简介：目的：探讨转录水平基因沉默（TGS）技术和转录后水平基因沉默（PTGS）技术对肝素酶（HPA）基因干扰效果及其对肝癌SMCC-7721细胞侵袭能力的影响。方法从HPA基因启动子区和编码区分别设计并合成TGS和PTGS的小干扰RNA（siRNA），并转染肝癌细胞SMMC-7721；实时半定量PCR和Westernblotting检测TGS和PTGSsiRNA转染后48、72和96hHPA的表达，并设空白组作为对照；Transwell小室实验检测干扰后SMMC-7721细胞的侵袭能力。结果TGS和PTGS两种技术在转染48h后，从mRNA和蛋白水平上均能成功干扰HPA表达；转染后72h，PTGS组HPA恢复表达，而TGS组仍保持沉默；转染后96h，两组HPA均恢复表达。Transwell小室实验表明，TGS和PTGS组HPA基因均能使SMCC-7721的穿膜细胞数减少，TGS组效果更明显。结论TGS技术沉默肝癌SMMC-7721细胞中HPA基因的能力优于PTGS技术，并使肝癌细胞的侵袭能力显著降低。

简介：

简介：目的利用小鼠乙酰肝素酶pcDNA3.1(+)表达载体转染高转移潜能肝癌细胞株(Hca-F)和低转移潜能肝癌细胞株(Hca-P),研究其对小鼠肝癌细胞血道及淋巴道转移的影响.方法构建pcDNA3.1(+)-hpa质粒,以lipofectamine2000作为转染试剂,将其分别转至Hca-F、Hca-P细胞株.转染空载体的肝癌细胞作为对照.血道转移实验:小鼠尾静脉注射肿瘤细胞,30d后观察小鼠的肺部转移瘤生长情况.淋巴道转移实验:在小鼠右下肢爪垫内侧皮下注射肿瘤细胞,30d后观察荷瘤鼠腋窝淋巴结或/和腹股沟淋巴结转移情况.结果尾静脉注射转染有pcDNA3.1(+)-hpa质粒的高转移Hca-F和低转移Hca-P株,荷瘤小鼠的肺表面转移结节数分别为(37.5±2.63)个和(32.6±2.91)个,显著高于其各自空白对照组的(31.3±2.79)个和(14.2±2.38)个(P<0.05).皮下注射转染有pcDNA3.1(+)-hpa质粒的高转移Hca-F和低转移Hca-P株,荷瘤小鼠淋巴结转移率分别为93.3%和83.3%,显著高于各自空白对照组(P<0.05).结论乙酰肝素酶基因过表达对小鼠肝癌细胞血道及淋巴道转移均有一定的促进作用.

简介：1病历摘要

简介：目的观察乙酰肝素酶在脂肪肝中的表达，以探讨其在脂肪肝中的作用。方法采用酒精灌胃造脂肪肝的模型，运用免疫组化的方法检测乙酰肝素酶。结果在脂肪肝中，乙酰肝素酶的表达明显增强，且与甘油三酯的水平高低有关。结论氧化应激、缺氧诱导乙酰肝素酶的表达，且乙酰肝素酶参与脂肪肝的形成。

简介：肝素酶（HPSE）是一种糖苷内切酶，能特异性水解位于细胞表面、细胞外基质及基底膜的硫酸乙酰肝素。肝素酶可促进肿瘤浸润、转移和血管生成，并参与免疫监视、胚胎植入等病理生理过程。本文对HPSE促进肿瘤转移的相关机制和肝素酶抑制剂的相关研究进展进行综述。过程。本文对HPSE促进肿瘤转移的相关机制和肝素酶抑制剂的相关研究进展进行综述。

简介：目的：探讨肝素干预对脓毒症小鼠肾脏肝素酶表达的影响及其保护性作用。方法：选取6~8周龄SPF级健康雄性C57BL/6小鼠80只,采用CLP法建立小鼠脓毒症模型。依照随机原则,分为假手术组、假手术肝素组、脓毒症组、脓毒症肝素组。在造模后4h、24h两个时间点分别采集标本,每个时间点每组各10只。分别在各个时间点采血、摘取肾脏采集标本。利用ELISA的方法检验IL-1β、IL-6、IL-10和TNF-α炎性因子表达水平,以及BUN和Cr浓度。光镜下观察肾脏病理改变,免疫组织化学的方法观察肝素酶表达水平的变化。结果：脓毒症组4hCr,24hBUN、Cr出现增高,均显著高于对照组（P〈0.05）,给予肝素干预后,脓毒症组小鼠4hCr,24hBUN、Cr均显著下降。脓毒症组小鼠4h免疫组织化学显示肝素酶表达显著高于对照组（P〈0.05）,肝素干预后脓毒症组小鼠4h肝素酶表达显著低于脓毒症组（P〈0.05）。肝素干预组的肾脏病理损害明显较脓毒症组轻。结论：肝素能够抑制肾脏内的肝素酶的表达,这可能是肝素保护脓毒症所致急性肾损伤的作用机制之一。

简介：木薯是世界第三大薯类作物,所产淀粉广泛用作食品和工业原料,是重要的粮食和经济作物。木薯蔗糖合酶是将光合同化物蔗糖向淀粉转化的第一个关键酶,前期本课题组通过酵母单杂交分析发现αNAC可能是木薯蔗糖合酶Ⅰ基因的调控因子,本研究在此基础上获得了αNAC基因转录序列并克隆其编码序列,发现编码蛋白具有典型的NAC和UBA保守结构域。αNAC基因在木薯地上部叶和地下部块根肉中转录活性较高,为β-actin基因的5%~25%,在施用外源激素条件下转录活性显著上调,其中茉莉酸达到峰值时间最短,水杨酸次之,乙烯、脱落酸、赤霉素和生长素较长。此外,在MeSuSy1Promoter::GUS的转化株中二次过表达αNAC基因,发现二次转化株中GUS酶活显著低于单价转化株,表明过表达αNAC基因可以显著抑制木薯蔗糖合酶Ⅰ基因的转录活性。

简介：目的：对炎症细胞因子TNF-α及IFN-γ刺激下，人NOX1基因的表达调控进行初步分析。方法：将NOX1基因5′-端上游序列连接到无启动子的PGL3-BASIC质粒，构建了PGL3-BASIC／NOX1报告质粒。PGL3-BASIC／NOX1质粒转染A549细胞，用TNF-α、IFN-γ刺激12h，双荧光素酶报告基因系统检测基因表达情况。结果：克隆的NOX1片段具有较强的启动子活性，在TNF-α和IFN-γ共同刺激下，转染报告基因的A549细胞萤光素酶活性与对照相比有明显的增高（约4．3倍）。分析显示NOX1基因5′端上游序列片段含有NF-KB结合位点，提示细胞因子刺激的荧光素酶表达增强可能与NF-KB位点激活相关。结论：NOX1基因表达水平明显受到炎症细胞因子的调控，提示该基因可能参与机体免疫防御（特别是上皮细胞免疫防御），值得进行深入研究。

简介：目的了解食源性变形杆菌的氨基糖苷类耐药基因情况。方法收集2011—2014年石家庄市售各类食品中分离到的对阿米卡星和庆大霉素至少有一种耐药的变形杆菌124株,用PCR、测序和基因库在线比对方法分析6种氨基糖苷类修饰酶基因与3种16SrRNA甲基化酶基因。结果124株变形杆菌中氨基糖苷类修饰酶耐药基因aacC2、aacA4、aadA1和aphA6的检出率分别为95.2%（118/124）、80.6%（100/124）、73.4%（91/124）和5.6%（7/124）;16SrRNA甲基化酶耐药基因rmtB检出率为87.1%（108/124）。aacC1、aadB、armA和rmtC基因均未检出。结论aacC2型氨基糖苷类修饰酶基因与rmtB型16SrRNA甲基化酶基因流行是食源性变形杆菌对氨基糖苷类抗生素耐药的重要原因。

简介：[摘要]目的：旨在证实HPSE参与了心肺复苏后脑血管通透性改变，确定HPSE在HIE患者血管通透性中的作用与地位。方法：通过2019年6月至2020年6月以院内心跳骤停后复苏成功的患者为研究对象并根据患者12小时格拉斯哥（GCS）评分分3组。收集HPSE、颅内压等数据并整理后，进行统计分析。结果：1.根据各组颅内压变化，明确脑血管通透性的改变参与了心肺复苏后HIE的形成过程；2.证实HIE患者的HPSE与病情严重程度的相关性；3.HIE的严重程度与患者预后成正向关系；4.HPSE参与了心肺复苏后脑血管通透性改变。结论：HPSE参与了缺血缺氧性脑病的形成，其作用机制是通过改变脑血管通透性参与。

简介：蛋白尿是众多肾脏疾病的主要临床表现，肾小球滤过屏障的完整性决定着对蛋白质的选择通透特性。肾小球基底膜中硫酸乙酰肝素在电荷屏障的维持中起重要作用。乙酰肝素酶作为新近克隆出来的一种内切糖苷酶，与肿瘤的转移浸润密切相关。近年来研究发现其通过选择性降解肾小球基底膜硫酸乙酰肝素侧链，也参与蛋白尿的发生。本文就其分子学特点、调控以及与蛋白尿性肾脏疾病的关系作一综述。

简介：2.3　PTEN、COX2与大肠癌转移的关系　无淋巴结转移的大肠癌中PTEN阳性表达率为86.7％(39/45),本研究结果还表明在大肠癌中PTEN的表达与COX2的表达呈负相关,应用SP法免疫组化方法检测10例正常大肠黏膜、80例大肠癌组织中PTEN和COX2的表达

简介：摘要抗凝血酶Ⅲ(AntithrombinⅢ,AT一Ⅲ)和肝素辅因子Ⅱ(heparincofactorⅡ,HCⅡ)是以肝素辅因子的形式存在于血浆中，是由肝脏和内皮细胞合成的一种多功能的丝氨酸蛋白酶抑制物，AT-Ⅲ升高一般不会引起病理性后果，但AT-Ⅲ和HCⅡ水平降低可导致血液的高凝状态，对可发生血栓前状态的各种疾病的辅助诊断、指导治疗和预防等具有重要指导意义。本文就AT-Ⅲ和HCⅡ的分子特点、生物学功能及临床意义进行综述。

简介：摘要目的探讨分离胶管与肝素锂管对心肌酶谱（AST、LDH、CK、LD-1、HBDH、CK-MB）测定的影响。方法用三种试管分离胶促凝管、肝素锂抗凝管与普通干燥管分装全血与混合血清，37℃水浴1.5与3小时后测定心肌酶谱。结果37℃水浴3小时内,全血标本随时间延长，肝素锂管组与普通干燥管组心肌酶谱中的LDH、HBDH与LD-1均有上升趋势，分离胶管组则相对比较稳定。同一时间段,混合血清分离胶管组、肝素锂管组与普通干燥管组间心肌酶谱均无显著性差异（P>0.05）。全血标本三种试管间AST、CK与CK-MB无显著性差异（P>0.05），LDH、HBDH与LD-1有极显著性差异（P<0.01）。结论分离胶管与肝素锂管的化学成份对心肌酶谱本身影响不大，但可有效延缓血细胞内心肌酶析出，比较起来，分离胶管因为隔开了血细胞与血清能更接近标本采集时的状况。

简介：目的探讨国人膀胱癌乙酰肝素酶的表达水平及其与膀胱癌发生、发展、转移和复发的关系。方法应用免疫组化EnVisionZ．步法研究58例膀胱癌患者中乙酰肝素酶蛋白的表达水平，10例正常膀胱黏膜为对照组。结果乙酰肝素酶在膀胱癌中阳性表达22例（37．9％），其表达率与肿瘤的病理分级、临床分期、复发和淋巴结转移有相关性（P〈0．05）。结论乙酰肝素酶蛋白的异常表达可作为膀胱癌患者发生和发展的预后参数。

简介：木糖还原酶是酵母代谢木糖发酵的关键酶之一。根据已报道的木糖还原酶基因的全序列设计引物,从休哈塔假丝酵母中克隆得到1110bp大小的片段。将木糖还原酶基因亚克隆到酿酒酵母的整合表达载体p406ADH1中,醋酸锂转化法将线性化重组质粒pYX-AK-xyl1转化到酿酒酵母W5,对阳性转化子进行酶活测定,结果表明,以辅酶DANH和NADPH为底物诱导,转化子均表现出活性,酶活分别为6.513U/mg和7.080U/mg,是受体菌W5酶活的1.4倍（NADH）和1.3倍（NADPH）,其酶活比为0.919。

简介：植酸酶做为一种新型的酶制剂，引起了国内外研究者的极大关注。植酸酶广泛存在于动植物组织和微生物细胞中，分解植酸磷，降低磷的排放量。文章综述了植酸酶的分类、理化性质、作用机理、菌种选育，并着重讨论了近年来植酸酶基因工程改造等问题。

简介：用含卡那霉素的培养基首先对转几丁质酶基因烟草种子和烟苗进行初步筛选鉴定,再用WesternBlot进一步证实抗卡那霉素的转基因烟苗中外源转几丁质酶基因的表达.然后研究半嵌套式PCR(Semi-nestedPCR)检测转几丁质酶基因烟草植株及其烤后烟叶中的所转目的基因;利用限制性内切酶HindⅢ对半嵌套式PCR产物进行酶切,从而验证半嵌套式PCR产物是否为真正的目的基因.研究结果表明,半嵌套式PCR是一种快速、灵敏的检测转几丁质酶基因烟草植株及烤后烟叶的方法.

简介：摘要目的探讨低分子肝素联合降纤酶治疗进展型脑梗死的临床疗效。方法收治51例进展型脑梗死患者，将以上患者随机分为对照组和治疗组（对照组25例，治疗组26例）。两组均给予基础治疗（中国脑血管卒中指南治疗标准-脑保护剂、调整血压、血脂、减轻脑水肿、抗感染等常规治疗），对照组再次基础上给予降纤酶治疗，治疗组在此基础上给予低分子肝素联合降纤酶；疗程结束后，根据第四届全国脑血管病会议修订的神经功能缺损程度评分标准分别评价治疗前后两组临床疗效并对结果进行分析。结果两组均无死亡病例。治疗组与对照组在治疗前临床症状及头颅CT、MRI、神经系统检查无明显差异，治疗1个疗程后，治疗组临床疗效总有效率81.5％，恶化1例，对照组临床疗效总有效率74.8％，恶化2例。两组临床疗效总有效率比较，差异有统计学意义，p＜0.05。结论进展型脑梗死发病的早期选用低分子肝素联合降纤酶治疗可提高临床疗效，有助于提高患者脑梗后生活质量，值得借鉴。