况，对PCR-反向点杂交法的灵敏度和准确性作出评价。结果40株临床菌株中有11株利福平敏感株的基因序列与对照的H37Rv相同，剩下的29株耐药株中检测到变异基因27株，其特异性为100%，阳性率为93.1%。结论rpoB基因本身高度保守,但由于rpoB基因突变导致结核分枝杆菌对利福平耐药。本研究使用PCR-反向点杂交法针对rpoB基因高突变区设计引物，此方法快速、简便、准确,能有效监测临床标本中结核分枝杆菌,对临床早期诊治结核病有极大帮助。

简介：摘要目的探讨先天性遗传性角膜内皮营养不良（CHED）患者的致病基因突变位点。方法回顾性系列病例研究。收集2017年8月至2018年9月于复旦大学附属眼耳鼻喉科医院眼科就诊的6例CHED患者进行外周血基因组DNA全外显子组测序。患者均为男性，年龄7~29岁。基于本课题组前期已建立的候选突变筛选流程进行后续基因突变分析，并根据《美国医学遗传学与基因组学学会遗传突变分类标准与指南》，结合基因功能及相关文献报道确定致病突变位点，最后经Sanger测序法验证。结果本研究对6例CHED患者进行了全外显子组测序，在其中4例患者中检测出6个不同的SLC4A11基因突变，包括4个错义突变（p.Arg869Cys、p.Pro773Leu、p.Arg869His、p.Arg755Trp），1个移码突变（p.Phe713 fs），1个剪切位点突变（c.1330+1G>T）。新发现的移码突变的致病性等级为致病，剪切位点突变的致病性不明确。结论本研究鉴定得到6个CHED相关的致病基因突变位点，其中剪切位点突变c.1330+1G>T和移码突变p.Phe713 fs为新突变。（中华眼科杂志，2021，57：133-138）

简介：摘要1例因自幼双眼上睑抬起困难伴眼球运动受限患者就诊。检查发现双眼上睑下垂，眼球向各个方向转动受限。诊断为双眼先天性眼外肌纤维化。基因检测出1个致病基因突变位点KIF21A-ex20 c.2821C>T（p.Arg941Trp），为杂合错义突变。

简介：摘要目的明确耳聋基因筛查SLC26A4单杂合突变新生儿合并第二突变位点的情况，分析SLC26A4突变基因型与听力表型的对应关系。方法研究对象为2015年4月至2019年12月在北京市出生、晶芯九项或十五项遗传性耳聋基因芯片筛查结果为SLC26A4单杂合突变的新生儿个体，共850例，其中男468例、女382例。采用三步耳聋基因测序：第一步，SLC26A4基因全外显子及剪接位点测序；第二步，SLC26A4基因启动子、FOXI1基因和KCNJ10基因全外显子测序；第三步，SLC26A4基因拷贝数变异检测。对三步检测发现的所有合并第二突变位点者，采集新生儿听力筛查结果，并进行声导抗、听性脑干反应和听性稳态反应等听力学检查。对新发现或争议（意义不明）突变位点，检索DVD、ClinVar和Mutation Taster等国际耳聋基因数据库或软件，依据美国医学遗传学与基因组学学会（American College of Medical Genetics and Genomics，ACMG）指南，对突变位点的致病性进行预测。整理SLC26A4单杂合突变新生儿合并第二突变位点数据，分析SLC26A4基因型及听力表型的对应关系。结果850例患儿确诊年龄中位数为4个月。第一步850例患儿测序，共检出第二突变位点32例（3.76%，32/850），包括明确致病突变位点18例（2.12%，8/850）；第二步832例患儿测序，检出KCNJ10基因错义突变8例，未检出FOXI1基因错义突变及SLC26A4基因启动子异常；第三步824例测序结果均为阴性。合并明确第二致病突变位点者18例，其中新生儿听力筛查未通过16例（16/18），双耳均通过筛查2例（2/18）；听力损失程度：极重度听力损失18耳（18/36），重度听力损失13耳（13/36），中度听力损失5耳（5/36）；听力曲线类型：高频下降型17耳（17/36），平坦型14耳（14/36），无法判别3耳（3/36），U型2耳（2/36）。其他基因型22例，包括合并争议（意义不明）或新发现可能良性突变位点者9例、合并KCNJ10双基因杂合突变8例和同链双杂合突变5例，这22例患儿新生儿听力筛查均为双耳通过且听力诊断均为正常。结论本组新生儿耳聋基因筛查SLC26A4单杂合突变个体合并明确第二致病突变位点的概率为2.12%，均为点突变或小片段缺失，均确诊为中度及以上感音神经性听力损失，该结果可为SLC26A4突变的基因诊断和遗传咨询提供参考依据；合并KCNJ10基因突变者，在婴幼儿期均未出现听力损失，提示需进一步随访。

简介：摘要目的分析慢性乙型肝炎患者抗病毒治疗后耐药基因突变。方法收集100例接受过拉米夫定与阿德福韦酯联用治疗3年后的患者血清，聚合酶链反应(PCR)扩增耐药基因，对扩增产物测序，确定基因型。结果100例患者中拉米夫定耐药67例，占67.00%；阿德福韦酯耐药22例，占22.00%；替比夫定耐药10例，占10.00%；恩替卡韦耐药2例，占2.00%，替诺福韦0例，占0.00%。结论慢性乙肝患者接受过拉米夫定与阿德福韦酯联合抗病毒治疗后，替诺福韦、恩替韦卡有较强抗病毒活性。

简介：摘要目的分析家族性渗出性玻璃体视网膜病变(FEVR)一家系的临床表型和基因突变特点。方法采用家系调查研究方法，收集2019年10月于西安交通大学第一附属医院诊断为FEVR的1个汉族家系2代3名成员。对患者及其父母进行视力、眼压、裂隙灯显微镜和广角荧光素眼底血管造影(FFA)检查，采集3名成员外周血送检，应用高通量测序法筛选致病基因，针对检测出的变异位点进行Sanger测序验证，根据美国医学遗传学协会(ACMG)指南和Mutation Taster、Polyphen-2、PROVEN及REVEL软件对新发现的变异位点进行致病性分析。结果先证者，男，27岁，裸眼视力(UCVA)右眼1.0，左眼1.2，眼压正常，眼底检查可见双眼颞侧周边部视网膜血管迂曲扩张，FFA示双眼周边视网膜血管扩张成毛刷样改变并有无灌注区形成。先证者母亲51岁，最佳矫正视力(BCVA)双眼均为1.0，眼底检查可见左眼颞侧周边视网膜血管迂曲，FFA示左眼颞侧周边视网膜末梢血管荧光素渗漏。先证者父亲56岁，BCVA双眼均为1.0，眼底可见视盘周围萎缩环及豹纹状眼底，FFA未见眼底血管有明显荧光素渗漏。基因检测结果显示LRP5基因c.4110T>G(p.Cys1370Trp)和FSCN2基因c.1495G>A(p.Gly499Ser)2个新的突变位点。根据ACMG指南，c.4110T>G为临床意义未明的变异，Mutation Taster、Polyphen-2、PROVEN及REVEL软件预测该变异会对基因或基因产物造成有害影响，REVEL评分为0.93，可能为致病变异。结论LRP5基因c.4110T>G(p.Cys1370Trp)可能是引起FEVR的1个新的突变位点，丰富了LRP5基因的突变谱。

简介：目的报告GFM1突变所致疾病的临床特征及验证基因型和临床表型关系。方法回顾性分析1例门诊就诊的GFM1基因突变儿童的临床及基因突变资料,结合文献归纳GFM1基因突变的临床特点,构建编码线粒体翻译因子G1（mtEFG1）空间结构图,检验GFM1基因错义突变位置与临床表型关系的假说。结果患儿,女,6个月28d。生长发育迟缓,急性肝衰竭。体格检查：反应差,嗜睡,全身皮肤黏膜黄染,腹平软,肝脾肿大。辅助检查：总胆红素、直接胆红素、转氨酶、碱性磷酸酶、血清γ-谷氨酰转肽酶和血氨升高,白蛋白下降,凝血酶原时间延长,血糖下降,酸中毒,血乳酸升高,血浆氨基酸及酰基肉碱谱示血中多种氨基酸升高,尿有机酸检查提示酮尿,头颅MRI示双侧丘脑、大脑脚、基底节区、枕叶前内侧异常信号。GFM1基因的复合杂合突变,第5外显子c.688G〉A点突变致蛋白质改变为p.Gly230Ser;第14外显子c.1686delG的移码突变致蛋白质改变为p.Asp563Thrfs＊24。mtEFG1空间结构图显示,p.Gly230Ser处于蛋白周边位置,预测表现应该为脑型。结论1例携带GFM1基因复合杂合突变（c.688G〉A和c.1686delG）的中国儿童,其临床表现为急性肝衰竭,不支持以往GFM1基因错义突变导致蛋白周边位置的氨基酸改变时临床表现为脑型的假设。

简介：目的通过体外耐药肝癌细胞增殖抑制实验，证明双靶点突变蛋白Mur5S4TR针对X-连锁凋亡抑制剂(X-linkedinhibitorofapoptosis，XIAP)高表达的耐药肝癌细胞具有良好的增殖抑制效果，以获得有助提高临床疗效的新药物。方法使用Mur5S4TR对SK-HeP-1、HePG2、PLC/PRE/5、HeP3B、QGY-7701、HCCC-9810、RBE、Bel-7402、Li-7、SMMC-7721、HuH6、HuH7共12种耐药肝癌细胞进行体外增殖抑制实验.结果Mur5S4TR对12种耐药肝癌细胞的增殖抑制率呈正态分布，其增殖抑制率与英国国际标准物机构NIBSC提供的肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体标准物(Tumornecrosisfactorrelatedapotosisinducingligand)比对具有明显优势。结论本课题的研究证实Mur5S4TR对耐药肝癌细胞具有良好的增殖抑制作用，为耐药肝癌的治疗后续研究打下基础。

简介：目的评价检测rpoB基因突变在结核分枝杆菌耐利福平（I肝）耐药性测定中的应用价值。方法采用DNA序列分析法和聚合酶链反应-单链构象多态性（PER—SSCP）法对91株结核分枝杆菌临床分离株（其中药物敏感株35株，耐RFP或含耐RFP耐多药株56株）rpoB基因核心区域的突变情况进行检测。结果以结核分枝杆菌H37RV为对照，所有35株药物敏感株的rpoB基因均无突变，用DNA序列分析方法检测56株耐药株中53株发生突变，敏感性为94．6％（53／56），其中最常见的突变位点是531位丝氨酸和526位组氨酸。PER—SSCP检测56株耐RFP分离株中，52株rpoB基因SSCP图谱异常，其敏感性为92．9％（52／56）。结论DNA序列分析对判断结核分枝杆菌耐利福平非常有价值。PER—SSCP可初步筛选结核分枝杆菌RFP耐药性。

简介：随着奶牛业的迅速发展，奶牛的品质和产奶量不断提升。但是，由于科学的饲养管理措施跟不上，有的奶农单纯地为了提高奶产量，大量饲喂精料导致疾病的发生，特别是奶牛真胃变位。

简介：摘要：随着技术发展，焊接技术、焊接工艺以及焊接设备都逐渐强大起来，同时焊接方式也变得越来越复杂，焊接变位机的出现给焊接工作带来了很大的方便，焊接变位机是一种专用于焊接工艺的设备，用于在焊接过程中调整和定位工件。这种设备对于实现高质量、精确的焊接至关重要，尤其是在需要对大型或重型工件进行焊接时。它是目前焊接领域中必不可少的辅助设备之一，并且有着非常广泛的应用。本文主要对焊接变位机的定义和作用、焊接变位机的分类、技术要求以下面主要就焊接变位器的使用情况进行研讨。

简介：摘要目的了解本地区结核分枝杆菌异烟肼耐药基因katG和inhA的突变特征。方法利用基因芯片检测505例经鉴定为结核分枝杆菌的菌株异烟肼耐药基因，分析本地区katG和inhA基因突变特征。结果katG基因315位点突变频率为79%（83/105），inhA-15位点突变频率为22.9（24/105），其中katG基因315位点联合inhA-15位点突变频率为2%（2/105）。结论本地区MTB对异烟肼耐药基因突变中katG315（AGC→ACC）为最主要突变类型，inhA-15（C→T）次之。

简介：摘要目的了解本地区结核分枝杆菌利福平耐药基因的突变特征。方法利用基因芯片检测346例经鉴定为结核分枝杆菌的菌株利福平耐药基因，分析本地区利福平耐药基因突变特征。结果346例结核分枝杆菌中利福平耐药基因发生突变的例数为58例（16.7%）。利福平rpoB基因耐药位点分布如下531位点为58.6%，526位点为31.1%，511位点为6.9%，516位点为3.4%。结论本地区MTB对利福平耐药rpoB基因耐药位点以531位点最多，526位点次之。

简介：摘要目的对核苷酸类似物（NUCs）治疗慢性乙型肝炎（CHB）病人时出现的逆转录酶（RT）耐药突变现象进行分析，并针对rtA181耐药突变现象进行血清检测，观察其个体化再治疗的效果。方法以焦磷酸测序法（PCR）对489名CHB病人的HBVrt区中的十个耐药突变位点予以定理检测并进行突变分析，并对LAM+ADV组中的43名rtA181突变病人分组进行个体化再治疗，A组予以EDV治疗，B组予以LdT治疗，对比其临床疗效。结果（1）DNA类型为C型者占82.4%，B型者占17.6%,其中C型耐药变异率为56.6%，B型耐药变异率为43.0%；（2）265份显示与LAM、LdT、ETV以及ADV有显著相关性；（3）rtA181突变病人的HBVDNA水平为明显低于疗前水平，P<0.05；（4）对rtA181突变病人行个体化再治疗时，HBVDNA<6lgcopies/mL时的疗效更好，且ETV治疗的效果比LdT治疗好（P<0.05）。结论HBV耐药突变以M204与A181为主，对rtA181突变病人，加/换用ETV的疗效较好。