简介：目的：筛选出对孢子丝菌结合效率相对较高的探针。方法以50株纯培养的孢子丝菌及标准株为样本，以毛霉、烟曲霉、念珠菌各1株为阴性对照，用聚合酶链反应-酶联免疫法（PCR-ELISA）对已报道的5个孢子丝菌特异性探针（U26852、U26866、U26866′、M85053及AF117945）进行筛选。记录各探针与合成DNA片段杂交底物显色与否及酶免疫测定指数（EI）值。结果PCR产物测序证实5个探针均位于产物序列上；在相同的ELISA条件下，探针U26852显色最强，EI值最高。结论针对28SrRNA的探针U26852是目前与孢子丝菌结合效率相对较高的探针。

简介：聚合酶链式反应（PCR）技术的问世和发展是分子生物学研究领域中最重要的进步之一.在PCR技术中,DNA聚合酶起着至关重要的作用,从某种意义上说,DNA聚合酶的研究进展决定着PCR技术的发展趋势和应用范围,研究者们一直在努力探寻着酶学性能好、保真度高的PCR用DNA聚合酶.高中生物人教版选修1和选修3都对PCR技术的原理和过程作了详尽的介绍,但对热稳定DNA聚合酶的描述极少,仅仅提及Taq酶.因此,有必要对PCR用DNA聚合酶的基本类型和特点进行分析归纳.

简介：为获得南瓜ISSR最优扩增体系,为后续南瓜的遗传多样性分析和亲缘关系鉴定奠定基础,本研究以‘密本’南瓜为筛选体系材料,采用单因素试验,对ISSR反应体系的Mg2＋、dNTP、Taq酶、引物和DNA浓度等5个因素进行优化。研究结果表明,南瓜ISSR25μL最佳反应体系为：2.5μL10×Buffer,2.0mmol/LMg2＋,0.3mmol/LdNTP,1UTaq酶,0.48mmol/L引物,75ng的DNA。在此基础上,对筛选出的12条引物进行退火温度的优化,最终确定每条引物的最佳退火温度。利用该反应体系,选用引物891对85个南瓜品种进行所确立扩增体系的验证,结果显示扩增产物条带清晰明亮、多态性丰富,且特异性强、重复性好,表明本研究所确定的反应体系适用于南瓜的ISSR分子标记。

简介：目的：建立党参的ISSR-PCR反应体系,为今后利用ISSR标记技术进行党参鉴定及种质遗传多样性分析提供一个标准化程序.方法：采用试剂盒法提取党参基因组DNA为模板,通过单因素实验分析了ISSR-PCR反应体系中MgCl2、dNTPs、引物浓度、TaqDNA聚合酶、模板DNA用量及退火温度对ISSR-PCR扩增的影响.结果：建立了重复性好,分辨率高的ISSR-PCR反应体系,即在25μL反应体系中,含有10×PCRBuffer缓冲液2.5μL,MgCl22.0mmol·L-1,dNTPs0.5mmol·L-1,引物0.4μmol·L-1,TaqDNA聚合酶1.0U,模板DNA为30ng;扩增程序为：94℃预变性5min,然后94℃变性30s,51.7℃退火1min,72℃延伸1.5min,共计35个循环,循环结束后在72℃延伸7min,4℃保存.结论：建立了适用于党参的ISSR-PCR反应体系,为应用ISSR技术鉴定党参种质资源、分子标记辅助选择育种及其遗传多样性研究奠定了基础.

简介：为建立暴马丁香ISSR-PCR最佳反应体系,本研究以暴马丁香基因组DNA为模板,首先通过单因子试验设计筛选出各影响因子比较适宜的浓度范围,再利用正交试验,对暴马丁香ISSR-PCR反应有影响的模板DNA、dNTPs、Mg2＋、TaqDNA聚合酶和引物浓度等5种因素4个水平进行了优化试验。暴马丁香的ISSR-PCR最佳反应体系最终确定为：在25μL的反应体系中,DNA模板是40ng,Mg2＋浓度为2.0mmol/L,引物浓度为0.4μmol/L,TaqDNA聚合酶用量为1.5U,dNTPs浓度为0.2mmol/L。利用该体系从60条ISSR引物中筛选出了扩增条带清晰、多态性好的10条引物。这一体系的建立及多态性引物的筛选为以后利用ISSR分子标记技术进行暴马丁香的有关研究提供了科学依据。

简介：本研究利用Me2Em4正反向引物组合对影响梾木属SRAP-PCR反应体系的Mg2＋、Taq聚合酶、dNTP和引物浓度4个因素进行L9（34）正交试验,采用正交设计直观分析及方差分析对影响SRAP反应的4个因素进行分析,并对模板DNA浓度进行了单因素试验分析。结果表明,梾木属SRAP-PCR20μL反应体系的最佳组合为：Taq聚合酶2.0U、Mg2＋浓度1.5mmol/L、dNTP浓度0.15mmol/L、Primer浓度0.30mmol/L、模板DNA浓度5.5mg/L以及含有2μL不含Mg2＋的10倍稀释缓冲液。各因素对梾木SRAP-PCR反应的影响大小依次为：dNTP、Taq聚合酶、Mg2＋和Primer。最后运用优化体系从100对SRAP引物组合中筛选出26个多态性SRAP标记,可用于梾木属不同种间亲缘关系、系统进化和遗传多样性等方面的研究。

简介：酶能够催化生物化学反应，不仅种类繁多，而且在催化方式上也具有多样性的特点。

简介：在人教版高中《生物·选修3·现代生物科技专题》关于PCR的教学中，有几个问题会经常困扰教师和学生。下面就列举这些问题并作以解答。

简介：研究酶膜反应器系统对酶活的影响,结果其对Alcalase具有很好的保留效果。其中蠕动泵运转过程对酶的破坏和超滤膜对酶的吸附是导致Alcalase酶活损失的主要原因。利用DesignExpert6.0.5设计四因素三水平的响应面分析试验,求得酶膜反应器制备燕麦抗氧化肽的最佳工艺条件：底物含量3%、加酶量3.2%、料液流量45L/h、操作压力0.07MPa、温度55℃、pH7.3。在该条件下产物的DPPH清除率可达57.39%。

简介：采用GC-MS、电子鼻、感官评价方法,探讨Maillard反应对豆粕酶解物挥发性风味成分的影响。结果表明：样品SM-AR中富含醛类、含硫化合物、糠醛等与肉香味有关的Maillard反应产物,其种类和含量明显比样品SM-EH和样品SM-UAR的丰富;电子鼻检测结果发现,样品SM-AR的电子鼻响应值明显比其他2个样品的高,且7号、9号传感器比其他传感器有更高的响应值,说明样品SM-AR的挥发性成分中含硫化合物的气体较多;从PCA分析、LDA分析和感官评价均可看出样品SM-AR与其他样品间存在很大差异。

简介：目的：对现有的2种国产抗-HCVELISA试剂检出的反应性标本进行Realtime-PCR扩增,对结果进行分析,比较2种方法的检出率。为制定ELISA检测结果假阳性的献血者献血资格的恢复措施提供依据。方法：对日常工作中的检测标本用2种抗-HCVELISA两步法试剂做初检,反应性结果再次双孔复试。对任何一种试剂经复试检测后仍为反应性的标本进行Realtime-PCR扩增,对所有检测结果进行分析。结果：共检测无偿献血标本63169份,其中检出抗-HCV反应性标本206份,对206份标本进行Realtime-PCR扩增,共扩增出91例HCV-RNA阳性标本,53例科华试剂单反应性标本中仅2例HCV-RNA结果为阳性,41例新创试剂单反应性标本中6例HCV-RNA结果为阳性。ELISA试剂检出的标本S/CO值在不同的区间内的,都有HCV-RNA为阳性的标本。结论：ELISA试剂检测出的抗-HCV标本很多可能为假阳性,特别是单侧试剂呈反应性的标本。但即使ELISA检测S/CO值仅在灰区的单试剂反应性标本,仍不能排除为HCV感染者。

简介：考察了在正己烷、AOT/异辛烷反胶束体系、[bmim][PF6]离子液体和[bmim][BF4]离子液体四种体系中脂肪酶CCL催化醋酸乙烯酯与异辛醇的转酯反应以及影响反应转化率的一些因素,确定了较为适宜的反应条件;进行了脂肪酶CCL催化醋酸乙烯酯与异辛醇的转酯反应酶的重复利用性实验;扩展了醇的种类,考察了直链醇（己醇）、不饱和醇（异戊烯醇）、2级醇（仲辛醇）在两种离子液体和正己烷中转化率。

简介：摘要目的探讨阿替普酶治疗急性心肌梗死的临床疗效并对其不良反应进行分析。方法选取我院于2010年3月至2013年3月收治的急性心肌梗死患者共96例，将其随机分为两组，分别为实验组和对照组，每组各48人。所有患者均在就诊30min内开始静脉溶栓，实验组给予阿替普酶治疗，将阿替普酶50mg溶于50ml专用溶剂中，先静脉推注8mg，剩余42mg在90min内滴注完毕。溶栓前后均给予一定量的低分子肝素钙进行皮下注射，每天2次。对照组给予尿激酶治疗，先将150万U的尿激酶溶于100ml生理盐水中，然后于30min内滴完，随后进行APTT监测，并进行低分子肝素钙皮下注射，每天2次。两组在无严重不良反应的前提下均进行8天。结果与对照组相比，实验组患者中胸痛症状缓解和冠状动脉再通的人数稍高，但差异无统计学意义（P>0.05）；在不良反应情况中，实验组的心率失常、心力衰竭、梗死后心绞痛人数显著低于对照组（P<0.05）。结论阿替普酶的临床疗效与尿激酶相当，但不良反应低于尿激酶。

简介：两种磷系阻燃剂阻燃聚氨酯硬泡的对比研究钱立军，冯发飞，许国志（北京工商大学材料科学与工程系）／塑料工业，2013．08通过箱式发泡法制备了含有添加型阻燃剂甲基膦酸二甲酯与反应型阻燃剂聚磷酸酯多元醇OP550的聚氨酯硬泡（RPUF）。利用热重分析仪、氧指数仪、锥形量热仪研究了体系中阻燃剂质量分数均为10％的情况下，两种不同类型阻燃剂的添加比例对聚氨酯硬泡热性能与阻燃性能的影响。结果表明，同时添加两种阻燃剂可提高聚氨酯硬泡在高温下的残炭率，

简介：利用分子生物学中的聚合链式反应（PCR）方法对毛皮中的貂基因成分进行鉴定检测研究。研究设计了貂线粒体基因特异性引物和探针,优化了PCR反应体系和条件,采用了普通PCR和实时荧光PCR（RT-PCR）两种PCR检测方法进行比较。结果表明,设计的引物和探针在9份貂肉样品中通用性好,在兔、狐狸和貉子等10种其他物质中特异性良好,在于貂毛皮的PCR鉴定检出率为100%。但是在实时荧光PCR检测方法对样品的前处理要求比较高,检出率低于普通PCR检测方法,只有不到66.7%,对于市场上的貂毛皮鉴定检测,还是普通PCR方法比较好。

简介：摘要目的指导工作人员在PCR实验室日常工作中更好的了解掌握PCR的操作。

简介：摘要目的研究高敏C—反应蛋白与心肌酶测定对急性心肌梗塞与慢性冠心病的实验诊断的临床意义。方法应用免疫比浊法测定血清高敏C-反应蛋白（hs-CRP），用速率法检测血清心肌酶谱（AST、CK、CK—MB、LDH、HBDH、LD1），对54例冠心病患者与38例急性心梗患者同时进行了以上项目的检测，并做深入地分析。结果急性心梗组的hs-CRP明显高于冠心病组，P<0.01，有显著性差异，并从中看到急性心梗时HS-CRP明显增高。结论检测血清中hs-CRP的含量，结合心肌酶谱测定对于急性心梗患者的早期诊断及疗效的观察有重要意义。

简介：以咖啡因为印迹分子、丙烯酰胺（AM）为功能单体、乙二醇二甲基丙烯酸酯（EGDMA）为交联剂、偶氮二异丁腈（AIBN）为引发剂,沉淀聚合法制备印迹聚合物微球．考察印迹分子、引发剂、单体和介质的配比及介质的种类的影响,并用扫描电镜和红外光谱表征聚合物结构．结果表明,n（咖啡因）∶n（AM）∶n（EGD-MA）＝1∶4∶20时,在乙腈介质中所制备的印迹聚合物微球的粒径较小、形态与吸附性能较好、最大表观结合量为34．4071μmol/g．

简介：摘要院通过介绍某旧车间混凝土基座检测工程实例，根据检测结果对结构现状条件下的损伤情况及承载能力进行评定计算，并针对其受损情况提出可靠且经济的加固措施，以达到正常使用的功能要求。

简介：一封公开信将湖南日化经销商和天美联盟的对抗升级，但在经历了近一个月的斗法后，天美联盟在湖南的门店却不降反升，从最初的3家增加到80多家。看似合作分歧的背后，却是新型零售模式和传统代理模式间的利益拉锯。